眼底荧光素血管造影在小鼠氧诱导视网膜病变中的应用评价

目的：：在小鼠氧诱导视网膜病变模型( oxygen-induced retinopathy,OIR )中评价眼底荧光素血管造影( fundus fluorescein angiography,FFA)的应用价值。方法：将前期实验证实视网膜病变严重程度有明显差异的两组( B组>A组)各12只新生幼鼠于出生后第7 d置于75％浓度氧环境中,第12 d时返回正常空气环境中饲养。第17 d时将A组和B组的幼鼠均随机分配,分别进行FFA检查或高分子量FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片检查,即每种检查方法纳入两组幼鼠各6只,利用图像分析软件对视网膜无灌注区进行定量分析和比较。结果：FFA结合图像分析软件能对视网膜无灌注区进行定量分析,与FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片的测量结果有良好的可比性,两种方法得到的结果无统计学差异(P>0.05)。结论：FFA结合图像定量分析在小鼠OIR模型的血管病变评价中具有一定的实用价值。     

肿瘤坏死因子-α对RF/6A细胞自噬促进细胞增殖、迁移和管腔形成的影响

目的　本研究观察肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ-ａｌｐｈａ,ＴＮＦ-α）对体外培养的恒河猴脉络膜／视网膜内皮细胞（ＲＦ／６Ａ）表达自噬蛋白Ｂｅｃｌｉｎ-１及细胞增殖、迁移和管腔形成的影响,探讨ＴＮＦ-α参与新生血管生成的可能机制。方法　将生长良好的ＲＦ／６Ａ细胞随机分为空白对照组、ＴＮＦ-α组和ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组。培养２４ｈ、４８ｈ后采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测细胞Ｂｅｃ-ｌｉｎ-１蛋白的表达,ＭＴＴ法检测细胞增殖,细胞划痕法检测细胞迁移,Ｍａｔｒｉｇｅｌ法检测管腔形成。结果　培养２４ｈ和４８ｈ,各组Ｂｅｃｌｉｎ-１／β-ａｃｔｉｎ比值分别是ＴＮＦ-α组（２４ｈ）０．６７３±０．０１７、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（２４ｈ）０．４９１±０．０１７、ＴＮＦ-α组（４８ｈ）０．７９２±０．００６、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（４８ｈ）０．５０４±０．００７、空白对照组０．２６８±０．０１７。ＴＮＦ-α组ＲＦ／６Ａ细胞Ｂｅｃｌｉｎ-１的表达量均明显高于空白对照组（Ｐ＜０．０５）,ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组Ｂｅｃｌｉｎ-１的表达量较ＴＮＦ-α组明显减少（Ｐ＜０．０５）。各组细胞的相对增殖率分别是ＴＮＦ-α组（２４ｈ）１．４１０±０．０１０、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（２４ｈ）１．２９０±０．００４、ＴＮＦ-α组（４８ｈ）１．３２０±０．０１１、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（４８ｈ）０．１８０±０．０１５、对照组（２４ｈ）１．０００±０．０２０、对照组（４８ｈ）１．０００±０．０１１;ＴＮＦ-α组细胞的相对增殖率均较空白对照组升高（Ｐ＜０．０５）,３-ＭＡ预处理后,ＴＮＦ-α促进ＲＦ／６Ａ细胞增殖的能力在两个时间点均受到抑制（均为Ｐ＜０．０５）。各组细胞的相对迁移距离分别是ＴＮＦ-α组（２４ｈ）（３４５±２８）μｍ、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（２４ｈ）（２５９±７７）μｍ、ＴＮＦ-α组（４８ｈ）（７６２±５５）μｍ、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（４８ｈ）（６５９±４８）μｍ、空白对照组（２４ｈ）（１９５±６３）μｍ、空白对照组（４８ｈ）（４１２±９４）μｍ;ＴＮＦ-α处理组ＲＦ／６Ａ细胞２４ｈ的迁移明显强于对照组（Ｐ＜０．０５）,加入３-ＭＡ预处理后,这种增强作用有所下降,但仍然明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）;培养４８ｈ,更多细胞迁移入划痕区域,较２４ｈ明显增加;不同组之间的差异与２４ｈ时的结果类似,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;培养２４ｈ各组细胞管腔形成个数:ＴＮＦ-α组（１１．８０±０．８１）个、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（７．５０±０．７２）个、空白对照组（４．３０±１．１２）个,ＴＮＦ-α组及ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组管腔形成个数均高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）,ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组较ＴＮＦ-α组明显减少（Ｐ＜０．０５）。结论　ＴＮＦ-α能够促进ＲＦ／６Ａ细胞的增殖、迁移和管腔样结构的形成,且ＴＮＦ-α促进内皮细胞自噬在血管新生中发挥重要的调控作用。     

