流行性出血热治疗中几个问题的探讨

近几年由于在 EHF 流行区开展了大面积的灭鼠,使 EHF 发病率明显下降,但散在病例仍时有发生。为了更好地提高 EHF 的疗效,降低病死率,现将我们在临床工作中处理的点滴经验介绍如下。     

不同表达载体对人白细胞介素-18原核表达效率的影响

目的 探讨PBV220及PJW2载体构建的rhIL—18重组质粒的IL—18表达效率。方法 将构建的PBV220／rhIL—18重组质粒中的rhIL—18酶切、克隆到表达载体PJW2中，经PCR产物电泳及测序鉴定，热诱导后在大肠杆菌中表达。结果 PJW2／rhIL—18表达的重组人IL—18占菌体总蛋白质的20％，而PBV220／IL—18重组质粒表达的重组人IL—18占菌体总蛋白质的16％。两者表达的蛋白质分子量约为18KD，与预期分子量相符。结论 PJW2载体rhIL—18表达效率高于PBV220，为下一步的纯化及提高蛋白产量打下了基础。     

脂质体佐剂疫苗研究进展

脂质体作为蛋白质及多肽抗原的佐剂和载体已被广泛应用。通过综述脂质体在细菌、病毒、寄生虫和肿瘤疫苗中的研究应用，提示脂质体在疫苗的研制中具有广阔的应用前景。     

RFC—SPA法早期快速检测流行性出血热的研究及初步临床应用

流行性出血热(EHF)。在我国已有50多年的历史,分布广,流行严重,除台湾和青海外,我国各省均有病例报告。不少病人早期症状不典型并存在多种临床特殊类型,以致常有误诊,为了早期诊断和及时治疗本病,近年来不少实验室报导了多种免疫学诊断新技术,作者等用 RFC—SPA 法(二步法)检测病人血清抗体,以早期快速诊断 EHF。1986年全国流行性出血热防治方案要求以检测 EHF 抗原抗体作为确诊的依据。近年我们又探索。直接从 EHF 病人血片中以 RFC—SPA 法的一步法检测抗原获得满意结果。本法在 EHF 病程早期就能检出抗原,取材方便,操作简便、快速,克服检测抗体不易普遍推广的缺点。具     

小剂量干扰素与清开灵联合治疗流行性出血热(HEF)的研究

流行性出血热(EHF)的临床治疗方法不断改善,在按不同病期采取对症治疗的基础上,特异性治疗已逐渐受到重视。为寻求进一步的病原治疗措施,降低病死率,我们应用小剂量人α干扰素(α—IFN)和清开灵(中药注射液)联合抗病毒疗法治疗 EHF 病人,取得了较满意的疗效。现报道如下     

空肠弯曲菌DNA疫苗构建及其疫苗免疫程序研究

目的:构建空肠弯曲菌peb1A基因真核表达载体,探讨DNA疫苗不同免疫程序的免疫效果。方法:以重组pET28a(+)-peb1A质粒为模板,将空肠弯曲菌peb1A基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转染COS-7细胞中表达,Western blot鉴定表达蛋白;昆明小鼠随机分组:设空白对照组、空载体对照组、pcDNA3.1(-)-peb1A实验组,用ELISA法检测免疫后的昆明小鼠血清IgG和IgM抗体水平。结果:重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A经双酶切和PCR鉴定,构建正确。peb1A基因测序结果与GenBank中peb1A基因序列一致。重组质粒成功转染COS-7细胞,并能正确表达重组蛋白。裸DNA组IgG水平均高于两对照组,有显著性差异(P<0.05)。同一剂量短时间(0、10、20天)免疫程序优于长时间(0、15、25、35天)免疫程序(P<0.05)。结论:成功构建空肠弯曲菌真核表达重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A,其经肌肉注射免疫小鼠,具有较好的免疫原性,短时间免疫程序免疫效果好。     

IL-17免疫调节作用的研究进展

白细胞介素(IL)-17是近年来发现的一种促炎症性细胞因子,是一种含有155个氨基酸的糖蛋白.IL-17通过与受体特异性结合发挥生物学作用,IL-17与炎症发展、免疫应答、免疫排斥等多种生物学活性有关.     

HLA—DRB1、DQB1基因多态性与流行性出血热的相关性

目的从基因水平探讨HLA—DRB1、DQB1等位基因多态性与流行性出血热的相关性,以阐述其免疫遗传学特征。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应技术检测流行性出血热患者和正常对照组各50例的HLA—DRB1、DQB1等位基因。结果流行性出血热患者与正常对照组比较,HLA—DRB1＊16等位基因分布频率明显增高（Pc=0．0106）,两组间其余HLA-DRB1、-DQB1等位基因分布频率差异无统计学意义（Pc〉0．05）。结论HLA-DRB1＊16等位基因与流行性出血热呈正相关,可能为流行性出血热易感基因之一。     

空肠弯曲菌PEB1重组蛋白的表达及单克隆抗体的制备

目的表达CJPEB1重组蛋白,制备并鉴定CJ PEB1蛋白的单克隆抗体。方法诱导培养工程菌E．co-liBL21（DE3）表达CJPEB1重组蛋白,以PEB1蛋白溶液与等体积的佐剂完全乳化作为免疫原常规免疫BALB／C小鼠,制备单克隆抗体。无菌取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2／0进行融合,建立杂交瘤细胞株。将建株的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔诱生腹水制备抗体,应用间接ELISA法和双向琼脂扩散试验检测腹水中抗体的效价,应用Western-blot和玻片凝集试验检测抗体的特异性。结果得到高纯度的CJPEB1重组蛋白,蛋白质分子量大小与预计的理论值相符。获得两株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。两株杂交瘤细胞诱生的腹水,经间接ELISA法检测,腹水中的抗体效价分别为8×10^4和5×10^4,经双向琼脂扩散试验检测效价均为1：16。通过Westem-blot鉴定,两株杂交瘤细胞分泌的抗体均与PEB1蛋白特异性地结合;其诱生的腹水与CJ菌液混合出现凝集现象,而与大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌等菌液混合均未出现凝集现象。结论成功建立了两株稳定分泌抗CJPEB1重组蛋白抗体的杂交瘤细胞株并制备了抗CJPEB1蛋白的单克隆抗体,为今后研究多种检测CJ的方法创造了条件。     

心肌致密化不全伴左束支传导阻滞1例

心肌致密化不全,又称为“海绵状心肌病”、“心肌窦状隙持续状态”,是一种罕见的先天性心室肌发育不全性的心肌病,发病率低,约为0.0045％.其是在胚胎形成过程中,心内膜心肌致密化过程异常所导致的一种先天性心肌畸变.解剖学显示受累的心腔内,可见很多特征性突起的小梁及小梁间隐窝.此病常并发心律失常、心力衰竭、血栓栓塞,致死率高,早期诊断和干预对提高预后、预防严重并发症具有重要的意义.现将本院2012年12月诊断的1例NVM报道如下,并结合文献进行总结.