白藜芦醇对U251人胶质瘤细胞抑制生长作用的研究

白藜芦醇（Res）是一种广泛存在于植物中的植物补体。而Res对胶质瘤的抑瘤作用报道甚少，近年来有关胶质瘤的大量的研究证实，表皮生长因子受体（EGFR）介导的信号转导通路在恶性胶质瘤发生、发展中发挥着关键的作用。本实验进一步就Res对U251脑胶质瘤细胞生长增殖的抑制、诱导细胞凋亡及其与胶质瘤增殖及其相关机制进行了探讨。     

脑膜瘤的伽玛刀放射外科治疗

目的：总结评价伽玛刀放射外科治疗颅内脑膜瘤的效果。方法：８０例患者年龄１６￣８１岁,平均５２．２０岁;男２５例,女５５例。病史０．５￣１６８个月,平均３４．８６个月,中位时间为１５个月。２４例为手术后复发或残留,肿瘤容积为０．８８￣３５．９０ｍｌ,平均１０．５７ｍｌ。局麻下立体定向强化ＭＲＩ定位。应用边缘剂量１０￣２０Ｇｙ,平均１４．２７Ｇｙ。中心剂量２２．５￣４０Ｇｙ,平均２９．４０Ｇｙ。等剂量     

颅内囊性肿瘤伽玛刀治疗的容积效应

评价颅内囊性肿瘤经立体定向抽液前后容积变化在伽玛刀治疗中的作用。方法：对３９例颅内囊性肿瘤ＭＲＩ定位后,确定穿刺道和靶点坐标,采用立体定向技术抽吸瘤内囊液使肿瘤社会公德只缩小,然后二次ＭＲＩ室位行伽玛刀治疗。边缘剂量为１０－２５Ｇｙ,平均１５．１７Ｇｙ。确定３％风险概率为警戒线,应用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ综合方程（Ｎｅｕｒｅｔ）分析剂量－容积关系和应用平均剂量１５Ｇｙ的社会公德只－风险概率的相关性。将抽     

腺病毒介导的靶向P85和Akt1短发夹RNA对人胃腺癌细胞生长抑制作用的研究

目的 构建靶向P85和蛋白激酶B1(PKB1/Akt1)的短发夹RNA(shRNA)腺病毒载体,研究其对人胃腺癌细胞SGC-7901生长的抑制效果.方法 构建腺病毒载体rAd5-P+A,体外转染SGC-7901细胞后,以实时定量PCR和Western blot分别检测P85和Akt1的mRNA和蛋白质的表达.以噻唑蓝比色分析法(MTT法)和流式细胞法评价转染后胃癌细胞的增殖活性.构建裸鼠皮下荷瘤模型进一步观察rAd5-P+A对SGC-7901细胞生长的抑制效果,并应用原位末端标记技术(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡情况.结果 成功构建的rAd5-P+A重组腺病毒载体转染SGC-7901细胞后可显著抑制p85和Akt1的mRNA表达,而P85和Aktl蛋白表达量在转染48 h、72 h后分别下调57.5%、63.7%和67.8%、75.6%,与空白对照组和通用腺病毒对照(rAd5-HK)组相比,差异具有统计学意义(P=0.005,P=0.003).与空白对照组和rAd5-HK组相比,SGC-7901细胞的增殖活性在rAd5-P+A转染后第2天明显下降(P<0.001),且rAd5-P+A转染组进入S期的细胞数减少了5.9%～7.1%,而进入G0/G1期的细胞增加了12.1%～13.7%.裸鼠皮下荷瘤模型治疗实验也显示,rAd5-P+A可抑制胃癌细胞的生长,诱导细胞的凋亡.结论 腺病毒介导的靶向P85和Akt1的shRNA可抑制人胃腺癌细胞的生长,这可能为胃腺癌靶向性联合基因治疗提供新的策略.     

