DEN2感染对MyD88沉默的小鼠树突状细胞相关膜分子表达及炎症因子分泌的影响

目的:探讨髓样分化因子88(MyD88)在DEN2感染BMDC后对其成熟及相关炎症因子分泌的影响.方法:利用rmIL-4、rmGM-CSF联合诱导培养BMDC;针对BMDC MyD88基因,设计并合成3对MyD88 siRNA,脂质体法转染BMDC;通过Western blot筛选一对高沉默效率的MyD88 siRNA;常规方法增殖及鉴定DEN2;直接免疫荧光及RT-PCR鉴定DEN2吸附BMDC;流式细胞术分析对照组、感染组、RNAi组、感染RNAi组、无义RNAi组BMDC膜表面分子CD86、MHCⅡ的表达,双抗体夹心ELISA法检测上清液中IP-10、TNF-α及IFN-α的分泌水平.结果:经细胞因子诱导培养后可获得CD11c表达为70.85％ ±2.66％的相对未成熟的BMDC;与空白对照组相比,序列1～3组的MyD88蛋白质表达率分别降低28.36％±14.26％、54.20％ ±22.93％、73.14％±11.80％,其中序列3的沉默效率最高,具有显著统计学意义(P ＜0.01);DEN2可吸附BMDC.与对照组比较,DEN2感染组DC膜表面分子CD86表达降低,MHCⅡ增高,感染RNAi组的MHCⅡ、CD86表达无明显变化;与对照组比较,DEN2感染组分泌TNF-α、IFN-α及IP-10的水平均增高,而感染RNAi组分泌的IP-10、IFN-α、TNF-α则无明显变化.结论:DEN2可吸附BMDC,并促使其成熟及细胞因子分泌;siRNA可沉默MyD88,有效阻断DEN2感染BMDC的胞内信号传导及其所引起的成熟及炎症因子分泌.     

吉西他滨联合顺铂及地塞米松治疗复发或难治性非霍奇金淋巴瘤临床观察

非霍奇金淋巴瘤（NHL）是一种常见的恶性肿瘤,在我国,NHL占85％ ～90％,远高于欧美国家.近三十年来NHL的发病率增长了一倍,达到20万人[1].目前常规采用CHOP为主的一线方案化疗,其远期生存率达35％～40％[2],但仍有相当数量的患者最终复发或初始治疗即无效,成为复发或难治性NHL.复发是指化疗2周期以上达到完全缓解（CR）,并且持续应用至6～8周期后停药,停药至少1个月后复发.难治是指：（1）在治疗的任何时间都未达到CR;（2）在治疗过程中或达到部分缓解（PR）后疾病进展;（3）在达到CR的第1个月内早期复发.目前复发性及难治性NHL的治疗仍是临床上的一个难题,尚无标准方案.作者对21例复发或难治性NHL采用吉西他滨联合顺铂及地塞米松（GDP）方案化疗,收到了较好的近期效果,现报道如下.     

碱性磷酸酶改良钙-钴染色法的进一步改进

中性成熟粒细胞胞浆中碱性磷酸酶在ｐＨ 9.4的碱性环境下 ,将β -甘油磷酸水解为磷酸钠和甘油 ,磷酸钠与钙离子作用生成磷酸钙 ,再与钴离子作用生成磷酸钴 ,后者与硫化铵作用生成不溶性硫化钴沉淀[1] 。基于此原理 ,我们实验室多年来对碱性磷酸酶改良钙 -钴染色法进行了研究并做了一些改进。现报告如下。1　碱性磷酸酶改良钙 -钴染色法1.1　试剂1.1.1. 　固定液　 10 %甲醛甲醇固定液。甲醛 10ｍｌ,甲醇90ｍｌ,混合后置冰箱备用。每周新鲜配制。1.1.2.　基质液　 30 ｇ/Ｌβ -甘油磷酸钠 5ｍｌ,2 0ｇ/Ｌ巴比妥钠5ｍｌ,2 0 ｇ/Ｌ硫酸镁 1ｍｌ…     

卵黄抗幽门螺杆菌抗体的制备及特性研究

幽门螺杆菌 (H .pylori,Hp)与慢性胃炎、消化性溃疡和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤有密切关系。采用抗生素三联或四联疗法治疗Hp感染 ,但Hp易耐药。用特异性抗体防治传染病是经典的方法 ,抗HpIgG是防治Hp感染的途径 ,因此 ,我们采用鸡卵黄免疫球蛋白G抗体 (又称IgY)防治Hp。IgY是母鸡血中的IgG选择性地转移到卵黄中 ,是卵黄中惟一的免疫球蛋白类 ,具有与血清IgG一样的抗体活性。这提示 ,可以从免疫母鸡的蛋中获得大量特异性抗体。用 2 5株Hp菌株的培养液作为免疫材料 ,其中NCTC116 37、NCTC116 39、SS1三株由中国预防科学院流行病…     

