人肝癌特异性EB病毒载体—p^EBAF介导hGM—CSF基因的转移及表达

目的：探索人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法：构建p^EBAF/hGM-CSF基因克隆,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白（AFP）的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC7721,构建两围基因的细胞克隆HepG2/hGM-CSF,SMMC7721/hGM-CSF,用MTT比色法测定细胞上清中hGM-CSF活性。结果：HepG2/hGM-CSF细胞上清hGM-CSF活性平均为46．5ng/ml/10^6/24h,SMMC7721细胞上清中无明显hGM-CSF活性。结：载体p^EBAF介导的hGM-CSF基因能在分泌AFP的肝细胞中获得特异性表达。     

抗血管内皮生长因子抗血清对小鼠膀胱癌的影响

目的　观察抗血管内皮生长因子 (VEGF)抗血清对小鼠膀胱肿瘤血管生成和肿瘤生长的影响 ,探讨膀胱肿瘤治疗的新途径。　方法　采用重组VEGF蛋白制备抗VEGF抗血清 ,ELISA方法检测其特异性 ;建立小鼠膀胱癌模型 ,并将荷瘤小鼠随机分为抗VEGF抗血清组和对照组 ,分别经腹腔注射抗VEGF抗血清和普通小鼠血清 ;检测肿瘤内微血管密度 (MVD) ,并称取肿瘤重量。　结果　实验制备了高度特异性的抗VEGF抗血清 ,荷瘤小鼠用药后抗VEGF抗血清组MVD值 (7.5 1± 2 .88)明显低于对照组 (14 .4 8± 3.92 ) ,抗VEGF抗血清组小鼠平均瘤重较对照组稍轻 ,P =0 .6 0 5 ,差别无显著性意义。　结论　抑制VEGF作用可以减少膀胱肿瘤的血管生成 ,为膀胱肿瘤抗血管生成疗法提供了依据 ,并可能成为膀胱肿瘤重要的辅助治疗手段之一。     

一种SARS冠状病毒诊断基因芯片的研制

通过筛选SARS冠状病毒的基因序列，获得其有效检测的基因位点；利用已有的基因芯片技术，研制了一张用于SARS冠状病毒诊断的基因芯片。经临床标本检测验证，该基因芯片的粗符合率达到94．29％；检测灵敏度达到10^-2／ml病毒分子，具有很好的实用性。     

人血管内皮生长因子受体Flt-1胞外区2-3loop在Pichia.pastoris酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究

目的研究人Flt-1胞外区2-3loopcDNA在Pichia.pastoris酵母中的表达,获得高效表达的具有生物学活性的重组Flt-1(2-3)。方法采用PCR扩增Flt-1(2-3)基因,经DNA序列分析后,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia.pastoris酵母表达载体中,构建重组质粒pPIC9K/Flt-1(2-3),转化酵母宿主菌GS115,筛选His     

59例经网络征集的“自疑HIV感染者”流行病学特征与临床表现的分析

目的 了解网络征集的59例"自疑HIV感染者"流行病学特征和临床表现.方法 "自疑HIV感染者"定义为网络聊天室中自诉具有至少3项类似艾滋病症状者:持续低热、皮疹、淋巴结肿大、乏力、腹泻、体重下降或CD4+T淋巴细胞计数低于正常.通过网络问卷调查,在88例报名者中选择59例做志愿临床检查与实验室检测.结果 59例"自疑HIV感染者"来自22个省(市),男性54例(91.5%),平均年龄34岁(22～53岁).84.7%"自疑HIV感染者"在出现自述"症状"前有过高危性行为."暴露"至"症状出现"之间的时间间隔中位数为15 d(1～365 d).59例"自疑HIV感染者"的HIV抗体、梅毒抗体及嗜异种性小鼠白血病病毒相关病毒(XMRV)检测均为阴性;1例丙型肝炎抗体检测阳性,CD4+T淋巴细胞计数算术均数为707个/μl.59例"自疑HIV感染者"中,有57例(96.6%)参加系统临床检查,40例无明显器质性病变.结论 未发现59例"自疑HIV感染者"存在HIV感染证据,也未发现有可以解释其症状的传染性疾病存在.     

