遗传性凝血因子X缺陷症三例及其分子发病机制研究

目的 对3个遗传性FX缺陷症家系进行临床表型和基因型研究,并探讨其分子发病机制.方法 对3例先证者进行止凝血筛查,检测APTT和PT;利用凝固法和ELISA检测FX∶C和FX∶Ag.采用交叉纠正试验排除血浆中FX抑制物的存在,采用凝血酶生成试验检测3例先证者及健康对照者血浆中凝血酶的生成.采用蛋白印迹半定量方法检测血浆中FX抗原浓度和相对分子质量大小.对FX基因采用直接测序进行基因诊断.构建突变型表达质粒,瞬时转染293T细胞,分别测定转染细胞裂解液及培养上清液中FX∶Ag,测定上清液中FX∶C,实验重复3次.结果 先证者1的APTT和PT均明显延长,分别为113.4 s和62.3 s,交叉纠正试验被纠正,血浆中几乎没有凝血酶的生成.先证者2的APTT和PT分别为56.5 s和28.7 s,交叉纠正试验也被纠正,血浆中凝血酶生成为1 101.5 nmol·min.先证者3的APTT和PT分别为117.3 s和44.3 s,交叉纠正试验被纠正,凝血酶生成为782.5 nmol·min.先证者1的FX∶C和FX∶Ag分别为1.4%和3.6%,基因诊断结果显示,FX基因存在纯合突变Ser425→Pro,该突变体外表达显示能够在细胞中正常合成,但分泌障碍;先证者2的FX∶C和FX∶Ag分别为2.2%和5.5%,FX基因存在双杂合突变Ala-29→Pro和Phe324→Leu,Ala-29→Pro突变导致FX表达量在细胞裂解液和培养上清液中均明显减少,分别为野生型质粒的(41.32±5.21)%和(6.30±1.84)%,而Phe324→Leu突变在细胞中几乎不影响FX的合成;先证者3的FX∶C和FX∶Ag分别为2.2%和35%,FX基因存在双杂合突变Ala235→Thr和Arg347→Cys,这2种突变使FX在细胞裂解液中与野生型蛋白表达量相似,而细胞上清液中较野生型蛋白明显减低,分别为野生型的(23.03±1.92)%和(42.51±2.07)%.结论 本研究发现了5种新的FX基因突变;其中Ser425Pro、Phe324Leu、Ala235 Thr和Arg347Cys突变不影响FX突变蛋白的合成,而Ala-29Pro突变则导致FX突变蛋白合成减少,伴分泌障碍.     

一个Gilbert综合征家系的基因诊断和遗传分析

目的:对1例Gilbert综合征患者进行基因诊断,并对其家系成员进行相关基因UGT1A1检测及遗传学分析。方法:排除其他相关疾病,结合低热卡试验结果和病史特点确诊1例Gilbert综合征患者。抽取患者及其家系成员的外周静脉血,提取基因组DNA,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增相关基因UGT1A1,扩增产物直接测序,比对鉴定。结果:Gilbert综合征先证者的血清总胆红素升高,并以间接胆红素升高为主。低热卡试验中,先证者限制热量摄入后血清胆红素较限制热量前升高2倍,有诊断意义。基因检测发现,先证者及其胞姐同为UGT1A1基因启动子区域TA盒TA插入的A(TA)7TAA型,其父母UGT1A1基因的TA盒区域均为A(TA)6/(TA)7TAA杂合型。结论 :UGT1A1基因启动子中的TA插入影响了先证者的胆红素代谢水平,此基因异常是导致Gilbert综合征家系发病的原因,且该突变的遗传方式符合常染色体隐性遗传。     

