人Leptin的cDNA克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达

Leptin是近年来发现的调节机体内分泌和能量代谢的最重要的肽类激素,其由脂肪细胞合成、分泌,作用于下丘脑的Leptin受体,促进下丘脑神经肽的分泌,或直接作用于靶细胞的Leptin受体,产生广泛的生物学效应.     

白细胞介素-6与脑胶质瘤关系的研究

目的:通过观察人脑胶质瘤细胞是否可以自发分泌白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),为进一步探讨IL-6在脑胶质瘤发生、发展中的可能作用提供线索。方法:对4例脑胶质瘤病人的手术标本进行原代细胞培养,分不同时相收获上清,并对其上清进行IL-6活性检测。结果:各组上清中均有IL-6活性,IL-6生物活性以D_(0～6)上清活性最高(1.131U/L),D_(0～6)上清活性最低(0.18U/L)。人脑胶质瘤细胞受细菌脂多糖刺激后,分泌IL-6的能力略有增强。IL-6单克隆抗体可中和脑胶质瘤上清对B9.9细胞的增殖作用。结论:原代培养的人脑胶质瘤细胞可自发分泌IL-6。     

rhIL-6对辐射小鼠的保护及其对血小板损伤作用的拮抗效应

目的研究国产ｒｈＩＬ－６对造血系统的作用及其抗辐射效应。方法选用Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，分别腹腔注射生理盐水（ＨＢＳＳ）或ｒｈＩＬ－６，然后致死全身照射或先致死全身照射后腹腔注射ＨＢＳＳ或ｒｈＩＬ－６。结果ｒｈＩＬ－６在辐射后对小鼠具有治疗效果，平均生存期由９．３天延长至１２．７天，对ＲＢＣ、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＰＬＴ均有明显的促再生作用，ｒｈＩＬ－６预防注射亦可拮抗辐射的致死效应，平均生存期由９．３天延长至１１．５天。结论ｒｈＩＬ－６在体内具有促进血细胞再生作用，从而延缓致死辐射所致死亡。     

T淋巴细胞对人骨髓造血细胞体外扩增的负调节作用

采用抗CD3或抗CD8单克隆抗体的补体细胞毒方法体外清除人骨髓MNC(单个核细胞)中的T淋巴细胞和用流式细胞技术(FACS)分析细胞表面标志,观察人骨髓T淋巴细胞对造血细胞增殖的负调节效应.将MNC加入含多种造血生长因子的培养基进行液态扩增并检测其CD34+细胞绝对数、粒-巨噬集落(CFU-GM)和多向祖细胞集落(CFU-GEMM)形成能力.结果表明,抗CD3,抗CD8或抗CD3+抗CD8单抗清除T淋巴细胞的骨髓MNC,其细胞总数经造血生长因子刺激培养20天分别扩增了75.8,79.6和77.4倍,明显高于对照组(67.0倍).体外培养6天时CD8清除组CD34+细胞的扩增最高可提高17.82%.上述3个清除组的CFU-GM产率分别为173.67±18.90,165.33±26.58和170.33±21.50,对照组79.67±8.33.这3个清除组与对照组比较差异显著(P＜0.05).上述3个清除组的CFU-GEMM产率分别为431.33±34.56,370.33±42.10和386.67±10.02,对照组为177.67±26.86.这3个清除组与对照组比较P值分别为＜0.002,＜0.05和＜0.005.此研究结果提示骨髓中T淋巴细胞可以抑制造血细胞的体外扩增、CFU-GM和CFU-GEMM产率,其作用机制有待进一步探讨.     

rhCSF对骨髓移植后造血系统重建的作用

随着组织配型技术、照射预处理方法和免疫抑制疗法的飞速发展,骨髓移植已是目前临床上治疗某些难治的血液病和恶性肿瘤较常用的一种治疗手段.但由于骨髓移植后造血功能恢复期间全血细胞减少,严重危及病人的生命,尤其是由于中性粒细胞减少所引起的感染已成为骨髓移植后患者死亡的一个重要原因.而CSF具有提高循环血中性粒细胞数和加速骨髓移植后造血系统重建的作用,引起各相关学科科学家极大重视.近年来,基因工程技术已使     

人肿瘤细胞中Th2类细胞因子的优势表达

近年的研究发现,肿瘤细胞存在Th2型细胞因子偏移的倾向.我们选择了20种人肿瘤细胞株,采用RT-PCR和RNA斑点杂交的方法分析Th1/Th2类细胞因子的分布情况.20种人肿瘤细胞株中包括11株实体瘤:以IL-2、IFN-γ代表Th1类细胞因子,IL-4、IL-10、IL-13代表Th2类细胞因子,β-actin作为内参照,并初步进行了半定量估计.11株实体瘤中,除HTB-133T-47D和小细胞肺癌有Th1类细胞因子表达,呈现混合的ThO型,M14无细胞因子表达外,其余8株均呈典型的Th2型细胞因子分泌状态,并且二株ThO型在表达量上亦明显的向Th2类偏移,为ThOTh2型.9株血液系统肿瘤表现的结果较复杂,除Karpas淋巴瘤和U266骨髓瘤表达典型的Th2型细胞因子外,其余均为混合表达的ThO型     

重组人催乳素对小鼠和人结肠腺癌的过继细胞免疫治疗的促进作用

恶性肿瘤病人进行骨髓移植(BMT)治疗后恶性肿瘤的复发对癌症病人来说仍然是一个主要难题.过继免疫治疗极有可能是有效的预防方法之一.首先采用C57BL/6鼠建立荷结肠腺癌(MCA-38)模型,将MCA-38细胞株经尾静脉注入小鼠,该鼠将因为肿瘤定向转移于肺而导致死亡.荷瘤后10天对小鼠进行致死剂量照射,同时给予同基因骨髓移植(BMT)并加脾细胞移植悬液(SC)移入,在此基础上给予重组人催乳素(rhPHL)(10μg/天,连续10天,ip).实验分为单纯     

rIL-6抗癌机理初探—rIL-6对小鼠Mφ、LAK、NK、CTL细胞体内外调节效应

随着IL-6研究的日益深入，IL-6的抗癌效应研究越来越受到重视。为了进一步探讨IL-6对MΦ、LAK、NK、CTL细胞的调节效应，我们进行了rIL-6对小鼠MΦ、LAK、NK、CTL细胞调节效应的体内外实验研究，实验采用6～7周龄，体重为18—22g，雌性C57BL／6荷瘤(EL6)或正常小鼠，     

重组人白细胞介素—15的纯化及生物活性鉴定

目的探讨人白细胞介素15的纯化工艺和进行活性鉴定。方法将rhIL-15工程菌大量扩增后通过包涵体提取、复性、凝胶过滤、阴离子交换层析、高效反相液相色谱等技术进行纯化。结果经纯化得到rhIL-15,其分子量为14.4kD,蛋白纯度为99％以上,比活为1×107U/mg,对NK细胞杀伤活性具有明显的促进作用。结论通过三步纯化方法可以获得高纯度、高回收率和高生物学活性的rhIL-15,且具有明显的促NK细胞杀伤活性。