霍乱毒素粘膜免疫佐剂的研究进展

霍乱毒素(CT)具有很强的粘膜免疫佐剂活性，是当今研究得最多且最深入的粘膜佐剂之一，但CT的粘膜免疫佐剂效应机理尚未完全弄清。本文主要就CT的粘膜免疫佐剂作用及效应机制进行综述，为粘膜疫苗的研制打下一定基础。     

构建"以学生为主体"的本科医学免疫学实验教学模式

21世纪高等医学教育的任务是培养具有深厚的基础理论知识、扎实的实践操作技能、积极的创新思维能力的综合人才。实验教学作为高等医学教育的重要组成部分,作为理论联系实际的桥梁,在培养医学生综合素质和创新能力方面有着重要的作用。     

白细胞介素31在E.coli中的表达及活性鉴定

目的构建人IL-31原核表达载体，在大肠杆菌中表达，研究人IL-31对人表皮角化细胞分泌趋化因子MIP-3β的活性影响。方法大量培养pET28a（＋）-hIL-31工程菌株，提取质粒，BamHI、HindⅢ双酶切，并将其连接到原核表达载体pET32a（＋），通过IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中表达。用RT-PCR检测该目的蛋白对人表皮角化细胞HaCaT表达趋化因子MIP-3β的影响。结果原核表达质粒pET32a（＋）-hIL-31构建正确，经双酶切、PCR和序列测定鉴定，序列正确，IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中大量表达，纯化后的目的蛋白可刺激人表皮角化细胞表达MIP-3β。结论原核表达质粒pET32a（＋）-hIL-31构建正确，纯化后的蛋白具有生物学活性，可刺激人表皮角化细胞表达趋化因子MIP-3β，为研究人IL-31的作用及其作用机制和制备单克隆抗体奠定了基础。     

结肠癌患者血清中IL-12和sIL-2R的表达及意义

本文测定了结肠癌患者手术前后血清白细胞介素一12（IL－12）和可溶性白细胞介素-2受体（SIL－2R）的表达水平。结果表明，结肠癌患者术前和术后血清见IL-12表达低于正常对照组，sIL－2R表达明显高于正常对照组。术前和术后血清IL－12及sIL－2R表达无显著性差异。初步研究提示，对结肠癌患者采用免疫治疗，以IL－12较IL－2更为合适。     

空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫性鉴定

目的:克隆空肠弯曲菌peb1A基因,构建其原核表达载体;鉴定重组表达产物的免疫原性。方法:PCR扩增空肠弯曲菌peb1A基因,构建pET-28a(+)-peb1A表达载体。转化E.coliBL21(DE3)后诱导表达,用SDS-PAGE鉴定表达产物。采用Ni-NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白PEB1。采用CJ全菌抗体的Western blot鉴定rPEB1免疫反应性,双向免疫扩散试验鉴定rPEB1免疫家兔的抗血清效价。结果:所克隆的基因与报道的核苷酸序列同源性为99.9%,转化E.coliBL21(DE3)后,表达产物最高表达量占全菌总蛋白的33%左右,纯化后获得纯度为96%的重组蛋白。Western blot证实rPEB1能与CJ全菌抗体发生特异性免疫结合反应。兔抗rPEB1血清的双向免疫扩散效价为1:16。结论:成功地构建了高效表达载体pET-28a(+)-peb1A,并获得rPEB1,所表达的rPEB1具有良好的免疫原性和免疫反应性,为基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

伤寒患者血清可溶性白细胞介素2受体的检测

伤寒是一种由伤寒沙门氏菌引起的消化道传染疾病，其主要致病因素为内毒素（ＬＰＳ），ＬＰＳ能促进Ｔ、Ｂ细胞成熟，激活ＮＫ细胞、单核细胞和巨噬细胞，释放淋巴因子。淋巴细胞活化时，白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）不仅表达于细胞膜上，而且可以游离状态存在，即称...     

子宫内膜异位症患者血清中抗子宫内膜IgG抗体及CA125的测定

子宫内膜异位症 (内异症 )近年已成为一种严重影响育龄妇女生存质量的常见病。腹腔镜可早期诊断 ,但它是一种创伤性操作 ,费用高。为寻求简便、易行、无创性诊断方法 ,我们对内异症患者、正常及良性疾病对照者血清中的抗子宫内膜ＩｇＧ抗体及ＣＡ12 5值进行了测定 ,并探讨其用于临床诊断内异症的意义。一、资料和方法1.研究对象 :为 1998年 8月至 1999年 10月在我院住院经腹腔镜和开腹手术及病理检查证实为内异症的 39例患者 ,按 1985年美国生育协会修正的内异症分期法 (ＲＡＦＳ)进行分期 ,Ⅰ、Ⅱ期 8例 ,Ⅲ期 16例 ,Ⅳ期 15例 ;对照组 5 2…     

CpG基序增强DNA疫苗免疫原性研究进展

DNA疫苗广泛用于细菌、病毒性疾病以及肿瘤等的预防和治疗研究,但已报道的临床实验研究表明并未取得良好的免疫效果.未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)具有较强的免疫佐剂特性.近年来有不少学者作了关于CpG-ODN增强DNA疫苗免疫原性的研究,本文就有关研究进展作一综述.     

重组hIL-31抗体制备及其拮抗皮肤炎症的研究

目的:高效表达重组hIL-31制备IL-31抗体,探讨IL-31抗体拮抗皮肤炎症的作用,为研发IL-31抗体治疗性新药奠定基础.方法:①培养工程苗、IPTG诱导、菌体、超声破碎,用镍NTA柱纯化重组蛋白.②重组hIL-31蛋白溶液加佐剂免疫家兔,制备兔抗IL-31多克隆抗体.③将IL-31抗体分为3个剂量,经皮下注射和皮肤直接涂抹的途径,对已经致皮肤炎症的BALB/c小鼠治疗7d,治疗后3d取治疗部位皮肤作石蜡切片进行HE染色观察组织学变化,并检测血清中IL-6、IL-8、L选择素和MIP-3β等细胞因子的变化.结果:①SDS-PAGE电泳证实获得了高纯度的纯化人IL-31蛋白.②用重组hIL-31蛋白疫苗免疫家兔,在免疫后4周抗体滴度达到高峰,经ELISA法测血清抗体滴度为1:15 000～1:20 000,双扩滴度为1:16.Western blot结果重组IL-31蛋白能与抗IL-31抗体特异性结合.③小鼠皮肤组织切片HE染色显示,治疗组皮下和皮内均有炎症细胞浸润,呈现剂量依赖性趋势.④血清中炎性因子ELISA检测,涂抹组和注射组小鼠血清中IL-6、IL-8、MIP-3β均明显低于阴性对照组(P＜0.05).结论:①获得稳定表达的重组人IL-31蛋白,以此作为免疫原免疫家兔,诱导分泌高滴度的IL-31抗体.②IL-31抗体使皮肤炎症中炎性细胞减少,血清中炎症相关细胞因子明显降低.     

白血病细胞多药耐药发生机制研究进展

白血病耐药性是指白血病细胞对化疗药物的不敏感性 ,多药耐药 (Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ)是其最重要的形式之一 ,是指肿瘤细胞对结构、功能及杀伤机制迥异的多种抗癌药物同时产生耐药。目前提出的多药耐药发生机制主要包括膜糖蛋白介导的药物外排增加、