遗传性低纤维蛋白原血症家系复合杂合基因缺陷的研究

目的 对1个遗传性低纤维蛋白原血症家系进行临床表型诊断和基因分析,并探讨该病的分子发病机制.方法 采集该家系3代共7人外周血,检测活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、蕲蛇酶时间(RT)、抗凝血酶活性(AT∶A)、蛋白C活性(PC∶A)和蛋白S活性(PS∶A),纤维蛋白原(Fg)抗原和活性分别用免疫比浊法和Clauss法测定;采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对先证者及其父母的血浆纤维蛋白原进行半定量检测及肽链相对分子质量分析;使用自动校正凝血酶生成仪测定先证者的凝血酶生成;应用血栓弹力图仪检测血液凝固的动态过程和纤维蛋白形成过程的动力学变化.抽提先证者及家系成员外周血基因组DNA,采用PCR扩增Fg的3个基因(FGA、FGB和FGG)所有外显子及其侧翼序列,DNA直接测序进行基因分析.结果 先证者凝血功能检查显示Fg抗原为0.68 g/L,活性为0.48 g/L; TT延长为29.2 s,RT延长为75.8 s.SDS-PAGE结果显示,3条肽链相对分子质量正常,但含量明显减低;先证者凝血酶生成峰值为249.93 nmol/L,凝血酶生成潜力为1007.0 nmol·L-1·min;全血凝固的动态过程异常,凝血综合指数(CI)为-8.6,显示全血低凝状态.表型诊断为遗传性低纤维蛋白原血症.基因分析发现先证者纤维蛋白原Aa链存在g.3175A＞C突变导致的Gln143Pro突变,以及g·4642delC 突变导致的438位苏氨酸后编码26个异常氨基酸提前出现终止密码子;前者来源于母亲,后者来源于父亲.结论纤维蛋白原Aa链Gln143Pro和g.4642delC复合杂合突变是导致该家系先证者低纤维蛋白原血症的原因.     

呼吸幅度对旋转容积调强剂量分布的影响研究

目的 研究呼吸幅度对旋转容积调强放疗(VMAT)剂量分布的影响。方法 采用呼吸运动模拟模体(QUASAR)模拟人体头脚方向的一维呼吸运动,二维电离室矩阵采集不同呼吸幅度等中心层面的剂量分布。通过Verisoft软件及绝对剂量分析,分析采集数据与计划数据比较的剂量分布、等中心绝对剂量百分误差和射野通过率。结果 呼吸运动对靶区等中心点剂量影响小于剂量允许误差5%(t=-22.614~-10.756,P<0.05),使靶区边缘剂量偏高、靶区内热点少、冷点多,且随着呼吸幅度的增大,对靶区整体剂量分布影响越大。6、8、10 mm整个射野γ通过率与静态相比差异有统计学意义(t=3.095、8.685、14.096,P<0.05)。8、10 mm靶区内射野通过率与静态相比差异有统计学意义(t=6.081、9.841,P<0.05)。结论 呼吸运动可导致VMAT剂量传输误差,且误差随靶区运动幅度的增加而升高,且呼吸运动方向靶区边缘的正常组织实际治疗受照剂量高于计划评价。     

抗血小板药的某些进展

抗血小板药(Antiplatelet drugs)或血小板功能抑制剂(Platelet function inhibitor)是一组通过各种不同机制以抑制血小板活化反应并能阻止血小板参与血栓形成的药物,临床上主要用于防治动脉和静脉血栓性疾病。近年来有关此类药物的研究有了很大的发展,本文就抗血小板药物的某些进展作一简要综述。某些进展环氧酶抑制剂在血小板受刺激时,可激活磷酯酶,该酶引起花生四烯酸(AA)的释放。血小板中的     

CT/MRI图像融合在肿瘤三维适形放射治疗中的应用

影像学与放射治疗学密不可分,在放射治疗的整个过程中,影像学承担着诊断、定位、疗效观察及随诊的全过程,为放射治疗提供肿瘤形态、解剖、功能等影像监控,以协助治疗计划的制定与修改.     

