NGF过表达对大鼠脑缺血再灌注损伤模型认知功能的影响

目的探究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)过表达对大鼠脑缺血再灌注损伤模型认知功能的影响。方法将SD大鼠分成空白对照组、模型组和NGF转染组。水迷宫实验检测各组大鼠学习能力,荧光定量PCR,Western blot和免疫组织化学染色检测NGF和Caspase-3的相对表达水平,免疫荧光染色定位NGF蛋白的表达,尼氏染色和透射电镜观察神经元细胞的数量以及血脑屏障的完整性。结果 NGF转染组逃避潜伏期时间要明显短于模型组,而穿越平台次数明显多于模型组。NGF转染组NGF蛋白和mRNA相对表达量明显高于模型组,Caspase-3蛋白和mRNA相对表达量明显低于模型组。NGF蛋白与神经元细胞标记蛋白NSE可共染,而与神经胶质细胞标志物GFAP不可共染。NGF转染组细胞数明显多于模型组细胞数。模型组细胞轮廓模糊,血脑屏障破坏,而NGF转染组细胞轮廓存在,血脑屏障破坏较小。结论 NGF的过表达促进神经元细胞的存活,对大鼠脑缺血再灌注损伤模型的认知功能有保护作用。     

IRM-2小鼠全长cDNA文库的构建及鉴定

Objective To screen and isolate the radioresistance related genes of IRM-2 mice.Methods cDNA library of IRM-2 mice was constructed by SMART technique.Total RNA was isolated from spleens of IRM-2 male mice.The first-strand cDNA was synthesized by using PowerScript reverse transeriptase,and double-strand cDNA was synthesized and amplified by long PCR.The PCR products were purified,digested with restriction enzyme Sfi I.The ds-cDNA fragment lessthan 500 bp was fractionated and ligated to the Sfi I-digested pDNR-LIB vector.The ligation mixture was transformed into E.coil DH5α by electroporution transformation to generate the unamplified cDNA library.The quality of cDNA library was identified by PCR technique.130 clones from cDNA library were sequenced and compared with GenBank database.Results The cDNA library contained 2.25 x 106 independent clones with an average insert size of 1.2 kb.The ratio of recombination and full-length was 95% and 55%,respectively.21 pieces of EST sequences from cDNA library were not the same as the known mice genes and registered into GenBank EST database,with registered number DW474856-DW474876.Conclusions cDNA library of IRM-2 mice has been constructed successfully.21 pieces of EST implies that radioresistance correlative genes may be in IRM-2 mice,which will lay a foundation for isolating and identifying radioresistance related genes in further study.     

枫糖尿症一例

患儿男,年龄5个月,因间断痉挛、智力低下、尿臭来院就诊。为第一胎,足月顺产,母乳喂养。母孕期正常,父母非近亲婚配,家族中无类似疾病。患儿出生后第8天无明显诱因出现痉挛、呼吸节律不整并迅速进入昏迷。曾经当地医院诊断为“新生儿肺炎”、“中毒性脑病”并住院治疗后意识转清,呼吸平稳,22天后自动出院。出院后患儿仍频繁痉挛、间断呕吐,尿液、汗液均带臭味,皮肤变白,毛发变浅黄,于1993年5月来我院住院诊治。体检:身长61cm、头围42cm,体重8kg。意识清,全身散发着焦糖臭味,毛发浅黄,皮肤细白,面部有湿疹,前囱平软,双眼斜视,颈不能竖起。胸部对称、心肺（一）,腹软,肝肋下1cm,四肢肌张力高、腱反射亢进、病理反射未引出。实验室检查:血、尿、粪常规正常,血糖2.6mmol/L。肝功能:ALT（GPT）530U/L、AST（GOT）103U/L、rGT172U/L。尿FeCl_3试验（一）,尿2,4-二硝基苯肼试验卌（黄色沉淀）。脑电图中度异常。脑CT:脑髓质密度减低。血、尿氨基酸     

20例肾功能衰竭患者的胰岛功能测定

肾功能衰竭患者可出现糖代谢紊乱,表现在空腹时血糖正常,测葡萄糖耐量试验(OGTT)时,出现糖耐量减低,呈糖尿病样曲线。对此类患者胰岛功能的测定,目前国内尚未见报道。现将我院20名肾功能衰竭患     

5-氨基水杨酸甘氨酸盐在胃肠道内的稳定性研究

目的 研究5-氨基水杨酸甘氨酸盐(5-ASA-Gly)在大鼠胃肠道中的稳定性。方法 以SD大鼠为实验动物,采用高效液相色谱法考察了5-ASA-Gly在体内外胃、小肠环境下及大鼠盲肠内容物中5-氨基水杨酸(5-ASA)的分布情况。结果 5-ASA-Gly在胃和小肠环境下相当稳定,未释放出5-ASA;而在与人体结肠部位细菌环境非常类似的大鼠盲肠内容物中则有5-ASA出现。结论 5-ASA-Gly经盲结肠相关菌丛或酶丛的作用释放出游离药物5-ASA,大大降低了5-ASA的全身吸收,可作为一种有希望的结肠定位释药特定性前体药物加以研究与开发。     

应用短串联重复序列诊断唐氏综合征

目的:探讨联合应用6个短串联重复序列(STR)为标记,结合聚合酶链反应(PCR),单链构象多态性分析(SS-CP)诊断唐氏综合征的可行性。方法:选择21号染色体上的D21S1414、D21S1413、D21S1432、D21S1437、D21S1446、D21S2054,6个高杂合度的STR基因座扩增,对扩增产物用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染技术分析,通过观察DNA电泳的带型特征诊断唐氏综合征。结果:82例患儿经STR-PCR分析确认31例为唐氏综合征。结论:该方法可以直观、简便、快速地诊断唐氏综合征,为基因诊断唐氏综合征提供实验依据,有利于对唐氏综合征大规模产前诊断的开展。     

细菌16S rRNA基因检测在新生儿败血症早期诊断中的临床意义

目的 分析16S rRNA基因检测在早期诊断新生儿败血症中的临床意义.方法 收集临床常见的致病菌菌株37株并提取DNA,对106例临床拟诊为败血症的患儿于入院后24 h内采集血标本,提取DNA,在16S rRNA基因的保守区选择一对通用引物进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),并检验实验方法的灵敏性和特异性;106例临床拟诊为败血症的患儿同时查血培养、非特异性炎症指标及降钙素原(procalcitonin,PCT),并采用x2检验与同期住院的20例非败血症患儿进行比较.结果 所有细菌PCR均得到预期的约371 bp大小的扩增产物,与病毒及人基因组DNA无交叉反应,其扩增下限为10 CFU/ml的大肠埃希菌.106例拟诊败血症患儿血培养阳性15例,PCR阳性36例.PCR的敏感性、特异性及诊断指数分别为82.9%、96.9%和179.85,优于血培养及5项非特异指标至少2项异常的实验诊断方法;在围产儿中,PCR的特异性高于PCT.结论 PCR方法检测细菌16S rRNA基因能迅速判断临床标本中是否存在细菌,对于早期诊断新生儿败血症具有较高的敏感性及特异性,对于区分败血症与局部感染和非细菌性感染具有重要意义.     

吻合静脉治疗手部逆行皮肤撕脱伤

<正>现将2002-09～2005-09笔者等采用吻合静脉治疗手部逆行皮肤撕脱伤14例,总结报告如下。1资料与方法1.1一般资料本组14例。男11例,女3例;年龄16～48岁,平均26.5岁。压面机和绞面机伤10例,其它机器致伤4例。皮肤撕脱情况:腕横纹至近侧指间关节平面11例,腕横