人胰岛淀粉样多肽沉淀细胞模型的体外构建

目的 构建人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)基因真核表达载体,并在无内源性IAPP表达的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株上进行体外表达实验,建立可产生hIAPP沉淀的细胞模型. 方法 应用RT-PCR技术扩增得到hIAPP cDNA,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IAPP; 随后用lipofectamine 2000介导转染CHO细胞,以RT-PCR法检测重组质粒在mRNA水平的表达,以Thiaflavin S染色的方法检测重组质粒在蛋白水平的表达. 结果 构建的pcDNA 3.1-hIAPP真核表达体系成功转染体外培养的CHO细胞,目的基因在mRNA 水平和蛋白水平均有表达,转染后培养48 h内的CHO细胞用Thioflavin S染色,与阴性对照相比较,证实有hIAPP的表达而导致细胞内淀粉样沉积发生. 结论 构建了hIAPP真核表达质粒, 并成功在体外表达, 从而建立了可产生IAPP淀粉样沉淀的体外哺乳动物细胞模型,为进一步研究胰岛淀粉样沉积的发病机制提供了良好的平台.     

控制医院内感染 加强消毒供应室管理

医院的消毒工作是预防医院感染、防止疾病传播的重要手段之一，感染是医院管理的重要内容之一。在控制医院感染中消毒供应室起着决定性的作用，供应室是控制院内感染的主要单位，它担当着医疗用品的回收、清洗、消毒、灭菌、发放等多项工作，其工作质量直接影响临床医疗、护理及科研等方面的效果。因此，必须加强供应工作质量的管理，以减少或杜绝院内感染，[第一段]