二硫键稳定的抗肝癌人源化单链抗体—突变体人TNFα融合基因在CHO（dhfr^—）细胞中的表达

目的：提高抗肝癌靶向人肿瘤坏死因子（hScFv25-hTNFα)的稳定性和杀伤活性,构建二硫键稳定的抗肝癌人源化单链抗体－突变体人TNFα融合基因（ds-ScFv-hTNFα）,并在CHO细胞中表达。方法：常规构建ds-ScFv-hTNFα融合基因,并克隆入真核表达载体pCI(dhfrl）,磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠卵巢细胞株（CHO－dhfr^-）,甲氨蝶呤（MTX）高压筛选高表达细胞株,免疫荧光染色和MTT法检测重组蛋白的抗体和突变体hTNFα的双重活性。结果：目的基因在CHO（dhfr^－）中获得了表达,表达产物具有抗体和突变体hTNFα的双重活性,且稳定性得到大幅度提高,达到4℃放置4个月活性无明显下降。结论：抗肝癌人源化ds-ScFv-hTNFα融合基因在CHO细胞中获得功能性表达,为进一步的临床应用研究奠定了基础。     

复方磷酸萘酚喹及其组分单药治疗恶性疟的临床研究

为了对比观察复方萘酚喹(Co NQ)与组分单药磷酸萘酚喹(NQ)和青蒿素(QHS)对恶性疟的疗效和安全性,本研究用Co -NQ (总量含NQ 4 0 0mg及QHS10 0mg)、NQ (总量10 0 0mg)和QHS (总量2 5 0 0mg)分别治疗恶性疟患者30例。所有患者住院7天,随访2 8天,观察疗效和安全性。结果显示Co NQ、NQ和QHS 3组的平均退热时间分别为2 0 1±11 .8h、2 4 . 4±16. 1h和18 .0±9. 3h ;平均原虫转阴时间分别为30 . 1±5 . 7h、4 4 7±9 .2h和2 8 .9±5 . 6h ;2 8天治愈率分别为10 0 %、10 0 %和6 3 .3%。提示复方萘酚喹治疗恶性疟具有良好的临床效果。     

甲基汞对发光菌的毒性及锌的拮抗作用

目的：研究甲基汞（MeHg）对明亮发光杆菌的毒性作用及锌（Zn）对MeHg毒性的拮抗作用。 方法：采用发光菌毒性试验法检测MeHg、Zn对发光杆菌的相对发光率的影响。结果：MeHg、Zn单独作用时半数致死浓度（EC₅₀）分别为为0.00248和0.28 mg•L^-1。随着MeHg剂量加大,发光菌相对发光率均降低,并呈剂量依赖性。MeHg、Zn联合作用15和30 min后,呈拮抗作用。 结论：Zn可以抑制MeHg对发光杆菌发光率的影响,拮抗甲基汞的毒性。     

参茸龟芪口服液的毒理学安全性评价

目的：了解参茸龟芪口服液的安全性。方法：小鼠急性经口毒性试验;Ames试验;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验;雄性小鼠精子畸形试验和大鼠30d喂养试验。结果：该口服液急性经口毒性为无毒,3项遗传毒性试验均为阴性结果,30d喂养实验中也无异常发现。结论：参茸龟芪口服液安全无毒。     

甲基汞、电离辐射对小鼠胸腺DNA合成及适应性反应的影响

为了解环境理化因子作用对机体产生的生物效应,采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究了甲基汞和不同剂量的电离辐射对小鼠胸腺ＤＮＡ合成及适应性反应的影响。结果表明：甲基汞可以抑制胸腺细胞ＤＮＡ合成;低剂量的电离辐射（０．０７５Ｇｙ）对胸腺ＤＮＡ合成具有一定刺激作用,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量明显高于对照组;而高剂量的电离辐射（２Ｇｙ）对胸腺细胞ＤＮＡ合成有抑制作用;经低剂量电离辐射预处理后再进行甲基汞染毒时比单独用甲     

ZnMT对甲基汞致小鼠肝细胞DNA损伤的拮抗研究

目的 研究锌金属硫蛋白（ZnMT)对甲基汞致小鼠肝细胞DNA损伤的影响。方法 采用单细胞凝胶电脉（single cell gel electrophoresis,SCGE)技术检测锌诱导机体产生ZnMT及体外给予纯品ZnMT对甲基汞致小鼠肝细胞DNA损伤的影响。结果 体内给予小鼠5mg/kg的锌剂及在培养基中加入终浓度为0.01umol/L的纯品ZnMT均可以减轻甲基汞对小鼠细胞DNA损伤程度,且损伤程度越轻,拮抗作用越明显。结论 ZnMT可以拮抗甲基汞引起小鼠肝细胞DNA的损伤。     

环状RNA在泌尿系恶性肿瘤中的研究进展

环状RNA(circularRNA, circRNA)代表一大类存在于广泛的真核细胞质中的非编码RNA,作为miRNA的分子海绵来调控基因的转录过程。尽管circRNA在泌尿系疾病中的研究还处于初步阶段,但近来研究表明其在泌尿系肿瘤的发生、发展和治疗中发挥着重要作用,有望成为潜在的新型分子标志物和分子靶向治疗的靶点。     

人CD20胞外区与噬菌体pⅢ融合基因在E．coil中的可溶性表达

目的：克隆人CD20胞外区基因(cdw)和丝状噬茵体(M13KD7)G3蛋白N端结构域(pⅢN1)基因，并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法：利用逆转录PCR和PCR方法分别克隆CD20胞外区基因和pⅢN1基因，然后将二者融合克隆入pTIG-Trx表达载体，在大肠杆菌中进行可溶性表达。结果：可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的约25％，表达产物可被抗CD20分子的单克隆抗体识别。结论：成功地表达并鉴定了人CD20胞外区蛋白，为利用噬菌体抗体库进行抗CD20抗体的筛选奠定了基础。     

小鼠全血和睾丸中甲基汞含量相关性分析

本文报告采用气相色谱法对经不同剂量甲基汞染毒的小鼠睾丸甲基汞含量进行了测定。结果发现:甲基汞可在睾丸内蓄积,其蓄积量与给药剂量呈明显正相关关系(r=O.99,p<0.01)。同时又测定了作为体内汞负荷指标的血汞含量,并通过对血汞含量与睾丸汞含量的相关性分析,发现两者之间也存在着明显的相关关系(r=0.86,p<0.01),这种关系为从血汞含量间接推测睾丸内含量提供了可能性。     

新型pⅨ噬菌体展示系统的建立及初步评价

目的:构建新型噬菌体展示载体,评价其展示效果,为构建scFv库寻找新的展示体系。方法:PCR分离、扩增M13KO7中pⅨ蛋白编码基因,克隆入噬菌体展示载体PHB-gⅢ,替换原载体中的gⅢ-CT段,构建载体PHB-pⅨ,并将相对分子质量约50×103的碱性磷酸酶的编码基因分别克隆入两展示载体,观察其展示碱性磷酸酶能力的差别。结果与结论:成功构建了展示载体PHB-pⅨ,该载体具有与PHB-gⅢ相当的展示碱性磷酸酶的能力,且相同滴度的PHB-gⅢ噬菌体DNA含量略高于PHB-pⅨ噬菌体DNA含量,提示PHB-gⅢ系统展示外源蛋白时存在感染能力下降。PHB-pⅨ系统具有用于展示噬菌体抗体库的良好应用前景。