大鼠甲状旁腺细胞经培养后再移植的实验研究

目的　研究大鼠甲状旁腺细胞经培养后再移植对其存活的影响。方法　将经胶原酶和胰蛋白酶消化的甲状旁腺细胞培养后再行移植 ,观察移植物的存活情况 ,并对移植物做透射电镜观察。结果　新鲜甲状旁腺移植组平均存活期为 (9.2 5± 3.4 5 )d ;甲状旁腺细胞培养后移植 ,移植物的存活时间为 (46 .2 5± 7.4 4 )d ,明显延长(P<0 .0 1) ,在 5 0d观察期内 ,8只鼠中有 6只的血清钙及PTH值持续在正常范围内。移植物内可见完整的甲状旁腺细胞 ,其内见丰富的粗面内质网、杆状的线粒体及分泌颗粒。结论　大鼠甲状旁腺细胞经培养后再移植可以延长移植物的存活时间 ,是治疗甲状旁腺功能低下症的一条有效途径。     

3D自组装肽纳米纤维支架对胰岛细胞分泌功能的影响

背景：3D自组装肽纳米纤维支架能很好模拟体内微环境,给予细胞必要的结构模式,促进细胞外基质的正确组成及细胞的生长,改善细胞功能。 目的：体外观察3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架对胰岛细胞分泌功能的影响。 方法：将3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架与成年大鼠胰岛细胞共培养,AO-PI荧光染色法检测胰岛细胞的活性及生存率;放射免疫法测定胰岛细胞的分泌功能;扫描电镜观察胰岛细胞包裹在3D纳米支架中成三维立体的生长状态。 结果与结论：在3D纳米支架培养环境中胰岛细胞纯度≥80%;3D纳米支架组胰岛生存率及胰岛细胞分泌功能明显高于无支架组(2D培养组)(P < 0.05);扫描电镜显示自组装肽纳米纤维支架形成了具有几何形状的纳米级薄层,将胰岛细胞包裹在3D纳米支架中,胰岛细胞成三维立体生长。表明3D自组装肽纳米纤维支架可为胰岛细胞体外生存提供3D培养环境,改善胰岛细胞的活性、分泌功能及形态,延长胰岛细胞体外生存期。     

应用骨髓法培养树突状细胞的研究

目的探讨培养树突状细胞(DC)的最佳方法和合理的培养时间。方法取大鼠的骨髓细胞分别加入4种细胞因子重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rrGMCSF)5μg/L,重组大鼠白细胞介素4(rrIL4)5μg/L,重组大鼠肿瘤坏死因子α(rrTNFα)10μg/L,重组大鼠γ干扰素(rrγIFN)20μg/L培养2周,并用PE标记的抗大鼠CD86单克隆抗体检测它的成熟度。结果从第7天开始细胞周围开始逐渐伸出突起,第13天以后突起5～6支左右,且长度逐渐缩短,成熟的树突状细胞伸出长短不等的突起,类似神经细胞的树突。60只大鼠培养所得的树突状细胞平均为(1.18±0.21)×107第7、11、13、15天的CD86单抗的阳性率分别为30%、80%、92%、94%,随着时间的延长,它的阳性率不断增加,尤以第1周到第2周之间增长的特别明显,但2周以后,树突状细胞的成熟度无明显提高。结论应用骨髓法来培养树突状细胞加入细胞因子rrGMCSF、rrIL-4、rrTNF-α、rr-γ-IFN培养2周,可得到成熟的树突状细胞。     

高压氧微重力胰岛移植治疗糖尿病的疗效

目的：探讨高压氧条件下微重力培养的高分子可降解聚乙醇酸支架-胰岛复合物移植后对糖尿病大鼠的治疗效果。方法：将胰岛细胞在体外静止培养（对照组）、支架微重力培养（实验组1）及高压氧条件下支架微重力培养（实验组2）,5d后将胰岛移植到糖尿病大鼠体内。在移植后不同的时间点,分别对各组血糖及血清胰岛素含量等指标进行检测。结果：与对照组相比,实验组1和实验组2糖尿病大鼠的血糖浓度显著降低,血清胰岛素含量显著增高;且实验组2效果更为显著。电镜观察显示移植后,支架-胰岛复合物中胰岛形态良好,细胞间可见交织呈网状的细胞外基质。结论：高压氧条件下微重力培养可更加改善胰岛移植物的形态并使其更好地发挥生物学效能。     

