rIL－6抗癌机理初探（Ⅱ）：rIL－6对小鼠LAK细胞体内外调节效应

为探讨ｒＩＬ－６对ＬＡＫ细胞的调节效应，进行了ｒＩＬ－６对小鼠脾脏ＬＡＫ细胞功能影响的体内外实验研究。实验采用Ｃ_（５７）ＢＬ／６荷瘤或正常小鼠，给予ｒＩＬ－６或生理盐水，１５ｄ后取小鼠脾细胞诱导活化后进行ＬＡＫ杀伤功能测定。结果表明①ｒＩＬ－６在体外对ＬＡＫ杀伤活性有明显的促进作用并在一定范围内呈剂量反应关系；②体内注射ｒＩＬ－６后对正常鼠和荷瘤鼠ＬＡＫ细胞的诱导及杀伤活性均有促进作用；③荷瘤对正常鼠ＬＡＫ细胞功能有抑制作用，而ｒＩＬ－６对荷瘤所致ＬＡＫ细胞功能下降有一定的预防作用。提示ｒＩＬ－６对小鼠脾脏ＬＡＫ细胞杀伤活性的促进效应可能是ｒＩＬ－６发挥抗癌作用的一个途径。     

天然免疫识别与外周免疫耐受

免疫应答强度的调节是决定机体可否有效控制致病因素（病毒、细菌、肿瘤等）而又不引起机体自身性损伤（如器官排异、自身免疫病等）的关键,其中负性调节（或外周免疫耐受）是免疫调节的核心。近年的研究证明,负调节性免疫细胞的各群体综合性地控制这一关键过程,其中调节性T细胞（T—reg）的研究占据目前研究的主流,并同时与辅助性T细胞的各亚群（Th1、Th2、Th3）的研究形成相互关联又互有区别的两大领域。这些研究对抗感染免疫、抗癌免疫、自身免疫病和器官移植提出了许多新的观点,并进而有可能诞生新的针对这些重大疾病的诊断与治疗技术。近3年来固有（天然）免疫细胞如NK、DC、γδT、NKT的某些亚群及其Toll样受体家族形成的天然免疫调节网络对免疫应答的调节作用引起学术界极大关注,     

饮食改变与世界性胃癌下降

据70年代资料分析,我国男女性胃癌死亡率为各类癌症之首,是严重危害人民健康的疾病。胃癌发病率在世界范围呈现很大差别,但在50年代以后,胃癌在大多数国家呈普遍持续性下降,引起各国有关学者的重视。目前,普遍认为饮食因素改变是致胃癌发病率下降的重要原因。本文综述了世界胃癌的动态变化和饮食习惯的逐年改变,分析了二者之间的内在联系,并对可能致胃癌发病率下降的部分原因做一介绍。     

人外周血NK细胞生物学特征的初步研究

NK细胞的纯化及体外扩增是研究NK细胞重要的方法学基础.NK细胞不需在要特异抗原的刺激下即可杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞,它的功能还受多种细胞因子的调节,其中IL-2在体外可显著促进NK细胞的杀伤功能及增殖.本实验在此基础上对NK细胞的生物学特征进行了初步研     

淋巴细胞和巨噬细胞去除对人骨髓造血细胞体外扩增效应的影响

为了探讨淋巴细胞和巨噬细胞去除对人骨髓造血细胞体外扩增效应的影响 ,采用抗CD3、抗CD5 6和抗CD14单克隆抗体介导的补体细胞毒方法 ,去除骨髓单个核细胞 (MNC )中的T淋巴细胞、NK细胞和巨噬细胞 ,流式细胞技术 (FACS )分析细胞表面标志。将经不同单抗处理的骨髓MNC加入含有多种造血生长因子的培养基中进行体外有核细胞扩增 ,并观察多向祖细胞集落 (CFU GEMM )的形成能力。结果显示 ,经抗CD3、抗CD5 6、抗CD14单抗分别处理和用上述三种单抗共同处理的骨髓MNC中相应的靶细胞与MNC对照组相比均有明显的降低。经多种造血生长因子刺激培养 2 0d ,骨髓MNC对照组有核细胞总数扩增了 6 5倍 ,T细胞、NK细胞和巨噬细胞去除组分别扩增了 90倍、 77 2倍和 6 7 4倍 ,而三种细胞共同去除组仅为 2 86倍。骨髓MNC对照组CFU GEMM产率为 16 1 5 0± 12 5 4 ,T细胞去除组CFU GEMM产率为 370 0 0± 5 8 2 2 ,明显高于前者 ,差异显著 (P <0 0 0 5 )。NK细胞去除组为 2 0 5 5 0± 30 73,与MNC对照组相比也有显著差异 (P <0 0 5 )。巨噬细胞去除组为 16 3 2 5± 18 5 4 ,三种细胞共同去除组仅为 4 9 75± 9 98。本文结果提示 ,单纯去除骨髓MNC中的T淋巴细胞或NK细胞可明显促进人骨髓造血细胞的体外扩增效应。     

