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目的:探讨TNF-α对胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)激活人α1(Ⅰ)胶原启动子的作用.方法:构建含不同长短α1(Ⅰ)胶原启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH1 0.27,pCOLH1 2.5;用脂质体法瞬时转染至NIH3T3细胞和人皮肤成纤维细胞中,加入IGF-1或(和)TNF-α,测定CAT活性.结果:100 ng/ml IGF-1可使转染至NIH3T3细胞的pCOLH1 0.27和pCOLH1 2.5表达的CAT活性分别增高至对照的(5.4±0.25)倍与(5.8±0.3)倍, 使转染至人皮肤成纤维细胞的这两个重组体表达的活性分别增高至对照的(4.5±0.22)倍与(4.9±0.2)倍.而TNF-α能抑制IGF-1诱导的pCOLH1 2.5活性.结论:TNF-α在转录启动水平抑制IGF-1对人α1(Ⅰ)胶原基因表达的促进作用. 相似文献
37.
改良EMSA法分析人α1(Ⅰ)胶原基因序列特异性DNA结合蛋白 总被引:2,自引:2,他引:2
目的:分析人α1(Ⅰ)胶原基因5‘侧翼区具有较高启动调控活性序列的DNA结合蛋白。方法:以原代培养人瘢痕皮肤成纤维细胞为胶原产生细胞,采用限制性内切酶消化,DNA混合片段末端标记和增强化学发光的改良电泳迁移率改变实验(EMSA)分析人α1(Ⅰ)胶原基因-268 ̄+42bp序列的DNA结合蛋白,其结合活性具有特异性,并能被sp-1,NF-1,NF-kB识别序列中存在α1(Ⅰ)胶原基因-268 ̄+42 相似文献
38.
人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性研究 总被引:10,自引:6,他引:10
目的:探索器官纤维化形成中调控Ⅰ型胶原基因高水平转录的启动片段。方法:从人α1(Ⅰ)胶原基因转录起始点上游-2.5kb ̄+42bp的片段中,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成6个重组体,脂质体法转染上述重组体至正常人原代培养皮肤成纤维细胞。CAT-ELISA测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性。结果:-2483 ̄+42bp,-268 ̄+42bp 相似文献
39.
苦参碱抑制血小板衍生生长因子诱导的小鼠皮肤成纤维细胞增殖 总被引:28,自引:0,他引:28
目的:探讨苦参碱对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法:取新生ICR小鼠皮肤细胞培养成纤维细胞。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞计数法分析细胞增殖情况。结果:50 ̄250μg/ml的苦参碱能剂量依赖地降低血清刺激的细胞增殖,撤除苦参碱后抑制作用能完全逆转。苦参碱(100 ̄500μg/ml)亦能剂量依赖地抑制PDGF-BB诱导的细胞增殖。结论:苦参碱显示了 相似文献
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羊成骨蛋白对L929纤维母细胞DNA合成和细胞分裂作用的观察 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报告羊成骨蛋白(sBMP)对L929纤维母细胞培养的DNA合成和细胞分裂作用结果。所加sBMP浓度为1~10μg/ml时,L929纤维母细胞培养72小时后,细胞计数明显高于对照组,可达对照组的1.5~1.8倍,其细胞DNA合成过程中~3H胸腺嘧啶摄入量显著增加,可为对照组的145~164%。sBMP浓度5μg/ml和10μg/ml组中,细胞连续培养10天,未见其形态发生异常变化。实验结果表明sBMP对纤维母细胞DNA的合成和细胞的有丝分裂有显著的促进作用,但无促分化的作用。 相似文献