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11.
12.
寻常型天疱疮自身抗原Dsg3片段的重组表达和特异性细胞反应 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨寻常型天疱疮自身抗原Dsg3在特异性T细胞反应中的作用 ,为自身免疫性疾病机制的研究提供依据。方法 :根据Genbank中的Dsg3序列分析 ,采用RT PCR法克隆自身抗原Dsg3E1,E2 ,E3,E4,E5多肽片段的cDNA ,定向插入表达载体PGEX 2T ,导入大肠杆菌JM10 9中表达重组融合蛋白并经GST层析柱纯化 ;进一步与PV患者及疾病对照组、正常对照组T细胞混合培养 ,观察T细胞增殖反应。结果 :Dsg3E1,E2和E4,E5可刺激PV患者T细胞反应 ,而不与疾病对照组、正常对照组反应。结论 :Dsg3E1,E2和E4,E5中包含T B细胞作用相关的抗原表位 ,在PV发病中起重要作用。 相似文献
13.
T细胞表面6种细胞表型的变化与大肠癌分期及术式的关系 总被引:8,自引:0,他引:8
应用流式细胞仪检测39例大肠癌患者手术前后T细胞表面6种细胞表型,发现随着Dukes分期的增高,术前CD3、CD4、CD4/CD8、CD16、CD69及CD3+/HLA-DR+逐渐下降,CD8逐渐增高(P<0.05);A期大肠癌患者机体免疫功能活跃,术前CD3、CD4高于对照组(P<0.05),CD8、CD4/CD8、CD16、CD3+/HLA-DR+与对照组相同;根治及姑息性切除术后,CD8降低,CD3、CD4、CD4/CD8、CD16、CD69、CD3+/HLA-DR+升高(P<0.05);肿瘤未切组术后CD3、CD16、CD4/CD8进一步下降(P<0.05)。提示大肠癌患者术前免疫状态与疾病的程度呈负相关,切除肿瘤有益于改善患者细胞免疫功能。 相似文献
14.
15.
将人白细胞介素2(hIL-2)cDNA克隆到逆转录病毒载体MNSM的PL位点 ,分别构建了转录受SV40早期启动子和人甲胎蛋白增强子调控的重组逆转录病毒载体MNSI和MNSIA。用脂质体转染法将MNSI和MNSIA分别转导PA317包装细胞,测质粒转染率为(5~20)×10~(-3)克隆/μgDNA·10~6细胞,病毒感染率为(5.4~450)×10~4CFU/ml。重组病毒在4μg/ml polybrene存在条件下感染人肝癌细胞、肾癌细胞和黑色素瘤细胞,Neo~R克隆经Southernblot分析证明hIL-2cDNA转入人肿瘤细胞并整合, R NA斑点杂交及IL-2活性表达分析证明,人甲胎蛋白增强子可促进异源启动子启动hIL-2cD-NA在合成甲胎蛋白的人肝癌细胞中高效特异转录和表达。该研究对肝癌特异性免疫增强基因治疗有重要意义。 相似文献
16.
目的:探讨B细胞激活因子(BLyS) 及其受体在多发性骨髓瘤(MM)发病中的作用机制.方法:用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应 (RFQ-PCR),对19例MM患者和30名健康人血清BLyS含量、外周血单个核细胞(PBMCs) 中BLyS及其受体mRNA 含量进行检测;并比较MM患者血清BLyS含量与外周血BLyS及其受体基因表达水平和免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)浓度、乳酸脱氢酶(LDH)、轻链(kap、lam)的相关性.结果:MM患者血清 BLyS含量[(7.95±4.93) g/L 明显高于健康对照组[(2.70±1.09) g/L,P<0.01 ,并与LDH浓度呈正相关性(r=0.734,P<0.001);97.4% (18/19),84.2% (16/19)的MM患者PBMCs中BLyS、BCMA mRNA表达水平较正常人明显增高,并且也与LDH的含量呈正相关;而47.32% (9/19)患者TACI mRNA表达水平降低.结论:MM患者的血清BLyS蛋白浓度和PBMCs中BLyS及其受体基因表达水平有异常改变,说明BLyS及其受体可能参与MM的发病;BLyS及其受体表达水平也许可作为预后的一个指标. 相似文献
17.
流式细胞仪检测大鼠外周血T细胞亚群(微量全血法) 总被引:1,自引:0,他引:1
本实验利用MRC W/OX系列单克隆抗体和流式细胞仪(Epics C型)首次建立了微量全血检测大鼠外周血T细胞亚群的方法,并报告了正常成鼠外周血T细胞亚群分布(n=60):OX-19+细胞占65.45±5.98%(SD),W3/25~+细胞占47.17±6.45%,OX-8~+细胞占24.26±6.18%。W3/25~+亚群和OX-8~+亚群比值为2.12±0.11(SEM)。部分标本流式细胞仪分析结果和荧光显微镜的结果无明显差异(P>0.05)。在抗体染色条件方面,发现当温育温度过高(30℃)时,染色阳性细胞率有明显下降(P<0.001)。实验证实,用微量全血染色不仅简便、可靠、重复性好,且用血量少。同时避免了常规Ficoll分离法时种种弊病。因此用本法可动态观察大鼠外周血T细胞亚群的变化,为进一步研究在药理、病理和免疫学实验中的细胞免疫功能变化提供了方便。 相似文献
18.
慢性乙肝患者NK,ADCC活性及其对IFN—α,IFN—γ的反应 总被引:1,自引:0,他引:1
本文用Hela细胞乳酸脱氢酶释放法测定了42例慢性乙肝病人外周血NK、ADCC活性及其对IFN-α100U/ml、500U/ml及IFN-γ500U/ml预处理4小时后的反应。结果显示,病人PBL NK,ADCC活性与正常对照有显著差别,经IFNs处理后,其NK或/和ADCC活性均有不同程度的升高反应,从而提示了IFNs在慢性肝病治疗中的重要作用。 相似文献
19.
20.
目的 进一步研究NOD小鼠T细胞应答改变机理。方法 用抗TCR抗体、ConA激活NOD小鼠胸腺细胞,分析TCR介导的信号通路的水平。结果 与Balb/c小鼠胸腺细胞相比,抗TCR抗体诱导的增殖应答较弱,与年龄及NOD胸腺CD4^ CD8^-和CD4^-CD8^ SP细胞有关;rIL-2能部分恢复对TCR抗体应答的缺乏。NOD小鼠对PMA IONO和PMA anti—TCR-mAb应答正常,但对anti-TCRmAb IONO应答缺乏。结论 与年龄有关的NOD小鼠胸腺细胞对TCR抗体应答的缺乏与T细胞激活时上游PKC信号通路的缺乏有关。 相似文献