腹腔镜结直肠癌手术持镜医师的操作技巧和体会

国外腹腔镜医师及助手需要经过长达2年的严格培训后,方可在有经验的腹腔镜医师指导下进行人体操作。我国腹腔镜在短期培训方面做了一些工作[1],     

完全腹腔镜与腔镜辅助根治性全胃切除术的短期疗效对比

目的 比较3D腹腔镜下完全腹腔镜根治性全胃切除术(TLTG)与腔镜辅助根治性全胃切除术(LATG)治疗食管胃结合部癌的短期疗效.方法 回顾性分析上海市东方医院胃肠外科2017年1月至2020年9月间116例食管胃结合部癌行3D腹腔镜下根治性全胃切除术的临床资料,分为全腔镜组及腔镜辅助组,通过1:1倾向性评分配对进行匹配...     

大肠癌术前肠道准备对术后肠道菌群变化的影响

研究口服肠道抗生素对大肠癌患者术后肠道菌群及肠道功能恢复的影响.将68例大肠癌患者随机分为两组:非口服抗生素组35例、口服抗生素组33例.观察两组患者首次排气时间、腹胀发生率、3度肠道菌群失调发生率、腹腔感染发生率、切口感染发生率、吻合口漏发生率、术后便涂片杆/球等指标.大肠癌术前非口服肠道抗生素对患者的术后的肠道菌群影响小且对肠道功能恢复有一定的促进作用,口服肠道抗生素并不能减少术后常见并发症的发生,但对于3度肠道菌群失调发生率的影响有待于进一步的研究.     

3D自组装肽纳米纤维支架对胰岛细胞分泌功能的影响

背景：3D自组装肽纳米纤维支架能很好模拟体内微环境,给予细胞必要的结构模式,促进细胞外基质的正确组成及细胞的生长,改善细胞功能。目的：体外观察3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架对胰岛细胞分泌功能的影响。方法：将3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架与成年大鼠胰岛细胞共培养,AO-PI荧光染色法检测胰岛细胞的活性及生存率;放射免疫法测定胰岛细胞的分泌功能;扫描电镜观察胰岛细胞包裹在3D纳米支架中成三维立体的生长状态。结果与结论：在3D纳米支架培养环境中胰岛细胞纯度≥80%;3D纳米支架组胰岛生存率及胰岛细胞分泌功能明显高于无支架组（2D培养组）（P〈0.05）;扫描电镜显示自组装肽纳米纤维支架形成了具有几何形状的纳米级薄层,将胰岛细胞包裹在3D纳米支架中,胰岛细胞成三维立体生长。表明3D自组装肽纳米纤维支架可为胰岛细胞体外生存提供3D培养环境,改善胰岛细胞的活性、分泌功能及形态,延长胰岛细胞体外生存期。     

双糖链蛋白聚糖对大肠癌细胞生长作用研究

目的研究Biglycan对大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭、凋亡等生长作用影响。方法采用Transwell方法检测Biglycan对大肠癌细胞HT-29和SW480的侵袭能力影响;AV／PI染色检测细胞凋亡情况;Westernblot法检测加药处理前后细胞内Rb、pRb和Ras表达变化。结果100nmol／LBiglycan和50nmol／I。Biglycan可抑制大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭转移,同时可诱导HT-29、SW480细胞发生凋亡;经Biglycan处理后,细胞内Rb总蛋白无显著性变化,pRb和Ras出现下调趋势。结论Biglycan可抑制大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭转移、诱导细胞凋亡,下调pRb和Ras的表达、调控细胞周期从而抑制细胞生长为其可能的作用机制。     

Fas配体表达对甲状旁腺细胞移植的影响

目的探究睾丸细胞Fas配体(FasL)表达对联合移植的甲状旁腺细胞的影响。方法将不同数量的大鼠睾丸Sertoli细胞与同种的甲状旁腺细胞联合移植,观察移植物的存活情况;并对移植物进行细胞成分、淋巴细胞凋亡及甲状旁腺功能检查。结果单纯甲状旁腺细胞移植组,存活期为(17±4)天。睾丸Sertoli细胞与甲状旁腺细胞联合移植组存活时间延长,存活期可超过60天。当Sertoli细胞数增加到4×106时,在60天观察期内,8只鼠中的6只血清钙及PTH值维持在正常范围内(P<0.01)。移植物内可见甲状旁腺细胞、表达FasL的睾丸细胞及凋亡的淋巴细胞,甲状旁腺细胞仍具有旺盛的分泌能力。结论睾丸Sertoli细胞FasL的表达诱导了活化的淋巴细胞凋亡,对联合移植的甲状旁腺细胞起到了保护作用。