贵州自然界白纹伊蚊体内登革病毒带毒情况

目的：利用细胞、分子生物学技术对贵州省自然界白纹伊蚊体内登革病毒(DEN)带毒情况进行调查。方法：采集贵州省9个地(州)市共计18个县(区)白纹伊蚊幼虫标本，饲养成蚊；制备蚊悬液，碘化钠法提取RNA，用DENNSl基因区通用引物经逆转录-聚合酶链反应(TR-PCR)检测DEN核酸，限制性内切酶酶切鉴定阳性PCR产物并分型；蚊悬液接种C6／36细胞进行病毒分离，制作细胞片，间接免疫荧光法检测DEN抗原。结果：从独山县麻尾镇白纹伊蚊标本中分离到1株DEN-2型病毒，从凯里、黄果树和镇远3处地方株白纹伊蚊体内检测出DEN核酸，用抗DEN1～4型单克隆抗体经间接免疫荧光(IFA)和RT-PCR产物酶切分型鉴定，分别为登革病毒2型、4型。结论：贵州省存在DEN感染的自然循环。     

贵州自然界白纹伊蚊体内登革病毒带毒情况

目的 利用细胞、分子生物学技术对贵州省自然界白纹伊蚊体内DEN带毒情况进行调查。方法 采集贵州省9个地(州)市共计18个县(区)白纹伊蚊幼虫标本，饲养为成蚊；制备蚊悬液，碘化钠法提取RNA，用登革病毒(DEN)NS1基因区通用引物经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DEN核酸，限制性内切酶酶切鉴定阳性PCR产物并分型；蚊悬液接种C6/36细胞进行病毒分离，制作细胞片，间接免疫荧光法检测DEN抗原。结果 从独山县麻尾镇白纹伊蚊标本中分离到1株DEN-2型病毒，从凯里、黄果树和镇远3处地方株白纹伊蚊体内检测出DEN核酸，用抗DEN1～4型单克隆抗体经间接免疫荧光(IFA)和RT-PCR产物酶切分型鉴定分别为登革病毒2型、4型。结论 贵州省存在DEN感染的自然循环。     

贵阳地区无偿献血人群HCV筛查的结果分析

目的 比较献血人群抗-HCV反应性、HCV核酸检测结果及HCV重组免疫印迹试验(RIBA)确证实验结果.方法 对2013年10月至2015年3月采集的无偿献血者血液标本,采用2个不同厂家的国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测和1个进口核酸检测试剂及配套检测系统对HCV进行筛查,对抗-HCV呈反应性或/和NAT检测阳性标本进行RIBA,将2种ELISA试剂检测反应性的结果与核酸检测结果、RIBA确证实验结果进行分析与比较.结果 共检测133 959例无偿献血者标本,其中覆盖核酸检测结果的标本113 380例,抗-HCV检测呈反应性标本比例0.19％(252/133 959),NAT检测阳性共27例,阳性检出的比例0.02％(27/113 380);HCV反应性标本经RIBA确证实验确证阳性的比例19.8％(50/252)、阴性的比例54.8％(138/252)、不确定的比例25.4％(64/252);27例核酸检测阳性的标本均为ELISA检测双试剂反应性和确证实验阳性;2家ELISA试剂检测结果、RIBA确证实验结果和核酸检测结果差异有统计学意义(P＜0.05).结论 选用2次ELISA+1次核酸检测的检测策略更为安全;针对较高比例的假阳性标本,应建立献血者跟踪随访制度,最大限度地保留献血人群.     

妊娠期糖尿病孕妇的护理干预措施

目的:探讨妊娠期糖尿病孕妇的护理干预措施.方法:将我院诊断为妊娠期糖尿病的孕妇分为研究组和对照组.对照组接受常规护理,研究组接受综合护理.对比(1)两组护理前后空腹血糖、糖化血红蛋白.(2)两组分娩不良反应发生情况.结果:研究组和对照组护理前空腹血糖、糖化血红蛋白分别为(7.22±0.65mmol/L、5.26±0.36%),差异无统计学意义(P>0.05),研究组和对照组护理后空腹血糖、糖化血红蛋白分别为(5.21±0.27mmol/L、5.98±0.45%),差异有统计学意义(P<0.05).两组分娩不良反应发生情况差异有统计学意义(P<0.05).结论:通过综合护理,可以改善妊娠期糖尿病孕妇血糖水平,改善妊娠结局.     

高职药学专业化学学业评价指标专家调查报告

通过查阅资料，初步确定评价指标，并就这些指标进行专家问卷调查。以调查结果为依据，确定化学学业评价指标并计算指标权重值。