KLH在肿瘤免疫治疗中的应用

血蓝蛋白(Hemocyanin)是在软体动物和贝类动物体内广泛存在的一种呼吸色素蛋白质,这些和血红蛋白有着相同作用的物质有很强的抗原性,而从南加利福尼亚海域的腹足软体壳类动物Megathura crenulata的血淋巴中提取的钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)[1]不仅有强的抗     

女性膀胱癌腹腔镜根治性切除原位回肠新膀胱术术式改进

目的 探讨并改进腹腔镜女性膀胱癌根治性切除-原位回肠新膀胱术的手术方法,随访观察其治疗效果.方法 2003年2月至2008年9月,为19例女性膀胱癌患者施行了腹腔镜膀胱全切除-原位回肠新膀胱术,其中13例同时行子宫、卵巢及附件切除,6例行保留子宫、卵巢附件.主要手术步骤为:①行标准盆腔淋巴结清扫,②行膀胱全切除同时切除或不切除内生殖器,③在下腹正中线上作4～5 cm切口,取出标本,并构建"M"形去管回肠储尿囊,④输尿管末端形成半乳头,"插入式"种植于储尿囊;⑤储尿囊回纳腹腔,在腹腔镜下作储尿囊与尿道吻合.术后记录围手术期情况,并对患者进行定期随访,了解患者的生活质量、排尿情况,并检测患者的残余尿量、新膀胱压力等.结果 手术时间(340.5±43.1)min,术中出血(353.9±71.3)ml.术后随访2～69个月,半年内均能自主排尿,1例日间偶有尿失禁,2例夜间尿失禁,3例排尿困难.膀胱容量(333.6±45.4)ml,残余尿量0～210(41.2±18.1)ml.术后半年至1年,行静脉尿路造影,除1例单侧肾积液外,其余双肾显影良好,未见肾盂输尿管扩张.膀胱尿道造影,可见膀胱位于盆腔,其形状大小位置于正常膀胱相似,未见膀胱输尿管反流.术后输尿管新膀胱吻合口梗阻1例,新膀胱阴道瘘1例,肿瘤远处转移2例于随访期间死亡.结论 腹腔镜女性膀胱全切除-原位回肠新膀胱术,技术上可行,可根据患者情况采用保留或切除内生殖器的手术方法,术中出血较少,创伤较小,术后大部分患者能自主排尿,但尿失禁及排尿困难发生率略高于男性,术后中远期新膀胱功能及肿瘤根治效果还需进一步临床观察.     

p65基因序列shRNA慢病毒载体构建及其作用功能的初步研究

Objective To obtain shRNA sequences that can stably block the expression of Nuclear Factor kappa- B (p65) in the prostate cancer cell line LNCaP and construct the lentivirus vector.And validate the gene function of p65 in the cell line. Methods According to p65 genetic information, we design siRNA1, siRNA2, siRNA3 those three siRNA sequences targeting the ods area of p65 gene and then form the corresponding four pairs of complementary single strand DNA of shRNA, including the sense strand and the antisense strand. The synthetic shRNA sequence was inserted into the empty pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector, and after transfecting the prostate cancer cells , the inhibitory effect of p65 mRNA by different sequences was detected through real-time PCR, and the inhibitory effect of p65 protein expression was detected by Western-blotting. Thus we can obtain highly effective shRNA sequences in the inhibition of p65 in prostate cancer cells. MTT, flow cytometry, transwell were chosen to test the cell growth, migration and invasive power in vitro to compare the difference of the experimental group, control group and negative group. Results The third shRNA sequence had the best inhibitory effect and the inhibitory effect of p65 mRNA in prostate cancer cell line was 59 % and the protein was 81%. It's position locates in p65 (NM_021975 ) 1096-1113 and it's stemloop sequence is 5'-GATCCGCCCTATCCCTTTACGTCATTCAAGAGATGACGTAAAGGGATAGGGCTTTTTG-3'. After transfecting, the prostate cancer cell line had the low expression of p65 stably. Through MTT, we got the growth curve, which showed that the growth ability of experimental group was significantly decreased compared with the control group and the Logarithmic growth didn't appear in the first 96 hours. Flow cytometry test displayed that the percentage of G0-G1-phase cells in experimental group was 61.49%, and the control group was 44.89%, idle group was 41.52%, which was increasing oberviously. The S-phase cells in the experimental group was 28.58%, compared with the 47.36% and 46. 10% diminished. The results of transwell showed that the experimental group had 16. 5000±6. 62076 cells and the other two groups had 45. 6333 13. 54159 and 36. 8333±5. 68412 cells, which showed the invasive power of experimental group was significantly declined(P＜0.05).Conclusions It's successful to obtain shRNA sequences that can stably block the expression of p65 in the prostate cancer cell line LNCaP and construct the lentivirus vector. p65 can positively regulates the biological behavior of prostate cancer LNCaP cell line in the cell growth, migration and invasive power.     