病毒样颗粒技术的研究进展

病毒样颗粒（Virus-like Particles,VLPs）为不含病毒基因组的空壳或包膜状颗粒结构,与天然病毒颗粒结构相似。VLPs技术在病毒的组装与形态多样性等基础研究中发挥了重要作用。VLPs作为疫苗,可有效诱导机体产生免疫反应。VLPs具有独特的免疫学特性,不但能通过影响抗原递呈细胞发挥佐剂效应,还可以作为其它佐剂、多肽疫苗和核酸疫苗的整合平台设计多种形式的疫苗。在适宜条件下,VLPs可以包裹核酸或其它小分子物质,因此可以作为分子运载工具靶向性地递送基因或药物。VLPs还可以替代天然病毒在免疫学检测中发挥重要作用。     

流行性感冒病毒核酸疫苗研究进展

流行性感冒（流感）是由流感病毒引起的一种常见的急性呼吸道传染病。流感病毒是单股负链ＲＮＡ病毒,其ＲＮＡ分７～８个节段,分别编码７～８种病毒蛋白,如血凝素（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ,ＨＡ）、神经氨酸酶（Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｄａｓｅ,ＮＡ）、膜蛋白（Ｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＰ）、Ｐ蛋白（ＰＢ１、ＰＢ２,ＰＡ）和核蛋白（Ｎｕｃｌｅａｒｐｒｏｔｅｉｎ,ＮＰ）等（１）。流感病毒的每种蛋白都有其自身独特的功能,目前疫苗研制是针对以上各种蛋白展开。流感不仅可影响人们的正常生活,还易引发严重的并发症…     

阳离子脂质体联合转铁蛋白介导肝癌组织特异性载体在人肝癌细胞株中的表达

目的研究阳离子脂质体联合转铁蛋白(transferrin,Tf)介导甲胎蛋白(AFP)启动子/增强子载体对分泌AFP的人肝癌细胞株的双重靶向作用.方法测定比较阳离子脂质体Lipofectin、Lipofectin联合含双铁的人转铁蛋白[HTf(Fe)2]介导质粒pDR2luc、pEBAFluc转染分泌AFP的人肝癌细胞株(HepG2)、不分泌AFP的人肝癌细胞株(SMMC7721)、人肾癌细胞株(GRC)及非洲绿猴肾细胞(COS7)的转染效率,转染效率以液体闪烁计数仪单光子计数法测定荧光素酶活性估计.结果(1)除COS7外,其余3株细胞以Lipofectin+HTf(Fe)2介导pDR2luc的转染效率均比单用Lipofectin的转染效率高(均P＜0.01).(2)以Lipofectin介导pEBAFluc转染4株细胞,荧光素酶活性仅在能分泌AFP的HepG2中表达.(3)比较Lipofectin、Lipofectin+HTf(Fe)2介导pEBAFluc转染HepG2的效率,后者较前者高8倍多(P＜0.01).结论Lipofectin+HTf(Fe)2介导含人AFP启动子/增强子的质粒pEBAFluc转染细胞时对分泌AFP的人肝癌细胞株有双重靶向作用.     

人白细胞干扰素基因的克隆化及其在大肠杆菌中的表达

以新城疫病毒F株诱生的人脐血白细胞内提取的12S聚(A)RNA制备dscDNA,以pBR322为载体,建立了人干扰素cDNA的无性繁殖系,后者为0.85kb,并在大肠杆菌中有明显表达,达1.3～18×10~4单位/升菌液。经血清学和理化鉴定,表达的多肽为人α干扰素。     

人神经生长因子在昆虫细胞中的表达

神经生长因子(NGF)在外周及中枢神经系统的发育及存活方面起着重要的作用.它可以促进外周感觉神经元及背根神经节神经元的增生.中枢神经系统中,NGF主要存在于前脑底部胆碱神经元中,其脑中含量的减少与Alzheimer病引起的记忆力减退及老年斑沉积呈正相关[1].因此NGF药用方面的作用已受到人们的重视,它可望成为治疗Alzheime病的新型药物.