乳腺实性乳头状癌中Ki67的表达及临床意义

0引言 1995年Maluf等[1]提出一种新的乳头状肿瘤类型:乳腺实性乳头状癌(solid papillany breast cancer,SPC)是乳腺癌的一种特殊类型.SPC在2003年WHO关于《乳腺和女性生殖系统肿瘤的病理学和遗传学》分类中被称为“导管内乳头状癌的实体变型”[2].目前,国内外对乳腺实性乳头状癌的相关研究较少,其预后及生物学行为仍未被充分认识.本研究对乳腺实性乳头状癌进行了免疫组织化学染色,探讨其生物学行为和预后.     

乳腺实性乳头状癌73例临床病理诊断

目的对乳腺实性乳头状癌(solid papillary carcinoma,SPC)的临床病理特征和免疫表型特点、预后和鉴别诊断进行探讨。方法收集伴或不伴有浸润癌的SPC共73例,总结其临床资料、大体和组织病理特征,并行透射电镜观察及免疫组织化学EnVision法染色。选用抗体包括CK、肌上皮标记、神经内分泌标记、增殖标记Ki-67和ER、PR、c-erbB-2等。结果本病好发于老年女性,发病平均年龄64.7岁。肿瘤最常见的临床症状为乳腺肿块和乳头溢液。行腋窝淋巴结清扫术43例中有31例检出癌转移。镜检所有标本均见到实性乳头状病变,25例伴有黏液分泌。周边常可伴有导管内乳头状瘤。肿瘤细胞呈多边形、卵圆形或梭形,呈印戒样。胞质丰富,呈嗜酸性或细颗粒状。细胞核轻度或中度异型,51例核分裂象5个/10HPF。43例伴发浸润癌。肿瘤基底型CK表达呈阴性。平滑肌肌动蛋白SMA、p63在乳头轴心肌上皮的阳性率分别为91.8%、67.1%,在导管周围肌上皮的阳性率分别为91.8%,73.9%。CgA和Syn以及NSE阳性率分别为89.0%,86.3%,95.9%。Ki-67平均阳性指数为10.2%。73例行ER、PR染色的肿瘤大部分呈阳性,Her-2大部分呈阴性。电镜下可见到细胞内的神经内分泌颗粒。结论乳腺SPC是一种低度恶性的乳腺导管内癌,好发于老年女性,有其独特的组织形态、免疫组织化学特征,部分SPC与乳腺黏液癌和神经内分泌癌相关。随访资料显示SPC具有良好的预后。     

二羧乙基锗三氧化物对实验性动脉粥样硬化的预防作用的研究

本文报道在日本大耳白兔实验性动脉粥样硬化的造型过程中,用有机锗化合物对血脂和动脉粥样硬化的影响进行了探讨,将有机锗化合物每日按80mg/kg体重一次性口服,进行了4个月的实验。结果表明该化合物对高脂膳食大耳白兔的降脂作用不显著,并且对实验性主动脉硬化的预防作用也不明显。     

抑癌灵抗肿瘤作用的实验研究

目的:探讨抑癌灵抗肿瘤作用及其作用机制.方法:采用动物体内抑瘤实验、病理学形态学观察该药在体内对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用;采用血清药理学实验观察该药在体外对MGC-803胃癌细胞的抗增殖作用.结果:抑癌灵对小鼠S180实体瘤有明显的抑制作用;3剂量组抑制率分别为15%,35%和54%.病理检查结果显示实验组与对照组相比,组织坏死范围、淋巴细胞和中性白细胞浸润数量及血管反应数量明显增多.血清药理学实验结果表明,灌服抑癌灵的含药血清对MGC-803胃癌细胞株生长有明显抑制作用,与阴性对照组相比有显著差异(P＜0.01).结论:抑癌灵对小鼠S180肉瘤有抑瘤作用,其抑瘤作用可能是通过淋巴细胞浸润和抑制血管生成来实现;灌服抑癌灵含药血清对MGC-803胃癌细胞株生长有抑制作用.     

蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用的形态学观察

目的 :探讨蛴螬提取物体外对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡的形态学观察。方法 :通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜技术及吖啶橙 (AO) /溴化乙锭 (EB)荧光染色方法和免疫细胞化学技术检测蛴螬提取物对MGC 80 3胃癌细胞诱导凋亡作用的方式。结果 :(1)光镜及电镜观察结果表明 ,蛴螬 (终浓度为 4mg/ml)作用于MGC 80 3胃癌细胞 2 4h后 ,可见胞核固缩、胞核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化 ;(2 )经AO/EB荧光染色观察结果表明 ,当终浓度为 4mg/ml的蛴螬作用于MGC 80 3细胞 2 4h后 ,其凋亡率和破膜率与自然凋亡率和破膜率相比均有显著性差异 ,其凋亡率为 86 3% (P <0 0 0 1) ,破膜率为 4 1 9% (P <0 0 0 1)。说明蛴螬提取物确实有诱导MGC 80 3细胞凋亡的作用 ,同时也有细胞毒作用 ,但以诱导细胞凋亡为主。 (3)应用免疫细胞化学技术(S P法 )检测用药前后ki 6 7抗原的表达改变 ,探讨蛴螬提取物在体外对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖作用。结论 :蛴螬提取物在体外对人MGC 80 3胃癌细胞株有显著抗增殖及诱导凋亡作用。     

