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82.
EGF-PE35KDEL嵌合毒素对Hela细胞的毒性作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的: 构建由人表皮生长因子和绿脓杆菌外毒素A组成的融合蛋白,并检测其对肿瘤细胞的杀伤能力.方法: 利用基因工程技术连接EGF和PE35KDEL基因,克隆到表达载体pET28a中,将其转化至BL21(DE3),在BL21(DE3)以可溶的形式表达EGF-PE35KDEL嵌合毒素,经DEAE-Sepharose FF阴离子交换等层析后,纯度达到95%.结晶紫检测EGF-PE35KDEL对肿瘤细胞的活性.结果: SDS-PAGE和薄层扫描分析外源蛋白的表达量占菌体蛋白的20%.细胞活性检测证明EGF-PE35KDEL能够抑制Hela细胞的生长,IC50为0.07 μg/ml.结论: EGF-PE35KDEL嵌合毒素对体外表达EGFR的Hela细胞有杀伤作用. 相似文献
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母亲孕期原发性巨细胞病毒(HCMV)感染或再感染可将病毒传播给胎儿,导致胎儿先天性HCMV感染,引起小头畸形、小眼球、肝脾大、智力障碍、耳聋、先天性心脏病等不同程度的神经系统病变和畸形,严重者在孕期可导致胎儿生长迟缓以及流产和死胎。这对新生儿、家庭、社会都产生了很大的危害。目前主张对于早期妊娠伴HCMV感染者施行人工流产,待HCMV—IgM转阴后再受孕。 相似文献
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85.
目的探讨上皮细胞黏附分子(EpCAM)靶向的核酸适体药物偶连物(SYL3C-MMAE)对人胃上皮细胞GES-1(以下简称GES-1细胞)以及人胃癌细胞AGS、MKN45(以下简称AGS、MKN45细胞)的亲和力以及毒性。方法采用实验研究方法。采用免疫组织化学染色检测胃癌组织中EpCAM的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(PCR)检测胃癌组织中EpCAM的mRNA表达水平;应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GES-1、AGS、MKN45细胞中EpCAM蛋白的表达水平;通过流式细胞仪检测SYL3C对3种细胞的亲和力;通过巯基的SYL3C序列马来酰亚胺反应合成SYL3C-MMAE;采用CCK8法检测药物对细胞的毒性;碘化丙啶法检测药物处理后细胞周期情况。观察指标:(1)EpCAM在胃癌中的表达情况。(2)靶向EpCAM的抗体与SYL3C对相关细胞系的亲和力。(3)药物合成情况。(4)药物毒性检测以及细胞周期抑制情况。正态分布的计量资料以x±s表示, 多组间比较采用单因素方差分析, 两两比较采用最小显著差异法检验;方差不齐者采用Welch’’t检验。偏态分布的计量资料... 相似文献
86.
目的 分析和总结以肥厚型梗阻性心肌病为表现的Fabry病患者的临床特征和预后.方法 连续收集2018年1月至2020年7月在阜外医院确诊为Fabry病的患者,通过来我院复诊和/或电话回访获得患者随访资料.结果 纳入Fabry病患者7例,发病年龄和确诊年龄分别为(40±7)岁和(50±5)岁;均因胸痛和/或中重度心力衰竭... 相似文献
87.
目的利用小鼠模型对布鲁氏菌菌壳、布鲁氏菌S2活菌和福尔马林灭活菌的安全性和免疫学特性进行比较研究。方法利用猪布鲁氏菌S2株和重组裂解质粒制备出布鲁氏菌菌壳,将布鲁氏菌菌壳、布鲁氏菌S2活菌和福尔马林灭活菌通过腹腔注射免疫小鼠,进行安全性比较分析。监测免疫后小鼠的血清抗体水平、脾脏T淋巴细胞分型,并进行免疫攻毒实验。结果与布鲁氏菌弱毒疫苗菌株S2比较,布鲁氏菌菌壳具有更好的安全性,免疫小鼠后能产生与弱毒菌株相似的血清抗体水平、脾CD3+和CD4+T淋巴细胞反应,并具有与之相当的免疫保护作用。结论布鲁氏菌菌壳具有良好的安全性,能刺激机体产生体液免疫和细胞免疫反应,可作为预防布鲁氏菌病的新型候选疫苗。 相似文献
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89.
