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21.
22.
丙型肝炎病毒核心蛋白基因的克隆及其高效表达 总被引:5,自引:2,他引:3
目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段。方法利用PCR技术,扩增出357bp的HCV核心蛋白基因片段,双酶切后将其插入到原核表达载体pET-32a,构建重组表达质粒pET-32a/HCVc。转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达。SDS-PAGE鉴定表达情况,Western blot鉴定表达产物的抗原性。结果 经IPTG诱导后获得了目的蛋白的融合表达;SDS—PAGE电泳显示其在32000处有一条融和表达条带;Western blot结果显示其具有HCV抗原特异性。结论 HCV核心蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,而且表达产物有良好的抗原性。 相似文献
23.
目的观察常规分割放射治疗加三维立体定向适形放射治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床效果。方法前4周对38例Ⅲ期非小细胞肺癌患者进行6MV X线的常规分割放射治疗,每周5次,每次照射剂量2 Gy,总量40 Gy;后2周针对肿瘤局部行三维立体定向适形放射治疗,分割剂量4~50 Gy/次,每周3次,总量24~30 Gy。锁骨上淋巴结有转移者采用X线和β线混合照射,照射剂量65~70 Gy。结果除有Ⅰ~Ⅱ度白细胞减少和轻度胃肠道反应外,均能完成治疗计划,肿瘤全部消失7例,部分消失28例,总有效率92%,1,2,3 a局部控制率分别为84%,52%,39%,生存率分别为84%,45%,28%。死亡原因仍以局部复发和远处转移为主。结论常规分割放疗加三维立体定向适形放射治疗非小细胞肺癌近期疗效明显,远期疗效需进一步观察。 相似文献
24.
25.
目的:探讨HCV核心蛋白N端119aa片段表达产物的抗原性及用于抗-HCV抗体检测的可能性。方法:把HCV C119-pEq32a/BL21重组菌进行发酵表达,提取包涵体,并用阳离子柱进一步纯化目的蛋白。用Western blot及ELISA分析该融合蛋白的免疫特异性及敏感性。结果:所表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的20%,SDS-PAGE结果表明所纯化的目的蛋白纯度大于95%。Western blot及ELISA结果显示该融合蛋白具有良好的免疫特异性,所检测的47份临床HCV感染血清的阳性率为91.5%,而阴性对照及HBV感染血清则未见阳性结果。结论:该HCV Cll9融合蛋白检测HCV感染患血清具有良好的特异性和敏感性,可望用于HCV抗体检测试剂盒的研制。 相似文献
26.
目的 通过体外实验研究雷公藤内酯醇(triptolide)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者树突状细胞(dendritic cell,DC)功能及成熟的影响,为进一步阐明雷公藤内酯醇的免疫学活性提供依据.方法 从SLE患者外周血分离单个核细胞,流式细胞仪分选DC,加入0、5、10、30μg/L的雷公藤内酯醇共孵育,24h后收集上清液,ELISA检测IFN-α、IL-6、TNF-α量,5d后收集细胞,流式细胞仪检测DC表型CD11c、CD80、CD86阳性率,光镜观察DC的形态,扫描电镜观察DC的超微结构.结果 雷公藤内酯醇显著减低活动期与非活动期SLE患者IFN-α、IL-6、TNF-α量,并呈雷公藤内酯醇浓度依赖性(P<0.05);雷公藤内酯醇可抑制SLE患者DC的分化和成熟,并呈雷公藤内酯醇浓度依赖性(P<0.05).结论 雷公藤内酯醇能够减弱SLE患者DC的功能,并抑制其分化和成熟. 相似文献
27.
28.
抗人整合素αυβ3单链抗体的构建和表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:利用基因工程抗体技术构建抗人整合素αυβ3单链抗体(scFv)。方法:从分泌抗人整合素αυβ3单抗(mAb)的杂交瘤细胞E10总RNA中,用RT-PCR扩增VH和VL基因,对其核苷酸序列分析后,通过PCR在VH和VL基因间插入柔性连接子(Gly4Ser)3 组装成scFv基因,并克隆至原核表达载体pTIG—TRX中。以重组子转化大肠杆菌B121(DE3)诱导目的基因表达。结果:转化菌可表达相对分子质量(Mr)为31000的scFv。Western blot证实,具有His6标签蛋白的表达。经低剂量的IPTG诱导和较低温度培养,scFv获得了可溶性形式表达。表达产物经Ni—NTA琼脂糖层析纯化后纯度达91%以上。ELISA鉴定证实,scFv具有良好的抗原结合活性。结论:成功地构建并表达抗人整合素αυβ3的scFv,为进一步临床研究奠定了基础。 相似文献
29.
目的观察烙灸联合腰背肌功能锻炼对后纵韧带破裂型腰椎间盘突出症患者髓核重吸收及复发率的影响。方法将经过常规保守治疗达到临床治愈的24例后纵韧带破裂型腰椎间盘突出症患者随机分为治疗组和对照组,各12例。对照组予腰背肌功能锻炼;治疗组在腰背肌功能锻炼的基础上予烙灸疗法,每周烙灸1次,每次30 min,治疗6月后追踪随访1年,比较2组的髓核吸收率及复发率。结果治疗组髓核吸收率为41.67%,对照组为16.67%,2组比较差异有统计学意义(P0.05);经过1年随访,治疗组复发率为25.00%,对照组为50.00%,2组比较差异有统计学意义(P 0.05);治疗组中髓核重吸收的患者复发率为20.00%,未发生髓核重吸收的患者复发率为28.57%,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论在腰背肌功能锻炼的基础上联合烙灸疗法,可以促进后纵韧带破裂型腰椎间盘突出症患者的髓核重吸收,进而降低腰椎间盘突出症的复发率,值得临床推广。 相似文献
30.
张彦明 《今日健康(家庭版)》2016,(8)
目的 研究患有早期近视的青少年患者采用浓度为1%的阿托品滴眼液治疗的临床效果.方法 选择以往我院收治的患有早期近视的青少年患者86例,随机分为对照组和治疗组,平均每组43例.对照组采用玻璃酸钠滴眼液进行治疗;治疗组采用浓度为1%的阿托品滴眼液进行治疗.比较两组早期近视药物治疗效果、治疗前后裸眼视力水平的改善幅度、用药期间不良反应.结果 治疗组患者早期近视药物治疗总有效率为90.7%,对照组为69.8%,差异显著(P<0.05);用药期间有1例出现不良反应,少于对照组的7例,差异显著(P<0.05);治疗前后裸眼视力水平的改善幅度明显大于对照组.结论 患有早期近视的青少年患者采用浓度为1%的阿托品滴眼液治疗,可以在保证安全的前提下最大程度改善视力水平. 相似文献