基于高通量测序技术对人参花及其易混淆品鉴定研究

目的 利用高通量测序技术对人参花及其易混淆品进行鉴定,并利用ITS2测序技术验证高通量测序技术对物种鉴定的准确性。方法 对人参花掺伪样品扩增产物进行高通量测序,使用cutadapt、PEAR、PRINSEQ、Usearch、RDP classifier、SINTAX软件获得分类单元(operational taxonomic unit,OTU)序列,舍弃菌类、unclassified等非绿色植物序列;为避免假阳性情况发生,删除序列数<100条或碱基数<200 bp的OTU序列。对人参花、西洋参花、三七花的ITS2扩增产物进行测序,利用MEGA 11.0对人参花、西洋参花、三七花的ITS2、OTU、GenBank上下载的碱基序列构建邻接法系统聚类树、遗传距离、种间信息位点及对ITS2、OTU碱基序列分别进行Blast分析来验证高通量测序技术对物种鉴定的准确性。通过构建ITS2及OTU碱基序列二级结构对人参花、西洋参花、三七花进行比对分析,根据物种间二级结构的不同对物种进行鉴定。结果 高通量测序共得到54 653条有效序列,人参花、三七花、西洋参花的序列号分别为OTU1、OTU2、OTU3及对应的有效序列分别为31 325,857,442条。通过对各物种的ITS2及OTU碱基序列进行Blast检索,均支持各个物种。人参花与西洋参花、三七花种间遗传距离分别为0.010,0.033,人参花与西洋参花、三七花分别有2,7个信息位点;邻接法系统聚类树显示各个物种均独立聚为一支,其中人参花与西洋参花聚为一大支与三七花并列。人参花与西洋参花二级结构一致,但与三七花在臂Ⅳ及臂Ⅳ与臂Ⅰ之间有A、B、C 3处不同。结论 基于高通量测序技术能够准确鉴定人参花、西洋参花、三七花,对掺伪样品亦具有较强的鉴别能力,为市售人参花样品鉴定提供一定思路。     

鼻咽解毒颗粒治疗EB病毒感染者疗效观察

目的观察鼻咽解毒颗粒治疗爱泼斯坦－巴尔病毒（EB）感染者的临床疗效。方法将200例确诊为EB病毒感染者,随机分成治疗组与对照组,每组各100例。治疗组口服鼻咽解毒颗粒,对照组未服用任何药物。观察两组患者治疗后的临床疗效及肿瘤坏死因子（TNF－α）、白细胞介素－2（IL－2）水平。结果治疗组总有效率为81％;对照组为43％,两组比较有显著性差异（P〈0．01）。两组患者治疗后,治疗组TNF－α、IL－2水平与对照组比较有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）;结论鼻咽解毒颗粒可有效控制EB病毒感染,通过调节TNF-α、IL-2水平而增强肿瘤免疫功能。     

中西医结合治疗分泌性中耳炎48耳临床观察

分泌性中耳炎是耳科常见病之一。过去采用西医治疗，疗效不甚理想。自１９９８年６月至２０００年６月我科共收治分泌性中耳炎病人８９耳，其中４８耳采用中西医结合治疗取得较好的效果，现总结报告如下。1 临床资料和治疗方法8９耳病例均诊断明确，符合《耳鼻咽喉科诊断学》［１］分泌性中耳炎的诊断标准。采用双育随机分成Ａ上两组，Ａ组为中西医结合治疗组，采用置管术［２］（鼓膜切开置管术或经外耳道鼓室置管术），口服中药自拟通闭汤（柴胡１０ｇ、川芎1２ｇ、香附６ｇ、细辛５ｇ、石菖蒲８ｇ、僵蚕１０ｇ、赤芍１２ｇ、丹参1２ｇ、…     

鼻中隔矫正和下鼻甲部分切除联用治疗鼻中隔偏曲伴变应性鼻炎的疗效观察

鼻中隔偏曲是临床常见的鼻科多发病，鼻中隔黏膜下矫正术是治疗本病的常规手术方法。变应性鼻炎亦是临床常见鼻科多发病，广东的珠江三角洲地区尤其多见。对本病的治疗，传统方法多注重全身或局部用药，但由于各种因素的影响，临床上疗效不甚满意。在临床工作中，我们发现有不少鼻中隔偏曲患者伴有变应性鼻炎、单侧或双侧下鼻甲肥大。     

甲型副伤寒沙门菌spaO-ompA融合基因构建及其表达产物免疫保护作用

目的 构建甲型副伤寒沙门菌spaO-ompA融合基因及其原核表达系统,确定重组表达产物rSpaO-OmpA免疫保护作用.方法 采用柔性肽序列连接spaO与ompA基因,构建spaO-ompA人工融合基因及其原核表达系统.采用SDS-PAGE和Bio-Rad凝胶图像分析系统检测目的重组表达产物rSpaO-OmpA表达情况及其产量.采用免疫扩散法、微量肥达和Western blot法鉴定rSpaO-OmpA 抗原性和免疫反应性.采用小鼠感染模型了解rSpaO-OmpA对甲型副伤寒沙门菌致死性感染的免疫保护作用,实验中采用重组表达的SpaO( rSpaO)及OmpA(rOmpA)作为对照.结果 所构建的spaO-ompA融合基因与spaO或ompA单基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100％.所构建的原核表达系统E.coli BL21 DE3pET42a-spaO-ompA能高效表达重组融合蛋白rSpaO-OmpA.rSpaO-OmpA能与甲型副伤寒沙门菌全菌抗血清结合并产生阳性杂交信号,免疫家兔后可产生特异性抗体.100 μg或200 μgrSpaO-OmpA对甲型副伤寒沙门菌感染小鼠的免疫保护率分别为66.7％ (8/12)和83.3％ (10/12),明显高于等量rSpaO及rOmpA( P＜0.05).rSpaO-OmpA免疫小鼠血清与不同副伤寒沙门菌H抗原的凝集效价为1∶5 ～ 1∶40、与rSpaO和rOmpA及rSpaO-OmpA免疫双扩散效价为1∶1 ～1∶16.结论 人工融合重组抗原rSpaO-OmpA免疫原性和免疫保护作用较等量rSpaO或rOmpA更强.     