OCT评估磁性微珠注射诱导小鼠慢性高眼压模型的建立

目的 探索磁性微珠前房注射诱导高眼压模型的可行性及特点,OCT在模型评估中的作用.方法 将C57BL/6小鼠分为正常组、对照组与实验组.实验组前房内注射磁性微珠诱导高眼压,对照组前房内注射等量生理盐水,正常组不做任何处理.术前及术后第1天开始隔天检测眼压波动;建模3周后行荧光金逆行标记,建模4周后使用OCT检测两组小鼠...     

匍行性脉络膜炎不同亚型眼底病灶演变的临床观察

目的观察匍行性脉络膜炎(SC)不同亚型的脉络膜病灶临床演变过程及影像学特征, 探讨亚型分类的临床意义。方法回顾性、无对照、观察性研究。2009年5月至2021年9月于云南省眼科医院确诊的SC患者25例45只眼纳入研究。根据病灶初发部位和眼底彩色照相、荧光素眼底血管造影(FFA)、光相干断层扫描(OCT)等检查结果, 将SC分为视盘周围型(盘周型)、黄斑型、急性多灶型;根据首诊时病灶形态分为仅有浸润水肿表现的新发病灶、仅有萎缩表现的陈旧性病灶和水肿与萎缩表现并存的复发性病灶。观察不同亚型患眼病灶的影像特征、演变过程和并发症发生情况。结果 25例45只眼中, 男性15例, 女性10例;双眼、单眼发病分别为20、5例;年龄(42.3±5.7)岁。活动性病灶21只眼, 其中新发病灶、复发病灶分别为5、16只眼;陈旧性病灶24只眼。并发视盘水肿3只眼;轻度玻璃体炎5只眼;视网膜血管炎3只眼;脉络膜新生血管3只眼。盘周型16例30只眼(64%, 16/25), 包括单眼2例2只眼, 双眼14例28只眼。活动性病灶16只眼, 其中双眼患者仅单眼存在活动性病灶。脉络膜病灶紧邻视盘一侧或围绕视盘, 随病...     

益心舒片联合伊伐布雷定治疗慢性稳定型心绞痛的临床研究

目的观察益心舒片联合盐酸伊伐布雷定片治疗慢性稳定型心绞痛的临床疗效。方法选取2015年12月—2017年12月中国人民武装警察8650部队医院收治的100例慢性稳定型心绞痛患者作为研究对象,所有患者根据随机对照原则分为对照组(50例)和治疗组(50例)。对照组患者口服盐酸伊伐布雷定片,1片/次,2次/d;治疗组患者在对照组基础上口服益心舒片,3片/次,3次/d。两组患者均连续治疗12周。观察两组患者的临床疗效,比较两组治疗前后的心绞痛频率、持续时间、西雅图心绞痛量表(SAQ)评分、血清生化指标。结果治疗后,治疗组总有效率为94.00%,显著高于对照组的78.00%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者心绞痛发作次数和持续时间均较明显降低,而SAQ评分显著升高,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组心绞痛发作次数、持续时间和SAQ评分显著优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者内皮素-1(ET-1)、可溶性CD40配体(sCD40L)水平均明显降低,而降钙素基因相关肽(CGRP)水平显著升高,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组各指标显著优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论益心舒片联合盐酸伊伐布雷定片治疗慢性稳定型心绞痛具有较好的临床疗效,能够明显改善患者临床症状和血清生化指标,具有一定的临床推广应用价值。     

29例心搏骤停患者抢救成功体会

自1979年美国正式创立急诊医学专科以来,一直被视为新兴而潜力无限的急诊科,经过多年对各项急危重症诊治技术的科学化及规范化发展,行业认受性在医疗业界、以至社会上均渐见提高.澳门镜湖医院急诊科自2002年成立至今,无论在专科硬件配置还是在医务人员的专业能力培训方面均有了一定的成绩.本文主要就2009至2010年间,镜湖医院急诊科在实施住院总制度以及强化心肺复苏技术培训下,对心搏呼吸骤停病例的治疗效果作详细回顾及分析,以便进一步前瞻镜湖医院急诊科未来在拓展高级生命支持技术的方向.