Ⅳ型胶原蛋白和基质金属蛋白酶2在移植静脉中表达的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的观察大鼠自体静脉移植后内膜增生 (IH)平滑肌细胞 (SMC)增殖、Ⅳ型胶原和基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )的变化。方法建立大鼠自体静脉移植模型 ,于术后不同时间处死动物。标本行HE、Verhoeff染色、SP法五溴脱氧脲嘧啶 (5′ Brdu)、Ⅳ型胶原、MMP 2免疫组化染色 ,原位杂交检测Ⅳ型胶原和MMP 2mRNA的表达。计算机图像分析仪测量移植静脉内膜 /中膜厚度、面积比 ,阳性细胞百分比 ,Ⅳ型胶原和MMP 2蛋白和mRNA阳性表达百分比。结果术后 1周移植静脉开始形成新内膜 ,2~ 4周内膜增生明显 ,8~ 12周 ,内膜增生有下降趋势。 5′ Brdu阳性细胞百分比变化趋势与内膜增生趋势相似。与正常静脉比较Ⅳ型胶原阳性区域于术后 1周明显减少 (P <0 0 5 ) ,2~ 8周管壁未见阳性区域。MMP 2在术后 1周表达明显增加 ,2周达高峰 ,8~ 12周恢复至术前水平。Ⅳ型胶原mRNA术后 3d一过性表达增多 (P <0 0 5 )。MMP 2mRNA术后 3d即迅速增高 ,1周达高峰 (P <0 0 5 )。结论静脉移植术后MMP 2高表达导致局部Ⅳ型胶原降解和破坏 ,是SMC向内膜迁移、增殖的重要原因。 相似文献
90.
目的 探索真空疗法治疗足踝部大面积皮肤软组织缺损的有效方法。方法 2002年2月-2004年2月,利用真空治疗方法,封闭式恒定负压吸引治疗技术,治疗足踝部大面积皮肤软组织缺损67例,伴肌腱、骨骼裸露24例。具体操作:先将足踝部大面积皮肤软组织缺损伤口常规严格清创止血后,裸露骨骼的要用克氏针穿数孔,以提供血液营养成分。在伤口表面敷盖孔径为400μm~600μm的无菌医用泡沫海绵,用透明膜封闭伤口和海绵。连接人工皮的硅胶管与负压装置(自制的恒定负压辅助治疗仪),在密封下利用自制的恒定负压辅助治疗仪进行负压吸引治疗(真空疗法)。最佳状态:恒定负压保持在125mmHg,启动5分钟停2分钟,反复循环负压吸引。也有主张先持续吸引48小时,再用循环负压吸引。常规为5~7天换药一次,更换泡沫海绵和透明膜,特殊情况3—4天换药一次,必须保持密封有效负压的状态,使渗出的组织液经过海绵过滤后,把有营养活力吸附于组织上的组织细胞保留住,失去营养活力的组织细胞及组织液通过留置的吸引管将废物吸出,使创面保持新鲜清洁的状态下。结果 足踝部大面积皮肤软组织缺损67例,均在一周内生长出新鲜的肉芽组织,返植皮基本成活。伴肌腱、骨骼裸露24例中有13例裸露的肌腱、骨骼周围在一周内开始渐渐的生长出新鲜的肉芽组织,新鲜的肉芽组织爬行生长约两周左右完全覆盖裸露的肌腱、骨骼表面,为裸露的肌腱、骨骼周围提供血液营养成分,防止了裸露肌腱、骨骼的因缺血而坏死,保存了肢体。二期再根据损伤部位的功能需要,行游离植皮或皮瓣转移移植。11例裸露的肌腱、骨骼因损伤严重处理不当发生部分缺血坏死。结论 真空疗法治疗足踝部大面积皮肤软组织缺损的方法,简便易行,经济费用低,效果可靠,值得临床推广应用。 相似文献