原发性醛固酮增多症致肾脏损害相关危险因素分析

目的 通过分析原发性醛固酮增多症(primary aldosteronism,PA)患者蛋白尿相关影响因素,探讨PA引起肾脏损害的致病因子及可能机制。方法 入选2013年1月至2019年12月瑞金医院北部院区高血压专科住院、并经初筛为PA疑似患者。通过盐水负荷试验将初筛患者分为PA组(盐后醛固酮>100 pg/ml)及原发性高血压(essential hypertension,EHT)组(盐后醛固酮<60 pg/ml)。采集一般资料、血生化、相关激素及24 h尿蛋白等。以24 h尿蛋白定量>150 mg定义为蛋白尿。结果 共入选374例患者,其中PA组142例,占比37.98%。PA组尿蛋白定量及蛋白尿检出率均高于EHT组(P<0.05)。采用logistic回归分析并校正相关危险因素,与EHT组相比,PA组蛋白尿风险增加2.23倍(P=0.016)。进一步在PA患者中行多元线性回归分析尿蛋白影响因素,盐后醛固酮(自主分泌醛固酮)每增加1 pg/dl,尿蛋白增加1.32 mg/24 h。自主分泌的醛固酮、血糖、病程及男性是尿蛋白的危险因素。结论 PA患者较EHT...     

帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠肾保护作用机制研究

【摘要】〓目的〓探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DN）大鼠的肾保护作用机制。方法〓采用链尿佐菌素(STZ)腹腔注射的方法构建DN大鼠动物模型,将造模成功的大鼠随机分为帕立骨化醇组（P组）、DN组（D组）,并设置健康对照组（N组）。P组大鼠每周灌胃帕立骨化醇3次,每次04μg/kg;D组与N组给予等量丙二醇灌胃。给药12周后检测各组24 h尿蛋白定量及血生化指标,通过ELISA法检测肾组织中肾素浓度变化,尿中前列腺素E2（PGE2）水平,免疫组化法检测肾组织中环氧化酶 2（COX 2）和nephrin蛋白的表达。结果〓与N组相比,D组和P组24 h尿蛋白定量、血清肌酐、肾素、尿PGE2水平及COX 2表达较高,P组又显著低于D组,差异均有统计学意义（P<005）。与N组相比,D组和P组nephrin蛋白表达较低,P组又显著高于D组,差异均有统计学意义（P<005）。结论〓帕立骨化醇可显著减少DN大鼠早期蛋白尿,此作用可能通过抑制COX 2、PGE2,减少肾素分泌,上调足细胞nephrin蛋白的表达实现。     

制动试验对不宁腿综合征的诊断意义

背景 不宁腿综合征(RLS)是一种运动-感觉障碍性疾病,近年来,临床医务工作者对于RLS的发病机制、治疗等方面的研究均取得了一定进展。流行病学研究证实,RLS与神经-精神疾病、肾脏疾病、心脑血管疾病、营养代谢性疾病及妊娠等存在明显的相关性。由于RLS的诊断主要依靠相对缺乏特异性的临床症状,无明确的基因、生物学标志物及多导睡眠监测(PSG)诊断标准,因此对该病的诊断率较低。国外的几个睡眠中心使用制动试验(SIT)用于RLS的临床和研究测试。目的 评估SIT诊断RLS的临床指导意义。方法 选取2016年1月至2021年6月就诊于北京大学国际医院睡眠中心,以日间静息和/或睡前双下肢不适为主诉的RLS患者共220例,健康志愿者150例。健康志愿者及RLS患者治疗前均行SIT并评估SIT期间双下肢不适程度,通过PSG记录健康志愿者和RLS患者SIT期间实际肢体运动指数(LMI)、清醒时周期性肢体运动指数(PLMWI)及睡眠中周期性肢体运动指数(PLMSI),SIT阳性标准需同时满足SIT期间PLMWI≥40次/h、SIT结束后双下肢不适症状自评得分较前1次或前几次中某1次的评分超过3分。结果 纳...     

微创全结肠系膜切除治疗结肠癌的临床疗效分析

目的探讨腹腔镜下微创全结肠系膜切除(CME)对结肠癌患者疗效、生存率及并发症的影响。方法回顾性分析2011年12月至2014年12月于我院治疗的113例结肠癌患者的临床资料,将采取腹腔镜下微创CME治疗的55例患者设为观察组,采取传统开腹手术治疗的58例患者设为对照组。比较2组患者手术及住院相关指标、并发症发生情况,记录2组患者远处转移率以及1年、3年生存率。结果观察组患者术中出血量、住院时间、术后引流量显著低于对照组,2组比较差异具有统计学意义(P 0. 05),2组患者手术时间、首次排气时间、淋巴结清扫数量、尿管拔除时间差异无统计学意义(P 0. 05);观察组患者切口感染发生率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P 0. 05); 2组患者吻合口渗血、切口裂开发生率差异无统计学意义(P 0. 05);患者随访36～72个月,平均(50. 34±4. 34)个月,2组患者远处转移率、局部复发率、无瘤生存率以及1年、3年生存率差异均无统计学意义(P 0. 05)。结论腹腔镜下微创CME治疗结肠癌能获得与传统开腹手术相同的淋巴结清扫效果,远处转移及生存率无明显差异,但具有创伤小、恢复时间快等优势,而且能显著降低院内感染率。     

