人慢性粒细胞白血病小鼠实验模型的研究

目前制备人慢性粒细胞白血病(CML)小鼠模型的方法主要有三种:①用CML细胞种植免疫缺陷鼠(SCID或NOD／SCID);②用表达P210bcr/abl逆转录病毒载体转染小鼠骨髓细胞并移植入正常鼠体内;③构建bcr／abl转基因鼠。所有这些CML动物模型的研究加深了人们对CML致病机理的认识。本文就目前人CML小鼠模型的研究进展作一综述。     

结肠直肠癌患者PBL、LNL、TIL免疫功能的比较研究

目的：研究结肠直肠癌患者外周血淋巴细胞、肿瘤浸润淋巴细胞、肿瘤引流淋巴结淋巴细胞的免疫学功能,为研究结肠直肠癌患者的过继性细胞免疫治疗积累实验资料。方法：结肠直肠癌患者不同来源淋巴细胞的细胞表型、NK活性、LAK活性、特异性细胞毒活性、体外增殖反应等特征。结果：结肠直肠癌患者PBL、LNL、TIL在免疫功能上有较大差别。从结肠直肠癌患者肿瘤原位新鲜分离的KLNL和TIL的NK活性、LAK活性和特异性细胞毒活性均明显低于PBL。PBL中含有较多的NK细胞,LNL中含有较多的B细胞和CD4^ 细胞,PBL和无肿瘤转移的LNL的细胞增殖能力明显高于TIL和有肿瘤转移的LNL。结论：一般情况较好的结肠直肠癌患者外周血淋巴细胞的免疫学指标和正常人PBL相比基本正常。     

利用流式细胞仪检测人外周血NK细胞毒性方法的建立

目的利用流式细胞仪(FACS)技术检测人外周血NK细胞的毒性。方法首先将pEGFP-N1质粒转染人NK细胞的天然靶细胞K562,经过G418筛选后进一步单克隆化,得到稳定、均一表达绿色荧光蛋白的K562细胞。取对数期的K562-EGFP细胞与人外周血单个核细胞分别按5∶1、10∶1、20∶1、40∶1的比例混合,分别孵育0.5、1、2、4 h后用碘化丙啶(PI)标记,用流式细胞仪分析呈红、绿色荧光的细胞数,最后计算NK细胞的杀伤效率。结果0.5、1、2、4 h均能得到明显的杀伤效果,而且以2h的杀伤率最高。此时杀伤率与传统乳酸脱氢酶法(LDH)具有显著相关性(γ=0.997,P=0.003),而且显示出更强的敏感性。结论利用流式细胞仪检测NK细胞毒活性的方法可作为传统51Cr释放法、LDH法的一个补充,而且具有经济、快速和敏感的特点。     

奈瑟氏淋球菌DNA的AFLP指纹图谱

目的 :评价扩增片段长度技术 (AFLP)分析对淋球菌分离株进行基因分型的能力。方法 :2 6株淋球菌分离株基因以EcoRI和MesI酶切及AFLP分析。结果 :同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的DNA多态性。性伙伴之间分离的淋球菌菌株同源性大于 95 % ,无性关系患者中分离的淋球菌菌株同源性为 70 %～ 95 % ,而不同地点分离株、WHO参考株均不能和本地区分离株聚类。结论 :AFLP是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的分子技术 ,有助于了解菌株来源、菌株间的克隆相关性及抗生素耐药性的传播     

HSV－I感染人单核细胞诱生肿瘤坏死因子α

以纯化ＨＳＶ－Ｉ感染人外周血单个核细胞，发现ＨＳＶ－Ｉ可感染粘附活化的单核细胞和经ＰＨＡ活化的淋巴细胞，并诱导细胞毒因子分泌。ＬＰＳ诱导ＴＮＦ抑制剂多粘菌素Ｂ不能阻断ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞分泌细胞毒因子，但紫外线灭活的ＨＳＶ－Ｉ不能诱导单核细胞分泌细胞毒因子。用重组人ＴＮＦａ中和抗体能完全中和ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞培养上清中的细胞毒活性，表明其中含有的细胞毒因子为ＴＮＦａ。而重组人ＴＮＦａ中和抗体对ＨＳＶ－Ｉ感染的ＰＨＡ活化淋巴细胞上清中的细胞毒活性无明显影响，其细胞毒因子可能大多为淋巴毒素（ＴＮＦβ）。     

T细胞受体基因转染过继性免疫治疗的研究进展

利用T细胞进行过继性免疫治疗是治疗病毒感染性疾病和肿瘤的理想方法,但是用于治疗的T细胞的特异性、亲和性和数量等限制了其应用,如何获得特异、高效、一定数量的T细胞是目前亟待解决的问题。采用TCR基因转染的方法,将特异性高亲和力TCR转移到受体的T细胞中,可以特异性杀伤受体体内的肿瘤细胞。     

淋球菌外膜抗原的免疫原性

淋球菌的唯一宿主是人，在漫长的进化过程中淋球菌形成了一套逃避人体免疫系统的机制。尽管如此，人们却一直试图筛选有保护作用的淋球菌外膜抗原用于疫苗研究，现已发现几个相对稳定的外膜蛋白抗原。     

共表达膜型IL-15和RAE的细胞克隆的筛选和鉴定

目的筛选能够共表达膜型IL-15和RAE的细胞株,为扩增和活化特定免疫细胞提供有效的实验工具。方法前期工作中已通过潮霉素筛选获得共表达膜型IL-15和RAE的BaF3细胞,但阳性细胞所占的比例较低。本实验通过有限稀释法先筛选高表达RAE的单克隆细胞株,再筛选高表达膜型IL-15的单克隆细胞株,最终获得了1株共表达膜型IL-15和RAE的单细胞克隆。将该细胞株与NK细胞共培养后,通过IFN-γ的分泌验证其生物学活性。结果流式细胞仪证实该细胞株能够高水平共表达膜型IL-15和RAE。并具有很强的活化NK细胞的效应。结论成功地制备了共表达膜型IL-15和RAE的单克隆细胞株,为活化特定免疫细胞,如IKDC和NK细胞提供实验工具。     

研究性教学在高等院校医学微生物学教学中的运用

联合国教科文组织编写的《学会生存》一书中指出：“教育具有开发创造精神和窒息创造精神的双重力量。”当今社会需要创新人才,而创新人才的基本特征之一就是善于发现问题、提出问题,并能通过探索寻求解决问题的思路和方法。这就要求高等院校的教师更新观念,积极探索,进行教育创新,而开展研究性教学是实施教育创新的重要途径。     

hCEACAM1介导淋病奈瑟菌对COS-1细胞的黏附

目的 研究人癌胚抗原相关细胞黏附因子1(hCEACAM1)在淋病奈瑟菌黏附宿主细胞过程中的作用.方法 将hCEACAM1 cDNA置于hCD46启动子和兔β-球蛋白第2内含子之后,构建重组真核表达载体pCDPGICEA1.转染COS-1细胞,G418筛选和流式细胞术分选稳定表达hCEACAM1的基因转染细胞.细菌黏附实验检测淋病奈瑟菌对基因转染COS-1细胞的黏附.结果 在hCD46启动子和兔β-球蛋白第2内含子的作用下,hCEACAM1 cDNA在COS-1细胞获得高效表达,淋病奈瑟菌可以黏附表达hCEACAM1的COS-1细胞.结论 hCEACAM1可以介导淋病奈瑟菌对动物细胞的黏附,可能是淋病奈瑟菌特异性感染人体的一种重要受体,可用来制备淋病奈瑟菌感染的相应转基因动物模型.