LY294002抑制PI3K/AKT信号通路对胃腺癌SGC-7901细胞的影响

目的：观察应用PI3K抑制剂2- （4-吗啉基） -8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮 （LY294002） 对胃腺癌细胞株SGC-7901中磷脂酰肌酸3-激酶 （PI3K） /丝氨酸苏氨酸激酶 （AKT） 信号通路的变化以及由此产生的细胞生长、 侵袭及凋亡等方面的影响。方法： 应用LY294002作用于胃腺癌细胞株SGC-7901, 通过Western blot检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质P-AKT、 基质金属蛋白酶-2 （MMP-2）、 基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）、 B细胞淋巴瘤/白血病-2 （Bcl-2）、 细胞周期素 （CyclinD1） 的表达情况。噻唑蓝比色法 （MTT） 和流式细胞法及Transwell等实验评价胃腺癌细胞增殖、 侵袭、 凋亡等变化。结果： 与空白对照组和DMSO组相比,LY294002组能有效抑制P-AKT、 MMP-2、 MMP-9、 Bcl-2及CyclinD1蛋白的表达。LY294002组自第2天起生存率明显下降 （P<0.05）。Transwell穿过细胞数结果分别为空白对照组 （81.0±2.65）、 DMSO组 （81.3±1.52）、 LY294002组 （44.6±2.52）, 3组相比较差异具有统计学意义 （F=255.1, P=0.000）。LY294002组细胞周期被阻滞在G0/G1期, S期减（P<0.05）, 早期凋亡的细胞数明显增多（F=149.66, P=0.000）。结论： LY294002是一种对PI3K/AKT信号传导通路具有抑制作用的抑制剂, 靶向PI3K的LY294002可以有效抑制胃腺癌SGC-7901细胞的PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质的表达, 在体外显著抑制细胞的增殖、 侵袭, 并促进细胞的凋亡, 因此为临床肿瘤防治提供了新思路, 针对信号传导通路的靶向治疗有望成为肿瘤治疗的新途径。     

局部重复应用控释BCNU聚乳酸微球治疗U251胶质瘤的实验研究

 目的研究局部重复应用聚乳酸[poly(D,L-lactic acid),PLA]控释卡莫司汀[1,3-bis(2-chlorethyl)-1-nitrosourea,BCNU]微球(BCNU-PLA)对U251人脑胶质瘤的生长抑制作用。方法应用沉淀方法制备包载BCNU的PLA纳米微球。应用扫描电子显微镜观察载药微球形态,分别应用Bratton-Marshall比色法和紫外分光光度法测定微球载药率与药物释放曲线。应用MTT方法检测PBS、BCNU、PLA微球和BCNU-PLA等不同处理方法对U251胶质瘤细胞增殖活性的影响。应用U251裸鼠皮下移植瘤模型为研究对象,连续3次进行PBS、BCNU、PLA微球和BCNU-PLA的治疗,观察实验动物的生存期与皮下肿瘤生长情况。结果扫描电子显微镜观察载药纳米微球呈球形,具有良好的单分散性;BCNU-PLA平均粒径为23.5μm。BCNU-PLA平均载药率为11.5%;以相对分子质量30×10³的PLA制备BCNU-PLA微球的体外药物释放分析显示:BCNU在释放开始的10d表现出较大的突释,释放量达到载药量的40%;随后进入控释期,至4周左右释放了所载药物的50%。与BCNU原药治疗组比较,BCNU-PLA控释微球治疗在体外持续抑制U251胶质瘤细胞的生长;在体内明显抑制裸鼠皮下荷U251胶质瘤的生长,并显著改善荷瘤鼠的全身状况。结论BCNU-PLA载药微球可有效抑制皮下荷U251胶质瘤的生长,是局部化疗治疗胶质瘤的一种新策略。     

"十四五"胶质瘤基础与转化研究目标与共识

国家"十四五"发展规划和2035年远景目标纲要提出,把保障人民健康放在优先发展的战略位置,全面推进健康中国建设.目前,我国神经系统肿瘤的发病人数和死亡人数均居世界首位,严重威胁我国人民身体健康.在此大背景下,中国医师协会脑胶质瘤专业委员会基础研究与转化学组整理总结目前胶质瘤研究进展,着眼于全新诊断治疗的策略突破、发病和...     

