氯化镉处理人肝癌SMMC-7721细胞株某些生化指标的变化

目的 观察氯化镉(CdCl2)处理人肝癌SMMC-7721细胞株某些生化指标的变化.方法 利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;利用生化法检测CdCl2处理人肝癌SMMC-7721细胞株丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力.结果 不同浓度的氯化镉作用12、24和48 h,随着给予CdCl2剂量的增加,细胞存活率显著下降.随着给药时间的延长.对细胞抑制作用增强,存在着剂量-效应关系、时间-效应关系;给予细胞10～40μmol/l CdCl2作用24 h,随着给镉剂量增加,细胞的MDA含量增加,SOD和GSH-px的活力下降.结论 CdCl2可致人肝癌SMMC-7721细胞株存活率下降和某些氧化和抗氧化生化指标改变有关.     

蓬子菜中活性成分DXG在大鼠体内的药物动力学研究

目的:研究蓬子菜活性成分DXG在大鼠体内的药物动力学。方法:采用HPLC法测定大鼠血浆中药物浓度,利用3P97药动学软件处理数据。结果:大鼠静脉注射不同剂量DXG后,DXG的血药浓度-时间变化符合二室模型,分布半衰期分别为3.57,3.70,3.48min(RSD2.51%),消除半衰期分别为34.10,37.99,32.98min(RSD6.13%);AUC值分别为53.62,107.74,242.27mg/min/L。结论:不同剂量DXG静脉注射后,在大鼠体内的药物动力学符合二室模型,且在给药剂量内呈线性药动学特征。     

五味子油对2型糖尿病大鼠胰岛B细胞凋亡的影响

目的：研究五味子油对2型糖尿病大鼠胰岛B细胞的保护作用,探讨其降血糖作用及机制。方法：Wistar　雄性大鼠,高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg.kg^-1）间隔2次注射建立2型糖尿病大鼠模型,将模型成功大鼠随机分为糖尿病模型组（DM）和五味子油治疗组（DM+SCO）,另设正常对照组（CON）和正常五味子油组（CON+SCO）。药物干预6周后,检测各组动物血清空腹血糖（FBG）、空腹血清胰岛素（FINS）水平;大鼠血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性;采用RT-PCR法检测大鼠胰腺组织B
cl-2、Bax 和Caspase 3 mRNA表达水平。结果：与模型组比较,五味子油治疗组大鼠FBG水平明显下（P<0.05）,FINS水平明显升高（P<0.05）;五味子油治疗组大鼠血清MDA含量下降（P<0.05）,SOD及CAT活性升高（P<0.05）;五味子油治疗组大鼠胰腺组织Bcl-2 mRNA表达水平升高,Caspase 3 mRNA表达水平下降（P<0.05）,Bax表达无明显变化,但Bax/bcl-2比值降低。与正常对照组比较,正常五味子油组大鼠上述指标未出现明显改变。结论：五味子油可通过降低脂质过氧化反应副产物,增强抗氧化物酶活力,调节凋亡相关基因,促进血清胰岛素分泌,从而降低血糖。     

二硫键稳定的抗肝癌人源化scFv-hTNFα突变体融合基因在大肠杆菌中表达

目的　提高抗肝癌抗体靶向人肿瘤坏死因子(hscFv2 5-hTNFα)的稳定性和杀伤活性 ,并探讨该新型靶向细胞因子在大肠杆菌中的可溶性表达。方法　以引物PCR法和重叠延伸PCR法 ,对人源化抗肝癌hscFv2 5及hTNFα基因进行定点突变 ,构建重组表达载体 pGEX -hFvT ,并以IPTG在大肠杆菌中诱导表达。用免疫组化染色和MTT比色法 ,分别检测重组蛋白的抗体和hTNFα突变体的双重活性。结果　重组基因在大肠杆菌中获得高效可溶性表达。表达产物具有抗体和hTNFα突变体的双重活性 ,重组蛋白的稳定性得到大幅度提高 ,抗体活性于 4℃放置 3个月活性无明显下降 ,抗肿瘤活性较天然hTNFα高 4倍。结论　重组基因在大肠杆菌中获得了高效功能性表达 ;重组蛋白稳定性及抗肿瘤活性得到大幅度提高 ,为进一步的临床应用研究奠定了基础     

