血清真胰岛素化学发光免疫分析方法学研究

建立一种高灵敏度真胰岛素临床常规检测方法.采用两株特异的抗胰岛素单抗体,分别抗胰岛素肽链上两个不同的抗原决定簇,用一株制备固相抗体,另一株标记碱性磷酸酶C,以金刚烷衍生物为发光底物建立化学发光免疫分析(CLIA)法.结果表明本方法灵敏度为0.06μIU/mL,标准曲线量程为1.0～150μIU/mL,批内和批间CV分别为5.0%、7.8%,平均回收率为94.4%.分别测定了男、女成人空腹血清各100份,男性实测范围0.52～11.23μIU/mL,平均值为3.86μIU/mL,女性实测范围为0.75～10.66μIU/mL,平均值为3.62μIU/mL.真胰岛素CLIA法简便快速,能真实反应血清胰岛素的水平,对临床糖尿病的诊疗和病理生理研究具有实用价值.     

梅毒螺旋体抗体化学发光试剂盒的研制及相关方法的比较

[目的]建证检测TP抗体化学发光免疫分析方法并与相关方法的比较。[方法]应用基因重组的TP抗原p15、p17和p47蛋白混合包被化学发光微孔板作为崮相抗原；用辣根过氧化物酶（HRP）标记以kp15、p17和p47抗原蛋白，应用含Luminol及其增强剂的化学发光底物作示踪剂，通过条件优化建立检测血清中TP抗体的双抗原夹心化学发光免疫分析法。应用该方法制备的TP抗体化学发光免疫分析试剂盒进行特异性、灵敏度、稳定性、精密性考察，并与TRUST、TPHA、TPPA和ELISA方法进行对比。[结果]建立了TP抗体化学发光免疫分析试剂盒（双抗原夹心法）。用本方法检测TP抗体国家参考品，完全符合国家参考品的质量标准；检测1380例TP抗体阴性血清（包括92例孕晚期孕妇血清，88例自身免疫性疾病血清，1200例正常人血清），阴性符合率100％；柃测300例TP抗体阳性血清，刚性符合率100％；其制备的试剂盒于37％放置6d表现稳定；批内变异系数为3．2％～3．8％；与相关方法比较，该方法的灵敏度较TRUST、TPHA和TPPA高，特异性较ELISA好。[结论]该法特异性强，灵敏度高，精密性及稳定性好，适用于献血员的筛查和临床TP感染的检测。     

高灵敏度人促甲状腺素（TSH）免疫放射分析法

用两种抗人促甲状腺紊（ＴＳＨ）分子不同抗原决定簇，彼此互不干扰的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）建立了ＴＳＨ一步双位夹心，固相免疫放射分析法（ＩＲＭＡ）简便快速、不需离心、灵敏度高、（０．０２Ｉμ／ｍｌ）特异性强。     

化学发光免疫分析血清C肽方法建立

双抗体夹心一步法建立人C肽(C-peptide) 化学发光免疫分析(CLIA)方法.方法可测范围0.15～15ng/mL,灵敏度0.02ng/mL,批内、批间变异系数(CV)分别为4.2%～6.5%和6.8%～9.3%,与胰岛素无交叉反应,与胰岛素原的交叉反应率为7.3%.本方法与国外同类试剂盒同时检测40份C-肽释放试验血清,相关系数为0.9709.本方法各项指标均满足临床检测要求,达到国外同类产品水平.     

C-肽化学发光免疫分析方法学研究

目的：建立人血清C-肽化学发光免疫分析法。方法：采用两株高特异的抗C-肽单克隆抗体，以一株包被微孔板制成固相抗体，另一株标记碱性磷酸酶，以金刚烷衍生物为底物，双抗体夹心法测定人血清C-肽浓度。结果：以5μg/ml单克隆抗体包被微孔板，酶结合物以1：5000稀释，在C-肽浓度0．1～15ng／ml范围内线性良好，线性方程为y=0．9575x-0．0869，相关系数0．99；灵敏度为0．01ng／ml，批内、批间变异系数分别为5．8％、8．4％；平均回收率98．4％，范围91．5％～105．0％。结论：文中建立的人血清C-肽化学发光免疫分析法，首次建立小分子人血清C-肽双抗体夹心化学发光免疫法测定。线性好，灵敏度较常规高出一个数量级，准确度和精密性高，能够满足一般临床诊断和科研的应用。