Livin及Caspase-3在骨肉瘤中的表达

目的探讨Livin及Caspase-3在骨肉瘤中的表达及两者之间的关系。方法应用免疫组化方法检测Livin及Caspase-3在45例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中的表达,并分析其与各项临床病理指标之间的关系。结果Livin在骨肉瘤组织中阳性表达率为62．2％,而在骨软骨瘤中不表达,两者比较有显著性差异（P〈0．01）,Livin在骨肉瘤组织中的表达与分化程度、转移有关（P〈0．05,P〈0．01）;Caspase-3在骨肉瘤及骨软骨瘤中阳性率分别为48．9％和80％,两者比较也有显著性差异（P〈0．05）;Livin与Caspase-3之间呈负相关。结论Livin的高表达可能与骨肉瘤的发生、发展及转移有关。Caspase-3在骨肉瘤中的表达下降,它与Livin一起参与了骨肉瘤的发病。     

参松养心胶囊对窦性心动过缓疗效及心脏自主神经功能的影响

目的:探讨参松养心胶囊(人参、麦冬、五味子、桑寄生等)对窦性心动过缓疗效及心脏自主神经功能的影响.方法:入选40例动态心电图长期、反复检查均为窦性心动过缓的患者,采用随机、双盲、自身前后交叉对照原则,分为治疗组和对照组.在原发疾病治疗的基础上,治疗组口服参松养心胶囊,对照组口服安慰剂,4周后均停止口服药物2周,再交叉口服安慰剂和参松养心胶囊4周.观察参松养心胶囊治疗前后的症状、心率及心律变异性.结果:治疗4周后治疗组窦性心动过缓症状改善、心率升高,而且SDNN、SDANN、SDANNindex、RMSSD、PNN50及HF值降低,LF及LF/HF值升高,较治疗前或对照组比较有显著性差异.结论:严重窦性心动过缓患者可能存在交感、迷走神经平衡破坏,参松养心胶囊可以通过抑制迷走神经张力和相对提高交感神经张力来恢复植物神经系统的平衡,提高窦性心动过缓患者的心率并改善症状.     

γ-干扰素对MGC-803胃癌细胞株诱导凋亡作用及其机制研究

目的　研究干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用,并 探讨其诱导凋亡作用的机制。方法　应用MTT法检测IFN对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖作用的影响及细 胞毒活性;通过MTT染色法、HE染色、扫描电镜观察凋亡细胞的形态学改变;应用(TdT-mediateddUTPnick endlabeling)TUNEL法定量检测IFN γ诱导凋亡的情况;通过免疫细胞化学法测定P53、P16、C-myc、Bcl-2、Bax 的阳性表达率。结果　IFN-γ在1250～10000u/ml范围内对MGC-803胃癌细胞均有抑制作用(P<0.05), MTT染色法观察:正常肿瘤细胞着色均匀,凋亡细胞缩小成深蓝色,死亡细胞空泡样,不着色。扫描电镜及 TUNEL法均观察到实验组细胞体积变小,可见凋亡小体突出于肿瘤细胞表面。凋亡率随作用时间和浓度增加而 升高,实验组P53、P16、C-myc蛋白表达没有明显变化(P>0.05),Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上调,与对 照组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论　IFN-γ可抑制MGC-803胃癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。其 作用机制可能是与通过上调肿瘤细胞Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达有关。     

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。     

小白菊内酯对人肺癌A-549细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用

[目的]探讨小白菊内酯(Par)对人肺癌A-549细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用及其机制.[方法]应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜、吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染色荧光显微镜观察Par作用前后人肺癌A-549细胞的形态学变化;应用流式细胞术(FCM)检测Par作用之后肿瘤细胞周期分布及诱导凋亡的情况;应用免疫细胞化学技术检测Par作用前后蛋白阳性表达变化情况,并观察Par对人肺癌A-549细胞株抑制增殖及诱导凋亡的作用机制.[结果]倒置显微镜观察结果显示,实验组细胞体积缩小、变圆,核染色质聚集成团,细胞之间的连接疏松,贴壁不牢,易脱落.HE染色光学显微镜观察结果显示,实验组细胞体积变小,数目减少,可见部分细胞核固缩碎裂,部分细胞凋亡.AO/EB双染色荧光显微镜观察结果显示,对照组细胞呈绿色荧光,而实验组中早期凋亡细胞呈黄绿色荧光,随着Par作用时间延长,可见呈橘红色荧光的晚期凋亡细胞及坏死细胞.流式细胞术检测结果显示,G0/G1期细胞数量减少,而S期和G2/M期细胞数量明显增多(P<0.05).免疫细胞化学技术检测结果显示,实验组细胞Bcl-2,Ki-67,Livin,Survivin及核转录因子kappa B(NF-κB)表达明显降低(P<0.05).[结论]Par对人肺癌A-549细胞有明显的抑制增殖作用,其机制可能与细胞周期发生S期和G2/M期阻滞有关.Par作用于人肺癌A-549细胞株后,可诱导细胞凋亡,其机制是通过死亡受体通路及线粒体通路来完成的,NF-κB可能参与Par诱导人肺癌A-549细胞凋亡的作用.