输尿管镜碎石术后早期输尿管梗阻原因分析

目的探讨输尿管镜碎石术后早期输尿管梗阻的原因及处理方法。方法对近2年来3例输尿管镜术后患者的临床资料进行回顾性分析。结果3例输尿管镜碎石术后输尿管梗阻的患者通过调整双J管位置以及有效抗炎止血治疗均成功处理梗阻。结论输尿管镜碎石术后早期输尿管梗阻原因多是出血,输尿管水肿以及双J管位置不良所致。通过正确的处理是可预防和避免的。     

浅表型膀胱癌的生物治疗

浅表性膀胱癌的治疗是膀胱癌治疗中的最重要的环节，治疗的方法包括手术、化疗和生物治疗，其中生物治疗是最有希望、最有潜力的方法，受到广泛关注。本文对其现状和进展进行综述。     

局部麻醉下经尿道输尿管镜激光碎石术治疗女性输尿管下段结石

目的 评价局部麻醉下行经尿道输尿管镜激光碎石术(trans-urethral ureteroscopic laser lithotripsy,URSL)治疗女性输尿管下段结石的可行性和安全性。方法 选取2021年3-10月青岛大学附属医院收治的8例输尿管下段结石女性患者行门诊手术。所有患者均在门诊手术室局部麻醉下顺利完成URSL,未转全身麻醉。术后均未留置导尿管,输尿管支架在手术后3 d取出。观察手术时间、术中疼痛评分、一次性结石清除率、并发症及患者满意度。结果 8例患者手术时间18～40 min,平均手术时间(28.125±8.025) min;疼痛评分1～6分,平均评分(3.50±1.51)分;术后结石清除率100%,术后随访1个月未见明显并发症,且患者对手术方式表示满意。结论 局部麻醉下URSL对于女性输尿管下段结石的患者相对安全可行。     

膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术的腹腔镜与开放手术疗效比较

目的 比较腹腔镜与开放性膀胱根治性切除.原位回肠新膀胱术的临床疗效.方法 对我院施行的膀胱根治性切除-原位同肠新膀胱术171例进行随访,其中开放手术组63例,腹腔镜手术组108例,对两种术式的嗣手术期情况、术后并发症、新膀胱功能、肿瘤治疗效果等进行比较分析.结果 与开放手术组相比,腹腔镜组平均手术时间稍长(330 min比310 min,P>0.05),平均出血量明显较少(320 mi比1100 ml,P<0.001),术后肠道功能恢复时间较短(2.4 d比4.5 d,P<0.001),术后并发症发牛率较低(18.5%比30.0%,P<0.05).术后12个月日间/夜问尿控率相当(90.7%/82.6%比88.3%/81.6%,P>0.05).术后2年两组同一分期、分级无瘤生存率相当(P>0.05).结论 腹腔镜下膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术比开放性手术出血少,肠道功能恢复快,并发症少,术后控尿效果及初期肿瘤根治效果相当,长期肿瘤根治效果需要进一步随诊观察.     

膀胱移行细胞癌组织中Survivin、Bcl-2、p53的表达及临床意义

目的探讨膀胱移行细胞癌（BTCC）组织中Survivin、Bel-2、p53的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学链酶卵白素-过氧化物酶复合物（sP）方法，检测78例BTCC组织中Survivin、Bel-2、p53的表达，并与15例正常膀胱黏膜组织进行对照研究。结果78例BTCC组织中，Survivin的阳性率为65．4%，Bel-2阳性率为55．1%，p53阳性率为48．7％，而正常膀胱黏膜组织中未见Survivin、p53阳性表达。Survivin、Bcl_2表达与BTCC的病理分级和临床分期显著相关（P〈0．05）。根据Spearman相关分析表明Survivin与Bcl-2、p53表达呈正相关（P〈0．05）。结论Survivin和Bcl-2的高表达提示膀胱癌预后不良，Sttrvivin在BTCC组织中的表达与Bcl-2、p53的异常表达密切相关。     

腹腔镜下膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术108例分析

目的 报道108例腹腔镜下膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术手术资料及术后并发症、性功能、控尿功能和肿瘤根治情况.方法 2002年12月至2007年5月,108例膀胱癌患者施行了腹腔镜下膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术,其中男96例,女12例.采用5孔经腹入路,首先进行完全腹腔镜下标准的双侧盆腔淋巴结清扫及根治性膀胱切除,然后行体外回肠新膀胱的构建和输尿管新膀胱吻合,最后在腹腔镜下进行新膀胱尿道吻合,其中26例患者施行保留勃起神经步骤.结果 平均手术时间为330 min,出血量为320 ml,无中转开放手术.无围手术期死亡,手术并发症发生率为18.5%,所有患者手术切缘均为阴性.术后6个月日间尿控率90.7%,夜间尿控率82.6%.术后6个月,26例行保留勃起神经患者中10例有性功能.术后随访1～53个月,局部肿瘤复发5例,套管穿刺口种植转移1例,远处转移6例,随访期间死亡11例.结论 腹腔镜下膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术是可行的,具有低并发症和较好的新膀胱功能.