预防医学专业毒理学实验教学改革与探索

毒理学实验教学是预防医学专业毒理学基础课程中重要的、不可或缺的一部分。为了进一步提高首都医科大学毒理学实验教学质量和效果,从课程内容、教学手段、教学方法以及考核制度等方面讨论了毒理学实验教学改革中的初步探索与心得。旨在以学生为主体,完善课程内容,丰富教学方法,严格把关考核制度,从而培养出高素质的预防医学专业人才。     

人源化卵巢癌单链抗体基因的构建与表达

目的：通过基因工程技术获得完全人源化的卵巢癌患者自身的单链抗体并在毕氏酵母中获得表达，为人源化单链抗体(ScFv)在卵巢癌的诊断与治疗的应用提供实验基础。方法：用TRIZOL法自卵巢癌患者的淋巴细胞中提取RNA,利用SOEingPCR方法分别获得V_H、V_L基因，构建真核表达载体pPICZα/ScFv。电转化毕赤酵母菌株X-33。用PCR法筛选转染阳性克隆,SDS-PAGE法鉴定甲醇诱导的培养上清液中的ScFv的表达,筛选高表达工程菌。结果：构建ScFv基因,V_H与V_L连接后得到700 bp左右的条带，ScFv基因在毕赤酵母中获得表达，在26 000处出现目的条带。结论：获得ScFv基因及其真核表达载体以及高效表达ScFv的毕赤酵母工程菌。     

经阴道实时三维子宫输卵管超声造影耐受性及造影相关疼痛因素分析

目的探讨经阴道实时三维子宫输卵管超声造影(3D-Hy Co Sy)诊断时影响患者耐受性、相关疼痛的因素。方法选取我院妇产科行3D-Hy Co Sy检查的不孕症患者270例,记录检查时伴疼痛者与无疼痛者的比例,采用数字评分法对伴疼痛患者检查成功者与检查失败者疼痛程度进行评价;单因素及Logistic多因素分析影响3D-Hy Co Sy耐受性差及疼痛相关因素。结果 270例患者中3D-Hy Co Sy检查伴有疼痛者240例(88.89%),其中成功检查121例(50.42%);单因素及Logistic多因素分析结果显示,宫颈双侧阻塞、造影剂用量≥20 ml、球囊大小≥2 ml、紧张情绪及合并妇科炎症是导致3D-Hy Co Sy检查时耐受性差和疼痛的危险因素。结论导致3D-Hy Co Sy受检者耐受性差及疼痛的因素较多,其中宫颈双侧阻塞、造影剂用量≥20 ml、球囊大小≥2 ml、紧张情绪及合并妇科炎症对其影响较大。     

宫内暴露甲基汞对幼鼠脑发育损伤机制研究

为研究孕期暴露甲基汞对婴幼儿脑发育损伤机制,我们建立了甲基汞孕期暴露实验动物模型,采用3.0mg/kg剂量对怀孕后母鼠染毒。仔鼠出生后不同天数对仔鼠大脑、海马和小脑脑汞含量进行测定和观察,研究不同发育阶段仔鼠的大脑、海马、小脑的脑汞含量,通过分析单位重量脑汞含量得出海马中分布显著高于大脑和小脑中的结论;采用TUNEL法检测脑神经细胞凋亡,观察脑神经细胞凋亡状况;采用流式细胞术对不同发育阶段仔鼠三个那脑区进行比较探讨细胞周期改变规律。     

大黄对合并呼吸衰竭重症胰腺炎的治疗作用及对IL-6、CRP的影响

目的：观察大黄对合并呼吸衰竭重症胰腺炎（SAP）患者的治疗作用及对IL-6、CRP的影响。方法：将56例入住ICU伴呼吸衰竭的SAP患者分为大黄治疗组和对照组,观察2组患者氧合指数变化、机械通气天数、胃肠功能障碍持续时间、体温恢复时间及CRP、IL-6的变化。结果：2组患者第1、3天的血清CRP、IL-6水平相比无统计学差异（P〉0.05）;第5天血清CRP、IL-6水平大黄治疗组低于对照组（P〈0.05）,第7天,2组比较有统计学差异（P〈0.01）。第1、3、5、7天PaO2/FiO2大黄治疗组高于对照组,2组相比有统计学差异（P〈0.05）。大黄治疗组胃肠功能恢复所需时间与对照组比较,有统计学差异（P〈0.01）;体温恢复时间大黄组与对照组相比,有统计学差异（P〈0.05）;机械通气时间大黄治疗组与对照组比较有统计学差异（P〈0.01）。结论：大黄可有效改善胃肠功能障碍并减弱炎症反应,抑制炎症因子释放,并能加速肺损伤的恢复,减少机械通气时间。