人正常食管上皮细胞的体外培养

近年来正常食管上皮细胞恶性转化导致食管癌发生逐渐引起人们重视,体外正常食管上皮细胞的原代及传代培养成为研究正常食管上皮细胞增殖、分化及恶性转化的必要条件.国内关于人正常食管上皮细胞体外培养的研究罕见.我们参考国外学者的研究[1],成功建立了人正常食管上皮细胞原代和传代培养的方法,获得了一些经验和体会,总结如下.     

烟雾吸入性肺损伤后吸入一氧化氮对早期中性粒细胞活性氧的影响

目的 研究大鼠烟雾吸入性肺损伤后吸入20 ppm的一氧化氮(NO)对中性粒细胞(PMN)活性氧的影响.方法 72只雄性Wistar大鼠,体重为250～350g,随机分入Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ组,每组各24只.各组再按伤后6、12及24小时3个时相点均分为3组.另取8只大鼠以同样方法致烟雾性损伤,测定伤后1小时伤后值.再取另外8只非致伤大鼠测定伤前值.除了伤前值组大鼠外,其余各组均复制成重度烟雾吸入性损伤模型.Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ3组分别于致伤后2小时开始应用动物呼吸机进行定容机械通气,Ⅰ组吸入空气,Ⅱ组吸入氧气(FiO2=0.4),Ⅲ组除吸氧外(FiO2=0.4)再吸入20ppm NO.处死大鼠后制备肺组织匀浆.用试剂盒测定肺组织活性氧水平(ROS)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量.数据均采用SPSS10.0统计软件包进行完全随机设计方差分析,结果用(x)±s表示.结果 伤后肺组织匀浆ROS含量均升高.伤后6小时及12小时时,3组之间无显著性差异(P＜0.05).至24小时,Ⅱ组较Ⅰ组降低(P＜0.05),Ⅲ组较Ⅰ组降低更为明显(P＜0.01),Ⅲ组亦低于Ⅱ组(P＜0.05).TNF-α含量伤后明显升高,伤后12小时及24小时,Ⅲ组均低于Ⅱ组(P＜0.05).ROS与TNF-α含量正相关性明显(r=0.442,P＜0.01).结论 吸入浓度为20 ppm的NO能抑制烟雾吸入性损伤大鼠的PMN产生ROS.     

一种壳聚糖神经组织工程支架的制备及表征

目的:用自行研制的模具制备一种具有轴向排列多通道壳聚糖神经修复导管.方法:实验于2004-05/09在清华大学生物系生物材料与组织工程实验室完成.首先制备多孔或致密的壳聚糖空管,管内径为2～5 mm,壁厚0.2～1.0 mm.将一组不锈钢针平行贯穿于壳聚糖空管,用钢针固定片固定不锈钢针,然后在此壳聚糖空管中注入壳聚糖溶液,最后用冷冻干燥法成型.然后,对所得到的支架进行理化性能表征,评价多通道壳聚糖导管的溶胀性、体外降解情况,并用瑞氏染色与扫描电镜用来观察N2a细胞(Neuroblastoma cells, mouse)在导管内生长情况.结果:①在0.1 mol/L磷酸盐缓冲液中溶胀后,多通道壳聚糖导管的内径无显著性变化(P > 0.01),管壁厚度增大明显(P < 0.01).②导管在溶菌酶溶液中降解8周后,形态结构无明显变化,而且保持了足够的机械强度和韧性.③瑞氏染色显示N2a细胞核染成深蓝色,铺展在通道表面及成团分布在导管内基质之中.扫描电镜观察可清晰地显示出细胞的形态及在导管中的分布情况.结论:实验制备的多通道壳聚糖导管具有合适的溶胀性、机械强度以及神经细胞亲和性,有潜在的研究与应用价值.     