内皮祖细胞与眼内新生血管

内皮祖细胞参与新生血管形成的生物学意义得到广泛的关注。由于内皮祖细胞具有增生、移行和分化为内皮细胞的潜能,其数量减少和修复功能缺失可导致血管整合和稳定失衡。内皮祖细胞可能还起着开启“血管生成开关”的作用。临床上,靶向针对此类细胞,有望成为治疗年龄相关性黄斑变性、糖尿病视网膜病变等新生血管性眼病的新策略。     

利妥昔单抗治疗天疱疮的长期疗效及安全性分析

【摘要】 目的 探讨利妥昔单抗（RTX）治疗天疱疮患者的长期疗效和安全性及对免疫指标的影响。方法 回顾性纳入2008年2月至2017年7月于北京大学第一医院皮肤科使用RTX（375 mg/m2体表面积,每周1次,连续使用4周）治疗的天疱疮患者。收集基线及不同随访时间点患者的自身抗体、B细胞水平,分析其变化趋势及与疗效的关系。采用Kaplan-Meier方法分析疾病控制、完全缓解和复发情况,对重复测量的免疫指标（自身抗体、B细胞）计算中位数M和P25、P75,绘制随访时间-免疫指标中位水平曲线。结果 共纳入53例汉族天疱疮患者,包括40例寻常型天疱疮和13例落叶型天疱疮,男女比例为0.96∶1,中位年龄37.4岁,基线时中位病程为13.4个月,中位随访时间（P25,P75）为37.5（25.0,54.7）个月。疾病控制48例（90.6%）,疾病控制时间为1.7（1.1,3.2）个月。完全缓解38例（71.7%）,完全缓解时间13.1（9.6,27.5）个月。随访期间完全缓解的38例中复发12例（31.6%）,复发时间为12.4（4.8,19.8）个月。随访时间-免疫指标中位水平曲线显示,皮疹缓解时抗Dsg1和Dsg3自身抗体水平下降;皮疹复发时,自身抗体水平上升。最常见的重度不良反应为肺部感染,死亡率为3.8%（2/53）。结论 使用RTX治疗天疱疮患者的长期疗效显著,最需关注的不良反应为肺部感染,自身抗体水平可作为RTX治疗天疱疮的疗效观察指标。     

OSAHS伴血压异常患者经鼻Auto-CPAP治疗对血压改变情况的研究

目的:研究OSAHS伴高血压患者,经鼻auto-CPAP治疗对其血压改变的情况。资料与方法:30例OSAHS伴高血压患者,其中包括已确诊高血压患者9例(维持既往口服降压药物治疗方案不变)及本次研究新发现高血压患者21例(既往无口服常规降压药物,暂不给予口服药物治疗)。给予患者每晚有效auto-CPAP(RESmart GII,北京怡和嘉业医疗科技有限公司)连续治疗,分别于治疗前及治疗第1、2、4周复查24 h ABP,比较治疗前后患者血压改变情况。结果:1)30例患者auto-CPAP治疗1周后,24 h ABP各时段血压均较治疗前明显降低,24 h SBP/DBP降低5.73/3.43 mm Hg,d SBP/DBP降低5.40/3.53 mmHg,n SBP/DBP降低7.03/2.73 mm Hg。2)9例既往高血压患者与21例本次研究新发现高血压患者相比,1周治疗后仅n SBP及n DBP的变化有统计学意义。3)部分患者延长治疗至2、4周,仅治疗1周与2周d SBP的变化有统计学意义。结论:1)auto-CPAP治疗OSAHS有助于患者血压的控制与改善。2)OSAHS伴高血压患者经atuo-CPAP治疗(1、2、4周)后,血压的降低主要出现在第1周的治疗上,临床上建议以第1周auto-CPAP治疗结束后的24 h ABP数据作为参考,这对于OSAHS伴有高血压患者的药物干预或调整具有一定的临床意义。3)在auto-CPAP对OSAHS伴高血压患者的治疗中,既往口服降压药物比无口服降压药物患者的夜间血压下降幅度更大。     

抗Procollagena1（Ⅲ）单克隆抗体的制备和实验研究

肝纤维化和肝硬化是肝脏损伤后的修复反应,其病理特征主要表现为细胞外基质的过度沉积,Ⅲ型前胶原蛋白[procollagen a1（Ⅲ）,cola1（Ⅲ）]是细胞外基质的主要成分。通过检测血液或肝组织的表达量的变化可以观察肝纤维化及肝硬化的进展情况,指导临床诊疗和基础研究工作。因此,制备cola1（Ⅲ）单克隆抗体（mAb）对于肝纤维化和肝硬化的特异性检测具有重要意义。我们于2012年9月至2013年9月应用小鼠淋巴细胞杂交瘤技术．制备2株抗colal（Ⅲ）分子不同表位的单克隆抗体（mAb）,报告如下。