靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒的构建和序列分析

[目的]利用RNA干扰技术,以Bcl-2为靶基因,设计构建重组体,并进行序列分析,探索肿瘤基因治疗的新途径。[方法]设计有小发夹结构的两条DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至转录载体Pgenesil-1上构建重组体,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析。[结果]将合成的DNA片段退火后克隆至载体上,经酶切及序列鉴定为目的序列,靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒构建成功。[结论]靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒的成功构建,为下一步利用该重组体干扰肿瘤细胞中Bcl-2的mRNA转录,探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。     

RNAi表达载体对卵巢癌Bcl-2基因表达的抑制作用

目的:探讨Bcl-2基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)表达载体对卵巢癌SKOV3细胞Bcl-2基因表达的抑制作用。方法:构建针对Bcl-2基因的RNAi表达载体,脂质体法转染卵巢癌SKOV3细胞株,应用RT-PCR及流式细胞仪检测其对Bcl-2基因mRNA及蛋白表达的影响。结果:构建的两种表达载体均抑制了Bcl-2基因的mRNA及蛋白的表达,其中转染2号载体的SKOV3细胞Bcl-2基因mRNA表达仅相当于对照组的32.3%,蛋白抑制率达60.18%。结论:RNAi表达载体可以有效抑制Bcl-2基因的表达。     

重组人表皮生长因子凝胶联合LEEP治疗宫颈病变的临床观察

探讨宫颈环形电切术（LEEP）联合重组人表皮生长因子凝胶对宫颈病变的治疗价值。对185例宫颈病变患者行电子阴道镜下细胞学检查或宫颈多点活检以及行LEEP术,术后随机分成两组,术后自然修复组为对照组92例;治疗组为易孚局部上药组93例。观察术后恢复情况,并对其疗效做回顾性分析。现报告如下。     

EGF受体介导c-erbB2癌基因反义寡核苷酸对p185蛋白表达的影响

目的 研究c-erbB2癌基因反义寡核苷酸探针^99mTc-ASODN-EGF对SK-Br-3乳腺癌细胞c-erbB2蛋白表达的影响。方法将反义寡脱氧核苷酸与次乙酰双半胱氨酸偶联,用锝(^99mTc)标记,再与表皮生长因子联合,形成分子复合物^99mTc-ASODN-EGF。将该复合物给予SK-Br-3乳腺癌细胞,用免疫组化方法测定细胞膜c-erbB2蛋白的表达。结果 ^99cmTc-ASODN-EGF明显抑制c-erbB2蛋白表达,免疫组化的平均光密度值最低,对照正义和无义组对蛋白表达的影响较小。结论 c-erbB2反义寡脱氧核苷酸明显抑制目的基因表达,使p185蛋白减少,细胞活力减弱。     

合并贫血体检人群患慢性病风险及其影响因素分析

目的:调查桂林市体检人群贫血发生状况,探讨其与常见慢性病的相互影响。方法:收集2019年中国人民解放军联勤保障部队第九二四医院健康医学科开展包含血常规、肝功、肾功、血糖、血脂等项目检测的桂林市38 948例健康体检资料,采用SPSS 17.0软件进行横断面筛查统计分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:桂林市健康体检人群贫血患病率为6.7%,其中60岁以上患病率最高(10.41%)且以男性为主,患病率为13.60%,但男性总体贫血率显著低于女性(5.24%vs 8.69%,P<0.01)。贫血人群中轻度贫血占94.9%,主要为男性,中度贫血占4.9%,以女性为主,重度贫血占0.19%。按细胞形态分类,贫血人群以小细胞低色素性贫血为主,占33.95%,其中女性显著高于男性(37.42%vs 29.7%,P<0.01)。本次调查体检人群患高血脂和高血压(HUA)人群最多,分别占41.93%、24.38%,且男性慢性病患病率均显著高于女性(P<0.01)。贫血人群中仅患慢性肾病(CKD)风险较正常人群明显上升(5.29%vs 1.36%,P<0.01),但贫...     

bcl-2基因对乳腺癌细胞多药耐药性的影响

乳腺癌细胞的多药耐药性是临床上常见的影响乳腺癌化疗效果的原因之一.近年来发现,抗凋亡基因bcl-2在乳腺癌细胞多药耐药性的产生过程中起到了重要的作用.bcl-2基因通过抑制乳腺癌细胞的凋亡、延长细胞生存时间等机制,诱导乳腺癌细胞对化疗药物产生耐药性.用反义寡核苷酸抑制 bcl-2的表达可以增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.     

靶向bcl-2基因转录shRNA重组质粒的构建和序列分析

目的 利用pgenesil-1质粒载体,以bcl-2为靶基因,设计构建重组体,以用于后继的RNA干扰研究.方法 设计3对有小发夹结构的两条DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至转录载体pgenesil-1上构建重组体,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切电泳鉴定后,进行测序分析.结果 将合成的DNA片段退火后克隆至载体上,经酶切及序列鉴定为目的 序列.结论 靶向bcl-2基因转录shRNA的重组质粒可以在体外成功构建,为下一步利用该重组体干扰肿瘤细胞中bcl-2的mRNA转录,探索肿瘤基因治疗的新途径打下基础.     

免气腹腹腔镜与传统腹腔镜手术治疗卵巢肿瘤的比较

目的:探讨免气腹腹腔镜手术治疗妇科肿瘤的应用及其优点和可行性。方法:比较免气腹与气腹法腹腔镜手术分别治疗卵巢良性肿瘤94例与87例的平均手术时间、术中平均出血量、平均肛门排气时间、术中血气分析、术后并发症等指标。结果:两组手术时间、术中出血量、肛门排气时间、术后发热、术后康复差异无统计学意义(P<0.05)。术后并发症发生率差异有统计学意义(P>0.05)。结论:免气腹腹腔镜手术治疗卵巢良性肿瘤可行,更具安全性,术后并发症发生率低,有较好的临床应用价值。     

米非司酮配伍米索前列醇抗早孕流产物病理观察

对30例口服不同剂量米非司酮配伍米索前列醇抗早孕妇女进行阴道排出物蜕膜及绒毛组织的病理形态检查、镜下检查，并以同期停经49日内人工流产标本30例作为对照组比较，结果显示：药物流产者绒毛退化的量及其退变程度较对照组严重，且不同剂量药物流产者的流产物病理变化差异无显著性，提出米非司酮是否直接作用于滋养细胞的问题值得进一步研究．