WHBE兔脾虚型肠易激综合征模型的建立

目的 用WHBE兔建立脾虚型IBS模型,为脾虚型肠易激综合征(IBS)的药物开发和基础研究提供工具.方法 取WHBE兔和日本大耳白兔各18只,分别随机分成两组,即正常对照组6只,模型组12只,采用湿热应激加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚证肠易激综合征(IBS)兔模型,其中模型组造模后处理6只,剩余兔自然恢复10 d,观察实验兔的临床症状、体重、腹围指数、粪便含水量、胸腺指数、脾脏指数、内脏敏感性以及小肠推进率等变化.结果 与正常对照组比较,模型组实验兔体重、胸腺指数、脾脏指数均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),腹围指数、粪便含水量、内脏敏感性以及小肠推进率明显升高(P＜0.05,P＜0.C11),且恢复较为缓慢.结论 脾虚型IBS兔模型符合IBS临床发病特点,而WHBE兔是较适合于脾虚证IBS模型研究的理想的实验动物.     

数据记忆动物疲劳测试仪的研制

动物疲劳试验近年来已被许多医药界的研究者们所关注。在许多情况下进行动物抗疲劳试验是必要的。如观察被射线辐射、化疗、用药后及运动后的动物与正常时的区别，并作为参考而制定下一步的防御措施，治疗、用药及训练计划等。此前，也有相关的检测仪器如动物跑步检测仪、在水中立一杆子来观察小鼠抗疲劳状态的简单跳台等，已见有较科学的能用数字自动显示速度、时间、次数等指标的动物跑步仪，而用作静态疲劳检测的站点式动物疲劳检测仪（也称动物跳台）至今还很不科学，坐等观察记录不但不准确，也会使研究者自身产生疲劳。     

米碎花药效微小核糖核酸的鉴定及其靶基因功能分析

目的筛选米碎花Eurya chinensis茎叶的微小核糖核酸(Micro RNAs,mi RNAs)类药效物质及其靶基因功能分析。方法采用高通量测序法,测定米碎花、正常小鼠和喂食米碎花匀浆液小鼠肝组织及血浆中mi RNAs的表达丰度,并与Gene Bank上的植物mi RNAs数据库比对,结合实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)验证,鉴定吸收进入体内的米碎花mi RNAs。以人类m RNA为靶标,采用Target Scan与Mi Randa预测米碎花mi RNAs的靶基因,并通过基因功能聚类(GO)与KEGG分析靶基因的相关功能。结果共鉴定出5个米碎花mi RNAs可吸收进入体内,其主要在生化过程、细胞成分和分子功能3大区域发挥作用,并影响肿瘤、代谢、炎症等相关信号通路。结论 mi RNAs可能是一类新型的中药药效物质。     

冠心宁片对麻醉犬血流动力学的影响

目的:观察冠心宁片对麻醉犬血流动力学的影响.方法:将本重(12±2)kg的健康Beagle犬,随机分为空白对照组、冠心宁片高、中、低剂量组、阳性对照(冠心宁注射液)组,采用开胸分离麻醉犬冠状动脉,用电磁流量计测量冠脉血流量,用多道生理记录仪测定左心室内压,观察麻醉犬血流动力学的变化.结果:冠心宁片降低心率、平均动脉压,但差异不显著(P＞0.05),明显增加冠脉流量、心肌血流量和左心室内压(P＜0.05),降低冠脉阻力和左室舒张末期压(P＜0.05).结论:冠心宁片可明显增加冠脉流量,降低冠脉阻力及左室舒张末期压,对心脏血流动力学有明显的改善作用.     

两种方法注射环磷酰胺致小鼠白细胞减少症模型的比较

目的 观察小剂量多次注射和单次大剂量注射环磷酰胺(CTX)致白细胞减少症模型小鼠血细胞的变化.方法 取体重为20～22 g的SPF级雄性ICR小鼠120只,随机分为多次小剂量组、单次大剂量组、正常对照组,每组40只.多次小剂量组小鼠腹腔注射CTX 100 mg/kg,每日一次,连续3 d;单次大剂量组小鼠单次腹腔注射CTX 300 mg/kg,正常对照组注射等量生理盐水,观察用药后第3、5、7、9天的血细胞变化.结果 多次小剂量和单次大剂量注射CTX后白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和红细胞、血红蛋白和血小板显著降低(P＜0.01),但单次大剂量组小鼠的血细胞数上升较快,注射后第7天开始上升,第9天已接近或超过正常组,而多次小剂量组仍显著低于正常组(P＜0.01).结论 单次大剂量注射CTX建立的白细胞减少症模型血细胞变化大、上升快,模型不稳,而多次小剂量注射CTX建立的白细胞减少症模型的血细胞则能相对稳定在低水平状态,模型较为可靠,适合于升高白细胞药物的筛选和评价.     