伽玛刀联合立体定向手术治疗颅内囊性肿瘤

目的探讨立体定向穿刺抽吸手术与伽玛刀联合治疗颅内囊性肿瘤在立体定向放射外科治疗中的作用。方法分析颅内囊性肿瘤40例,单纯立体定向穿刺抽液19例,留置Ommaya囊抽液19例,内窥镜下手术切除肿瘤并排除囊液2例。肿瘤体积缩小后再行立体定向磁共振成像（MRI）定位、伽玛刀治疗,并计算抽液前后肿瘤体积的变化。依据Logistic综合方程计算抽液前后风险概率的变化,将抽液前后的肿瘤体积和风险概率进行配对t检验。结果抽液后瘤囊完全消失,病灶体积明显缩小。抽液前后肿瘤容积和风险概率均显著降低（容积变化：t＝8.108,P＜0．001;风险概率：t＝5．933,P＜0．001）。随访时间6个月～42个月,平均17.5个月。经伽玛刀治疗后,瘤结节消失10例,缩小12例,无变化17例,增大1例。结论颅内囊性肿瘤立体定向穿刺抽液后肿瘤体积缩小,使立体定向放射外科治疗并发症的风险概率显著降低,是联合伽玛刀治疗囊性肿瘤一种有效方法;针对肿瘤病理类型的不同采用伽玛刀放射外科联合单纯穿刺或置管抽取囊液、结合囊内治疗是囊性肿瘤治疗成功的关键。     

靶向性蛋白激酶B1和环氧合酶-2 shRNA腺病毒载体的构建和在人胃癌细胞的表达

Objective To construct a short hairpin RNA (shRNA) adenovirus vector targeting protein kinase BI (PKB1/Akt1) and cyclooxygenase-2 (COX-2) and observe their expression in human gastric carcinoma cell line SGC-7901. Methods Akt1 and COX-2 shRNA expression frames were sub-cloned to pGSadeno adenovirus vector by homologous recombination technology to construct pGSadeno-Aktl + COX-2 ( pGSadeno-A + C) vector. Furthermore after screening and amplification,recombinant ade-novirus vector was digested with Pacl and transfected into HEK293 cells. The replication adenovirus rAd5-A + C was packed and amplified in the HEK293 cells, and its titer was detected. After human SGC-7901 cells in vitro were transfected by rAd5-A + C,Akt1 and COX-2 mRNA and protein expression levels were detected by real-time PCR and Western blot respectively. Compared with rAdS-A + C,SGC-7901 and gen-eral rAd5-HK were selected as the negative controls. Results The recombinant adenovirus rAd5-A + C was constructed successfully and its titer reached 1.0 ×1010 pfu/ml. Aktl and COX-2 mRNA expression was downregulated significantly, and their ACt values ( 12.26±0.05 and 5.41±0.09 respectively ) were higher than rAd5-HK group (10.63±0.02 and 3.75 +0.08 respectively) and control group (10.57± 0.02 and 3.73±0.08 respectively) (P <0.01 ). There was no significant difference between rAd5-HK and control groups (P >0.05). Aktl and COX-2 protein expression was downregulated by 70.5% and 63.7% respectively ( P < 0.01 ) in rAd5-HK group as compared with control group ( P > 0.05 ). Conclu-sion The shRNA aclenovirus vector targeting Akt1 and COX-2 can specifically inhibit Akt1 and COX-2 expression,and this may be a new strategy in gastric carcinoma gene therapy targeting Akt1 and COX-2.