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作者报告鼠抗人胃癌单克隆抗体MG5相应抗原的纯化和初步鉴定。首先收集胃癌患者转移性腹水癌细胞。并制备可溶性抗原提取液。用concanavalin A(Con A)Sepharose 4B亲和层析法分离提取胃癌细胞糖蛋白成份后,再用MG5-Sepharose4B免疫亲和层析法纯化单抗MG5相应抗原。经高碘酸氧化,电泳脂蛋白染色SDS-PAGE和免疫印渍等实验分析,证实MG5相应抗原是一种含3个亚单位的糖蛋白,分子量分别为68kD、52kD和44kD,抗原决定簇存在于糖链上,免疫分析提示MG5相应抗原是一种新的胃癌相关抗原。 相似文献
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激光捕获显微切割细胞的全基因组DNA扩增 总被引:2,自引:1,他引:2
组织是多种细胞群体相互作用、相互依存的三维空间结构 ,这使得在相当长的一段时间内难以准确、深入地从分子水平研究某类特定细胞基因结构和功能的动态变化。肿瘤组织包括瘤细胞、其发源的正常细胞、淋巴细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等多种成分。在肿瘤分子病理学和基因组学研究中 ,排除非肿瘤细胞污染对实验结果的影响尤为重要[1] 。激光捕获显微切割 (lasercapturemicrodissection ,LCM)是在显微镜下从组织切片中分离、纯化单一类型细胞群或单个细胞的技术[2 ] 。它能有效地解除组织中细胞异质性造成的… 相似文献
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目的: 研究ΔNp63蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用 .方法: 应用免疫组化S-P法检测28例骨肉瘤石蜡标本中ΔNp63蛋白的表达情况.结果: 在28例骨肉瘤中仅有1例高分化骨肉瘤出现弱阳性反应,还有1例骨肉瘤ΔNp63表达为阴性,二者癌旁组织呈阳性反应(+).对照组的15例骨软骨瘤中,共有3例阳性,其中2例为(+),另1例为强阳性(+ + +).结论: ΔNp63在骨软骨瘤和骨肉瘤的癌旁正常组织中呈阳性或强阳性反应,推测p63可能具有肿瘤抑制基因功能. 相似文献
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济南市疾病预防控制中心于2 0 0 3年2~3月对济南市一职业中专一年级学生健康教育处方发放后艾滋病认知程度进行了调查分析。现将结果报告如下。对象与方法1 对象 职业中专一年级学生779名,年龄在1 5~2 5岁,平均年龄1 9 2 6岁。班级构成:大专班340人( 4 3 65 % ) ;职业中专班2 5 8人( 33 1 2 % ) ;普通中专班1 1 0人( 1 4 1 2 % ) ;高职班71人( 9 1 1 % )。2 方法 统一发放济南市教育局办公室印发的“预防艾滋病健康教育处方”,一周后,采用整群随机抽样法,对曾接受教育的学生进行调查,自行设计问卷,由调查人员讲明要求后,进行无记名问… 相似文献
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据不完全统计,我国存在有钉螺孳生而无血吸虫病流行(简称有螺无病)地区分布于10省、市、自治区的88个县(市),约735个乡(镇),而我省有7个县18个村[1]。为证实永胜县峨乡是否存在有螺无病现象,并分析其形成原因,本文于1996年对峨乡血吸虫病流行的病情、螺情等方面进行了系统调查,现将研究结果报告如下。 1 方法 1.1 人群病情调查 1.1.1 调查对象峨乡4~60岁人群共965人。 1.1.2 抗原的制备采用云南日本血吸虫尾蚴感染成功后的家兔肝脏,按常规方法,制备石蜡包埋福尔马林固定含有大量血吸虫卵肉芽肿肝组织切片,做成厚6μm的石蜡切片,存于4℃冰箱备用。 1.1.3 诊断血清羊抗人IgG荧光抗体购自上海生物制品研究所。其工作浓度为1:8,批号为960201。 1.1.4 受检血清从调查对象的耳垂或手指采血制成两个滤纸干血滴(每个血滴直径1cm),凉干后置于4℃冰箱备用。IFAT法:按[2]进行。 1.1.5 粪便检查对IFAT法检测阳性者,按常规粪便检查法进行。 1.2 保虫宿主感染情况调查对峨血吸血病保虫宿主的粪便进行孵化(顶管孵化法)。其中包括马9匹,黄牛8头、水牛28头、猪88头、骡14头、驴13头、羊四群。 1.3 螺情调查 1.3.1 1996年8月通过系统抽样和环境抽样方法对峨钉螺分布情况进行调查。依据螺点分布理论[3],共调查145个条(块),18169.5m2。 1.3.2 对捕获的钉螺进行解剖和逸螺,以检查有无血吸虫感染。 相似文献
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目的 检测一个中国近端指(趾)骨间关节黏连家系的致病基因突变.方法 收集该家系患者和家系成员的临床资料,采集外周血提取基因组DNA.运用聚合酶链式反应和Sanger测序法筛查先证者的NOG和GDF5基因.确定突变位点后,在家系成员中进行共分离分析并在200名正常对照中筛查该突变.结果 该家系患者中存在NOG基因c.502 T>C错义突变,该突变导致其编码蛋白Noggin第168位氨基酸由苯丙氨酸变为亮氨酸(p.F168L).在家系正常成员和200名正常对照中未检测到相同突变.该突变在dbSNP、ExAC等数据库中未见报道.在GDF5基因上未发现可疑突变.结论 NOG基因c.502 T>C错义突变是该家系发病的原因. 相似文献
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目的在一个肝豆状核变性(WD)家系中进行致病突变鉴定和产前基因诊断。方法酚-氯仿法提取外周全血或妊娠13周胎儿绒毛组织基因组DNA;利用PCR-Sanger测序技术对先证者ATP7B基因外显子及外显子/内含子衔接区序列进行突变分析;针对先证者携带的突变位点,应用聚合酶链反应(PCR)-高分辨熔解曲线(HRM)方法对先证者家系4名成员进行突变鉴定,并在此基础上为患儿母亲提供产前基因诊断。结果先证者ATP7B基因第8外显子存在纯合致病突变c.2333GT(p.R778L);该家系5名成员和4名群体正常样本分属于3种不同熔解曲线。HRM分析结果与测序结果一致,即:患儿本人为R778L的纯合子,其父母、姐姐和母亲产前诊断的胎儿均为突变杂合子,4名群体正常对照为纯合野生型。结论在一个WD家系中检测到ATP7B基因热点突变c.2333GT(p.R778L),并针对该突变建立了一种基于PCR-HRM技术的快速突变鉴定方法,成功为家系提供产前基因诊断。 相似文献