利用TALEN技术高效制备TXNIP基因敲除小鼠模型

目的 利用显微注射技术注射敲除Txnip基因的TALEN mRNA获得TXNIP敲除小鼠。方法 在线设计Txnip敲除位点, 构建TALEN载体并在细胞水平验证剪切活性, 体外转录TALENs成mRNA并通过显微注射技术注射到C57BL/6J小鼠受精卵, 对F0代小鼠进行DNA水平鉴定获得TXNIP敲除小鼠。结果 在Txnip第一外显子上设计了TALEN识别剪切位点, 并在细胞水平验证具有剪切活性, 注射mRNA到受精卵获得了4只敲除小鼠, 其中2只Txnip发生移码突变, 成功制备了TXNIP敲除小鼠。结论 通过注射TALENs mRNA可以高效制备TXNIP敲除小鼠。     

毛支饮体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

随着抗生素的广泛应用,细菌感染性疾病明显减少,但病毒感染性疾病日益增多.近年来,毛细支气管炎(以下简称毛支)的发病率呈逐年上升的趋势,毛支多发生在婴幼儿,主要由呼吸道合胞病毒(RSV)引起.RSV感染可引起患儿反复喘息,与哮喘的发病密切相关.Sigurs等[1]对RSV毛支住院患儿随访,发现7年后毛支组与对照组哮喘累积患病率分别为30％、3％,喘息累积发生率为68％、34％.     

WHBE兔与日本大耳白兔不同生长阶段肠道免疫功能的比较研究

目的 比较WHBE兔与日本大耳白(JW)兔不同生长阶段肠道免疫功能的差异.方法 分别选取离乳和2月龄WHBE兔,日本大耳白兔各8只,采用ELISA法,分别测定其血清及小肠匀浆液中分泌型IgA(SIgA)、P物质(SP)、IL-4、IFN-γ、生长抑素(SS)和血管活性肠肽(VIP)的含量水平.结果 成年WHBE兔血清及小肠组织sIgA分泌水平,SS、SP含量较离乳WHBE兔明显降低,IFN-γ/IL-4比值明显升高,特别是与成年JW兔在小肠组织IgA分泌水平,SS、IFN-γ和IL-4含量方面具有显著性差异.结论 WHBE兔的肠道免疫功能明显低于JW兔,可作为肠易激综合症研究的实验动物.     

磁珠富集法筛选实验豚鼠微卫星分子标记

目的直接从实验豚鼠基因组DNA中筛选获得微卫星分子标记。方法应用磁珠和生物素标记的微卫星探针与豚鼠基因组酶切片段杂交,捕获200～1000 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD-18V载体中,转化到感受态细胞E.coli DH5α中构建富集微卫星序列的小片段插入文库。然后用PCR法进行筛选。结果从约2000个转化子中获得240个阳性克隆。对其中98个进行了测序,并成功设计豚鼠微卫星引物17对。结论经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得豚鼠微卫星标记。本研究获得的微卫星位点将成为豚鼠遗传学研究的有力工具。     

四妙合萆薢渗湿汤对急性痛风性关节炎的IL-1β、PGE_2的影响的实验研究

[目的]对四妙合萆薢渗湿汤治疗实验性大鼠急性痛风性关节炎的作用进行实验研究。[方法]采用向大鼠踝关节腔注射尿酸钠溶液建立急性痛风性关节炎模型,将四妙合萆薢渗湿汤用于模型的治疗,并与秋水仙碱做组间对照,观察其对关节肿胀度、关节局部IL-1β、PGE2的含量的影响。[结果]1.大鼠踝关节肿胀度:造模后4h,高剂量中药组、中剂量中药组肿胀程度均降低(P0.05);造模后12h,高剂量中药组、中剂量中药组肿胀程度均显著降低(P0.01),低剂量中药组有差异(P0.05);造模后24h,高剂量中药组、中剂量中药组均有显著差异(P0.01);造模后48h,高剂量中药组有差异(P0.05),中剂量中药组有差异(P0.05);2.IL-1β:高剂量中药组关节局部IL-1β下降(P0.05);3.PGE2:高剂量中药组关节局部PGE2下降(P0.05)。[结论]四妙合萆薢渗湿汤能减轻尿酸钠结晶所致急性痛风性关节炎关节肿胀度,能降低关节局部IL-1β、PGE2水平。