慢性鼻窦炎内镜术后中医证型分布的初步研究

目的通过对内窥镜鼻窦手术（functionnal endoscopic sinussurgery,FESS）术后患者不同时期进行辨证论治,探讨FESS术后中医证型分布规律,指导FESS术后中医药治疗。方法选择2006年10月～2007年3月期间在中山市中医院耳鼻喉科治疗的符合诊断标准和排除标准的80例慢性鼻窦炎患者为研究对象。在术后1周、2周、3～10周及10～12周复查时对所有患者进行辨证论治。结果术后1周以气血两虚为主 术后1～2周多表现为气滞血瘀 术后3～10周多为湿浊内困,兼有肺脾气虚 10～12周后以脾气虚弱和肺气虚寒为主。结论慢性鼻窦炎内镜术后,不同时期中医证型分布有一定的规律性。     

测定尿微量蛋白对呼吸衰竭早期肾损伤的临床研究

目的探讨尿视黄醇结合蛋白（URBP）、尿转铁蛋白（UTRf）和α1-微球蛋白（α1-MG）对呼吸衰竭早期肾损伤的诊断意义。方法用免疫透射比浊法和放射免疫法对71例呼吸衰竭患者和63例健康体检者进行URBP、UTRf、尿微量白蛋白（UmALB）和α1-MG检测。结果呼吸衰竭组URBP、UTRf、α1-MG较正常对照组显著增高（P〈0.01）,且URBP与UmALB呈正相关。结论 URBP、UTRf、Uα1-MG可作为诊断呼吸衰竭早期肾损伤的敏感指标。     

活血化痰法治疗成人慢性肥厚性喉炎44例

目的:观察活血化痰法治疗成人慢性肥厚性喉炎的临床疗效.方法:将44例成人慢性肥厚性喉炎患者均给予贝母瓜蒌散合会厌逐瘀汤加减(浙贝母、瓜萎仁、海藻、昆布、红花、毛冬青、猫爪草、白花蛇舌草、夏枯草、薏苡仁、土茯苓)治疗,水煎,1d1剂,7d为1个疗程,连续治疗4个疗程.结果:治愈5例,好转27例,无效12例,有效率占72.7％.结论:活血化痰法治疗成人慢性肥厚性喉炎临床疗效确切.     

碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体联合洛铂对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体(monoclonal antibody to basic fibroblast growth factor,bFGF mAb)联合洛铂(lobaplatin,LBP)对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法:CCK-8法检测药物对A549细胞活性的影响.Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率.激光共聚焦显微镜观察细胞核的形态.Western blotting检测细胞内凋亡相关蛋白表达.结果:CCK-8法检测结果显示,细胞培养48 h后,bFGF mAb组和LBP组的细胞增殖受到抑制,但两药联用后的增殖抑制作用明显高于单用LBP及bFGF mAb(P＜0.05).Annexin V-FITC/PI结果显示,联合组早期、晚期凋亡率分别为(27.83±1.23)％和(39.32±1.01)％,与bFGF mAb的(6.25±0.19)％、(14.54±0.25)％和LBP的(16.54±0.39)％、(21.02±0.98)％相比,明显高于单药组的抑制率(P＜0.01).激光共聚焦显微镜显示联合用药诱导的细胞核裂解率较单用bFGF mAb及LBP的细胞核裂解率明显增多.Western blotting检测结果显示联合组BAX、Caspase-3、Caspase-9、PARP表达量较药物单用组明显增加,而Bcl-2、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、cleaved-PARP表达量明显降低.结论:bFGF mAb联合LBP通过抑制Bcl-2、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、cleaved-PARP表达,上调BAX、Caspase-3、Caspase-9和PARP蛋白表达,对肺腺癌A549细胞起到抑制增殖和诱导凋亡的作用.     

甘油试验和耳蜗电图在梅尼埃病中医证型中的意义

目的 探讨甘油试验和耳蜗电图在梅尼埃病急性发作期中医证型中的意义。方法 梅尼埃患者急性发作期行甘油试验，耳蜗电图检查，按中医辨证分型(肝阳上亢型、痰湿中阻型、上气不足型、髓海不足型、寒水上泛型)入选150例，每组30例入组分析。比较甘油试验和耳蜗电图与梅尼埃病中医证型的关系。结果 在5组病例中痰湿中阻型甘油试验、耳蜗电图的阳性率最高，阳性率分别是78.3 %和60.0 %，而肝阳上亢型甘油试验和耳蜗电图分别是26.6%和20.0%，上气不足型分别是 33.3%和28.3 %，髓海不足型分别是25.0 %和20.0%，寒冰上泛型分别是53.3 %和 31.6 %，甘油试验、耳蜗电图与梅尼埃病急性发作期痰湿中阻型相关(P<0.05)。结论 在梅尼埃病急性发作期中医证型中以痰湿中阻型多见，甘油试验和耳蜗电图与梅尼埃病急性发作期痰湿中阻型相关。利用现代医学方法对梅尼埃病发病机理有了进一步认识，为梅尼埃病的中医治疗方法提供一些思路。