浅谈HE染色切片着色浅的原因及改进方法

HE染色法是组织学与病理学常用的切片染色方法,HE染色切片标本是学生观察最多的一种切片标本。伊红（Eosin）,又名曙红,呈红色粉末状,易溶于水和酒精,市面上有伊红Y和伊红B两种,常用者为伊红Y。一般采用0．5％～1％的水溶液作为染色液;也可用70％～95％的酒精配成0．1％～1％的酒精伊红溶液。伊红溶液是一种酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。苏木精（Hematoxylin）,亦名苏木紫或苏木素,用于细胞核的染色。笔者最近在制作一些HE染色科研及教学切片中发现（染液和以前配方相同）,HE染色不易着色或着色不均,针对此现象,浅谈几点原因及解决方法。     

整合组织学与病理学实验的探索与体会

为推进组织学、病理学等形态学实验教学,探索通过建立形态学数码互动实验室,统一编写实验教材,组织学与病理学知识相结合等手段进行实验教学改革,进而提高了教学质量。     

胚胎发育中的环境因素分析

目的探讨胚胎发育中的环境影响因素。方法对相关文献和案例进行回顾性分析。结果环境中的物理因素、化学因素和生物因素对胚胎的发育影响明显。结论注重对环境因素的关注有助于优生优育。     

促红细胞生成素体外培养鼠胚脑皮质神经干细胞的分化

背景:促红细胞生成素最早作为生长因子被认识,近些年来其对中枢神经系统保护作用的体内研究较多。目的:观察促红细胞生成素对体外培养大鼠胚脑皮质神经干细胞凋亡及分化的影响。方法:无菌条件下取孕14dSD大鼠胚脑皮质,体外先悬浮增殖培养后贴壁诱导分化。巢蛋白免疫细胞荧光染色检测神经干细胞,以微管相关蛋白2、神经胶质原纤维酸性蛋白检测神经干细胞分化。取第3代神经干细胞向培养基中添加0.5,5,50,500U/mL的促红细胞生成素,另设不添加促红细胞生成素的对照组。应用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3检测神经干细胞凋亡,微管相关蛋白2检测神经干细胞向神经元方向的分化。结果与结论:加入≥5U/mL促红细胞生成素,神经球内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达显著下降(P<0.01),分化培养后微管相关蛋白2阳性细胞较对照组明显升高(P<0.01)。提示促红细胞生成素可降低体外培养鼠胚脑皮质神经干细胞的凋亡率,促进其神经干细胞向神经元方向分化。     

胎儿膝关节半月板的测量分析

收集了受精龄为13～38周引产的正常胎儿70例,分别对280个内外侧膝关节半月板进行了观察和测量。结果表明:280个内外侧半月板中未见盘状软骨,其形态均呈半月形.各项指标均随胎龄的增加而增加,内侧半月板侧份宽度的增长速度具有一定的连续性,而内侧半月板后份宽度、全长以及外侧半月板各项指标的生长速度则具有一定的波动性。各胎龄组半月板的侧份宽度,外侧均比内侧为宽。经回归分析,各测量项与胎龄有着明显的线性回归关系。     

计算机辅助简化识别法测定血液及胃容物中12种抗精神药物

 目的：建立快速准确地分析识别血液及胃容物中12种抗精神药物的方法，供临床中毒病例之用。方法：利用各品种对照品在高效液相色谱柱中的保留时间及在不同检测波长处峰面积比值作为识别信息矢量，建立基础数据库，输入计算机，编制识别软件。采用欧氏距离对未知样品进行判别分析。结果：识别准确率大于98%。2例临床病例分析识别结果与利用对照品核对结果一致，有力地配合了临床抢救。结论：可达到快速、灵敏、准确的定性目的。可用于胃容物及血液中此类抗精神药物的分析识别。     

HE染色切片标本褪色的原因及解决方法

ＨＥ染色法是组织学与病理学常用的染色方法,ＨＥ染色切片标本是学生观察最多的一种切片。但该切片经数年后,细胞易褪色,直接影响观察效果。本文结合多年实践经验与详细观察,就这一现象的成因与解决方法提出如下浅见。１褪色原因（１）封固剂的酸化问题：干性封固剂是最常用的封固剂,主要是加拿大胶和中性树胶,但这两种封固剂均采用二甲苯作为溶剂。因日久二甲苯往往被逐渐氧化,生成苯甲酸和邻苯二甲酸而呈酸性,可导致碱性染料（苏木精）褪色（熊绪 ）。（２）切片标本经苏木精、伊红染色的过程中,脱水不净。（３）载玻片和盖玻片…     

促红细胞生成素促进体外鼠胚脑皮质神经干细胞增殖

目的检测体外培养SD大鼠胚脑皮质神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和分化的生物学特性,为NSCs研究提供适宜的细胞模型;探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对NSCs增殖的影响,为NSCs的相关研究提供实验依据。方法本研究对孕14d(E14)SD大鼠取鼠胚脑皮质悬浮培养、贴壁诱导分化。采用光电镜观察,以nestin免疫荧光染色鉴定NSCs,微管相关蛋白2(microtubule associated protein2,MAP2)和神经胶质原纤维酸性蛋白(glia fibrillary acid protein,GFAP)检测NSCs分化。取第三代(P3)NSCs向悬浮培养基中添加不同剂量的EPO,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测法检测NSCs的增殖情况。结果分离E14dSD大鼠胚脑皮质,在添加B27、bFGF、EGF的无血清培养基中培养,可形成大量悬浮的神经球并可进行体外扩增传代,神经球内的细胞均呈Nestin阳性、BrdU阳性。在添加10%胎牛血清的培养基中,神经干细胞可自然分化为神经元和神经胶质细胞。与对照组对比,加入≥5U/mlEPO后MTT检测NSCsOD值明显增高。结论 SD大鼠胚脑皮质体外培养可得到大量增殖的神经干细胞并能分化为神经元和神经胶质细胞,EPO可促进体外NSCs的增殖。     

猪食管肌间神经节内PACAP免疫阳性神经末梢来源的初步探讨

目的 探讨猪食管肌间神经节内垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)免疫阳性神经末梢的来源.方法 采用荧光免疫组织化学技术及逆向神经元示踪技术.结果 猪食管肌间神经节内含有叶片状、PACAP免疫阳性的神经纤维网;经食管下括约肌腹侧壁行荧光素快蓝(FB)神经元逆向示踪研究显示,节神经节(NG)内含有许多FB示踪神经元,其中约有48%呈PACAP免疫阳性.结论 猪食管肌间神经节内的PACAP免疫阳性神经末梢网很可能来源于迷走神经,为猪食管壁内的肌间神经节内板层样神经末梢.NG神经元顺向示踪研究结合免疫组织化学技术,将有助于确定此结构的形态特点并揭示其神经化学特征.     

131例正常胎儿头围、胸围、腹围的测量报告

收集受精龄为4月～足月正常胎儿131例,测量其头、胸、腹围,结果上述指标增长随着胎龄增加而增加,但生长速度随着胎龄的增加而相对减慢,且表现为连续性和波动性。头、胸、膜围测量结果经回归分析得出以胎龄为自变量的回归方程.