抗辐射药物E0703和代谢物E0703-酮在猕猴体内的药代动力学

目的建立高效液相-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定猕猴血浆中E0703和代谢物E0703-酮的方法,并探讨E0703和代谢物E0703-酮在猕猴体内的药代动力学。方法猕猴单次po给予E0703 10 mg.kg-1后,于不同时间点采集血浆样品。血浆样品用乙腈沉淀蛋白,经HPLC分离,质谱采用ESI离子源正离子电离和多反应检测模式(MRM)测定E0703和E0703-酮的血药浓度,并计算相关药代动力学参数。结果E0703和E0703-酮的检测线性范围均为0.625～500μg.L-1,日内、日间精密度均小于7%,准确度在±10%以内。E0703和E0703-酮的峰浓度(cmax)分别为14.7和96.9μg.L-1;曲线下面积(AUC)分别为173.0和1339.7 h.μg.L-1;消除半衰期(t1/2)分别为6.6和11.8 h。结论该液质联用定量分析方法灵敏、快速、准确。E0703和E0703-酮的血药浓度-时间曲线相似,E0703在猕猴体内迅速转化为E0703-酮,但E0703-酮的cmax与AUC远高于E0703。     

毛细管电泳技术在核酸分析中的应用

毛细管电泳技术以其高效、快速、所需样品少等特点而广泛应用于核酸的分析。本文综述了近5年来毛细管电泳技术在核酸定性、定量和筛选研究中的应用,包括反义寡核苷酸的分析,适配体的筛选,基因突变的分析,此外对微芯片毛细管电泳技术及其在核酸分析研究中的应用进行了介绍,并对其前景进行了展望。     

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术的研究进展*

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术（简称正糖钳技术）已被公认为测定胰岛素敏感性的金标准,并在糖尿病及其治疗药物的研究中得到日益广泛且深入的应用。该技术通过同时输注外源性胰岛素与葡萄糖,升高血浆胰岛素水平,同时维持血糖在基础稳态水平。该技术减少了内源性因素对实验的影响,具有准确可靠、重复性好、避免低血糖发生等优点。现介绍该技术的原理、方法、应用等,以促进该技术在我国的进一步完善、发展及应用。     

肾素-血管紧张素系统与糖尿病肾病

随着社会经济的发展、生活水平的提高、生活方式的改变,糖尿病发病率在全球范围内迅速上升;而随着糖尿病诊治技术的不断进步,糖尿病患者的生存时间显著延长,使糖尿病肾病(DN)的患病率也逐年上升。目前,在美国和欧洲许多国家糖尿病肾病已成为引发     

靶向人乙型肝炎病毒siRNA的构效关系研究

目的:在体外模型HepG2.2.15细胞中研究靶向人乙型肝炎病毒(HBV)小分子干扰RNA(siRNA)的构效关系.方法:靶向HBV基因不同位置合成21条siRNA,分析多条siRNA在HBV 8个基因型(共120条序列)中的保守性情况以及siRNA的二级结构特点.利用乙肝表面抗原(HBsAg)ELISA定量方法与荧光定量PCR方法检测8iRNA在不同浓度下(1,10,100 nmoL/L)对HepG2.2.15细胞中乙肝病毒HBsAg和mRNA表达的抑制情况.SPSS进行定量构效关系(QSAR)分析.结果:半数(13/21)的siRNA以浓度依赖模式抑制靶基因的表达(P＜0.05).其中537,672,1263,1658等序列活性显著高于阳性对照序列.QSAR分析显示siRNA基因型同源性(P＜0.01)、S/P和X区(P＜0.05)与siRNA活性有紧密关系;重叠基因[S/P/前基因组(pregenome)mRNA]区域局部靶mRNA二级结构保守性、发卡环、多茎环和茎的碱基数目与siRNA活性相关(R=0.994,P=0.009).结论:siRNA的靶点序列、siRNA本身的一级序列与二级结构对其抑制靶基因的活性有显著影响,具有明显的构效关系.优选siRNA可能作为治疗多基因型乙肝感染的候选序列.     

125I-聚乙二醇化胸腺素α1的制备与纯化

目的制备高纯度放射性^125I标记的酪氨酸聚乙二醇化胸腺素α1（Tyr-PEG-TA1）用于动物药代动力学研究。方法改良Iodogen法进行^125I标记。Ziptip头监测标记反应进程以优化反应条件。采用Sephadex G50与Sephadex G10两步凝胶层析法对标记混合物进行纯化。利用酶免疫分析（EIA）方法鉴定PEG-TAl增加酪氨酸残基前后以及Tyr-PEG-TA1经^125I标记前后免疫学活性的变化。结果PEG-TA1增加酪氨酸残基前后以及Tyr-PEG-TA1经^125I标记前后免疫活性均无明显变化，纯化后的标记产物放化纯度为95．9％，放射性比活度为39．4Bq／ng。结论成功地制备了放化纯度和放射性比活度均满足药代动力学研究的^125I-Tyr-PEG-TA1。     

聚乙二醇修饰对重组人促红细胞生成素在大鼠体内药代动力学的影响

目的:研究聚乙二醇修饰对重组人促红细胞生成素在大鼠体内药代动力学的影响。方法:大鼠随机分成3组,分别单次皮下注射5μg·kg-1氨基葡萄糖-聚乙二醇-EPO(G-PEG-EPO)、甲氧基-聚乙二醇-EPO(M-PEG-EPO)和未经修饰的EPO原液后采集血样,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)测定大鼠血浆样品中的EPO浓度。结果:给药后,与EPO相比,M-PEG-EPO,G-PEG-EPO较EPO吸收过程缓慢,峰浓度Cmax水平显著降低,代谢清除相对缓慢,末端消除相半衰期t1/2明显延长。而M-PEG-EPO,G-PEG-EPO的药代动力学参数除AUC0～inf和Cls外均无统计学差异。结论:聚乙二醇修饰能显著延长EPO在大鼠的末端消除相半衰期,G-PEG-EPO和M-PEG-EPO在大鼠的药代动力学性质相似。     

冬病夏治穴位敷贴治疗慢性支气管炎的临床疗效观察

目的:观察穴位敷贴治疗慢性支气管炎的临床疗效。方法:将120例慢性支气管炎患者随机分为对照组和观察组各60例。对照组采用利肺片治疗(每次2粒,每日3次),观察组在对照组治疗基础上加用穴位敷贴。观察治疗前、治疗后中医证候积分的变化,并评定疗效;观察治疗后半年内感冒次数。结果:观察组治疗后证候积分减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);观察组临床疗效总有效率为95.0%,对照组为83.33%,观察组疗效优于对照组(P<0.01);观察组治疗后感冒次数较对照组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:冬病夏治穴位敷贴对慢性支气管炎有较好的近期疗效,并能预防感冒。