蒙药达如奇颗粒“祛黏疫调理体素”治疗作用与调节巨噬细胞分泌炎性因子的实验研究

目的:探讨蒙药达如奇颗粒祛黏疫、调理体素的治疗机理与调节巨噬细胞分泌炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α作用的相关性。方法:①50只BALB/C小鼠随机分为正常对照组,模型组,达如奇颗粒预防、低剂量、高剂量组,每组各10只。除正常对照组外,其余各组腹腔注射大肠杆菌菌液复制蒙医"黏疫"增盛热症模型。预防组于造模前48h开始灌胃每日1次;低、高剂量组分别于造模后2h灌胃达如奇颗粒混悬液0.60g/kg和1.20g/kg每日1次,连续3次。于末次灌胃2h后处死小鼠,抽取腹腔洗液,2000 r/m in,离心5m in。用ELISA法检测各组腹腔液中IL-1,IL-6及TNF-a的含量。②将上述腹腔液离心获得的腹腔单核-巨噬细胞培养36h,离心取上清液,检测IL-l、IL-6、TNF-α含量。结果:正常对照组与模型组比较,腹腔液和单核-巨噬细胞培养液中IL-1、IL-6、TNF-α的含量均有显著性差异(P<0.05);达如奇颗粒预防、低、高剂量组与模型组比较,腹腔液IL-1、TNF-α的含量明显降低(P<0.05);达如奇颗粒预防组、高剂量组与低剂量组比较,腹腔液IL-1的含量明显降低(P<0.05);达如奇颗粒预防、低、高剂量组与模型组比较,单核-巨噬细胞培养液中IL-6的含量明显降低(P<0.05)。结论:达如奇颗粒祛黏疫、调节体素的治疗作用与抑制炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α的分泌有关,而且达如奇颗粒有很好的预防作用。     

重建胃底血供预防胃食管颈部吻合口瘘

１９９２－１０～１９９８－１０,我们采用保留胃网膜左血管及胃短血管,通过脾门血管弓的连接与胃网膜右血管构成完整的血管弧,使胃的远端及胃底（吻合部位）获得良好的血液供应,行食管癌根治胃食管或下咽腔吻合８６例,未发生吻合口瘘。现报告如下。１临床资料：本...     

小儿严重胸外伤合并呼吸衰竭气管切开的经验

自１９９１－０６～１９９８－０６,共气管插管治疗小儿严重胸外伤合并呼吸衰竭（ＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＦａｉｌｕｒｅ,ＲＦ）３３例,其中气管切开１２例,占３６－３６％。对小儿胸外伤合并ＲＦ后气管切开的指征及处理进行探讨。１　临床资料１２例气管切开者,男９例,女３例。年龄２～１４岁,平均８－２岁。交通事故伤７例,坠落伤２例,挤压伤２例,牲畜致伤１例,分别占５８－３３％、１６－６７％、１６－７％和８－３３％。单侧胸外伤１１例,双侧胸外伤１例。合并多发肋骨骨折６例,连枷胸２例,单根肋骨骨折２例,无肋骨骨折…     

精心构建行风建设长效机制全力打造患者满意的和谐医院

良好的卫生行风是维护和实现广大人民群众生存和健康这一根本利益的保障，是一个地区经济建设软环境的重要内容。新形势下，如何进一步加强医院行风建设工作，把深化行风建设作为增强医院核心竞争力的重要举措，着力从教育培训、制度建设、管理监督、考核惩处等重点环节入手，积极构建行风长效机制，全力打造患者满意的和谐医院，不仅成为医院适应市场竞争求生存求发展的需要，也成为医院全面落实科学发展观，建设小康社会，发展社会主义文明的需要。     

辅助皮瓣法关闭下腹部供瓣区的临床应用体会

目的：总结直接关闭下腹部供瓣区的方法和体会。方法：25例病人手或前臂有软组织缺损创面，采用下腹部皮瓣转移的方法进行修复，同时设计邻接的辅助皮瓣参与下腹部皮瓣的关闭。结果：下腹部皮瓣和辅助皮瓣的供区直接缝合关闭，早期有不同程度的肚脐偏位，后期逐渐恢复。结论：辅助皮瓣法能较好地关闭一定面积的下腹部皮瓣供区，具有良好的整形美容效果。