人SCF和IL-15基因共转染NK细胞系生物学特性研究

目的：研究人SCF和人IL-15基因共转染NK细胞系的生物学特性。方法：利用LipofectAMINE^TM将IL-15真核表达载体pcDNA3-hIL-15和SCF真核表达载体pcDNA3-hSCF共转染NK-92细胞，RT-PCR鉴定表达SCF和IL-15的细胞克隆并以SCF依赖细胞株TF-1和IL-15依赖细胞株CTLL-2测定上清活性，MTT法检测增殖和杀伤活性。流式细胞术检测细胞表面分子CD3、CDl6、CD56、CD25、CD48、CD54、CD69和CD95。结果：建立共表达hSCF和hIL-15基因的NK-92S15细胞株，在IL-2培养条件下，其增殖能力表现出更强的聚集趋势，且生长要求有一定的细胞浓度，杀伤活性有不同程度下降。细胞表面分子CD16和CD56没有显著变化，而NK细胞活化相关分子CD25、CD48、CD54和CD95明显降低。结论：可以通过SCF和IL-15基因共修饰NK-92，改变其生物学特性，观察NK细胞活化、杀伤相关分子的特征，使NK细胞系有更深入的研究价值。     

人外周血单个核细胞表达细胞因子mRNA的临床意义研究

目的 建立细胞因子的基因检测方法,观察其在临床上的初步应用情况。方法 利用RT-PCR技术检测部分免疫相关性疾病和肿瘤病人外周血或组织中14种细胞因子的表达情况。结果 20例支气管哮喘病人外周血单个核细胞和23例肿瘤病人癌组织主要表达Th2类细胞因子(Ⅱ-4、6、10、13),15例肾病综合征病人主要表达炎性细胞因子(IL-1β、IL-6),16例自身免疫性甲状腺疾病病人主要表达IL-2、IL-4、IL-6,而5例正常人外周血单个核细胞中未检出细胞因子。结论 RT-PCR法检测细胞因子可用来反映多种疾病的病理变化。     

人外周血NK细胞纯化、扩增及克隆化的初步探索

分别采用Panning法、补体裂解法、绵羊红细胞花环法、Percoll不连续密度梯度离心法对NK细胞进行纯化并以流式细胞仪检测其纯度和计数探索NK细胞的体外扩增条件 ,将纯化NK细胞经有限稀释 ,在饲养细胞、IL 2、PHA及LCM等培养条件下进行克隆化培养并进行鉴定。研究表明NK细胞的纯度由纯化前 10 %左右提高到 30 %～ 70 %不等 ,以Percoll不连续密度梯度离心法所获纯度最高 ,约为 70 %。NK细胞的体外扩增在含有IL 2、PHA及条件培养基最显著。每 96孔板可获 4～ 16个CD3 CD5 6 +NK细胞克隆 ,每 96个克隆的细胞数最多可达 2 35× 10 5。     

大蒜素、硒等复合物对小鼠S180肉瘤移瘤后抑瘤作用的实验研究

我省流行病学研究发现大蒜对胃癌有保护作用,大蒜的主要成份为大蒜素、硒等。国内实验室研究表明大蒜浸液、大蒜素对肿瘤细胞有杀伤作用,国外的研究表明硒有加强抗癌剂抑制肿瘤生长的作用,大蒜素硒等     

重组人白细胞介素-1β对人胚胎胰岛分泌白细胞介素-6及对胰岛分泌功能的影响

目的：探讨ｒｈＩＬ－１β对人胚胎胰岛分泌ＩＬ－６以及对胰岛分泌功能的影响。方法：Ｅ 胚胚岛并对其进行原代培养,加入不同浓度的ｒｈＩＬ－１β培养４８ｈ取其上清,测定ＩＬ－６、胰岛素、胰高血糖素含量和ＩＬ－６ＭｃＡｂ中和试验,对ｒｈＩＬ－１β刺激和对照组胰岛ＲＮＡ进行ＩＬ－６斑点杂交。结果：（１）经ｒｈＩＬ－１β刺激后胰岛培养上清ＩＬ－６含量显著升高,在一定范围内呈剂量依赖关系（７４－２９４ｍＵ／胰岛