肿瘤坏死因子-α导致软骨损伤的机制探讨

骨性关节炎 (ＯＡ)及类风湿性关节炎 (ＲＡ)的主要病理特点是软骨的渐进性损伤。目前已证实肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)参与了这种软骨损伤的过程 ,并在其中起着非常重要的作用[1] 。本实验旨在通过研究ＴＮＦ α对软骨细胞基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)及ＴＩＭＰｓ表达的影响 ,从而间接探讨ＴＮＦ α导致软骨损伤的机制。一、材料与方法1.软骨细胞的体外培养 :无菌条件下取Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠 (出生 7～ 10ｄ)双侧股骨髁软骨 ,ＧＢＳＳ平衡液漂洗 3次 ,剪碎 ,0 0 5 %的透明质酸酶 37℃消化 5ｍｉｎ ,0 1%胶原酶 37℃消化并不时震荡 ;4ｈ…     

骨髓基质中的骨源性干细胞

骨髓基质是对骨髓血系细胞起支持和连接作用的组织,并影响血系细胞分化。骨髓基质细胞包括:骨系细胞、成纤维细胞、网状细胞、脂细胞[1],此外,还包括巨噬细胞和内皮细胞。骨髓基质中含有多能干细胞,Ｏｗｅｎ称之为骨髓基质干细胞,假定这种细胞分化为定向祖细胞,后者可分化为成纤维细胞、网状细胞、脂细胞、骨源性细胞(ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｃｅｌｌ)[1]。骨髓基质干细胞可以在无诱导下骨化,称为确定性骨源性前体细胞(ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｐｒｅｃｕｒｓｏｒｃｅｌｌｓ,ＤＯＰＣ),也称作骨源性干细胞(ｏｓｔｅｏｇｅｎ…     

寻找基因转染人脂肪来源的成体干细胞合适载体：脂质体介导质粒pEGFP-N1、重组腺病毒Ad5-EGFP与重组腺相关病毒rAAV-2／1-EGFP

目的:观察脂质体介导质粒pEGFP-N1、重组腺病毒Ad5-EGFP、重组腺相关病毒rAAV-2/1-EGFP基因转染人脂肪来源成体干细胞后增强型绿色荧光蛋白的表达及细胞毒性,探讨适用于脂肪来源的成体干细胞的转基因方法。方法:实验于2006-01/07在国家人类基因组北方中心和北京大学第三医院完成。全髋关节置换术患者的皮下脂肪由北京大学第三医院骨科提供,均征得患者及其家属同意。pEGFP-N1(Clotech公司),Ad5-EGFP,rAAV-2/1-EGFP(本元正阳公司)。②自成人皮下取少量脂肪组织,经机械剪切及Ⅰ型胶原酶消化后获取脂肪来源的成体干细胞,体外培养扩增。③采用脂质体介导质粒pEGFP-N1、重组腺病毒Ad5-EGFP、重组腺相关病毒rAAV-2/1-EGFP3种转染方法,观察增强型绿色荧光蛋白的表达及对细胞毒性的影响。④细胞转染后24h,将5×104细胞悬液接种于24孔板中,每周换液3次,绘制细胞生长曲线。以正常未转染细胞作为正常对照。观察不同转染方法对细胞增殖的影响。结果:①不同转染方法的感染效率比较:pEGFP-N1脂质体转染后细胞毒性较大,且感染效率低,仅为10.5%。重组腺病毒Ad5-EGFP转染率高,当感染复数为5×102时,感染效率达82.5%;当感染复数低于1×103时,对细胞无明显损害。重组腺相关病毒rAAV-2/1-EGFP转染法不能有效感染人脂肪来源的成体干细胞。②不同转染方法对细胞增殖的影响:重组腺病毒Ad5-EGFP转染和重组腺相关病毒AAV-2/1-EGFP转染人脂肪来源的成体干细胞后,对细胞增殖能力无明显影响,基本同正常对照细胞(P>0.05)。而pEGFP-N1脂质体转染后细胞增殖能力较正常对照明显下降,转染后3～10d差异有显著性意义(P<0.05)。结论:重组腺病毒Ad5-EGFP可作为一种高效的脂肪来源成体干细胞的示踪工具,提示5型复制缺陷型腺病毒是其合适的转基因载体。     

半月板损伤几种诊断方法的评价——物理诊断、关节造影、B超、MRI与关节镜诊断比较

作者对65例怀疑有半月板损伤的膝关节镜诊断结果进行分析,并分别报告了物理诊断、关节造影、B超和MRI的准确率,从而对每种检查方法进行评价.65例中20例分别进行了物理诊断、关节造影、B超、和MRI四项检查.对内侧半月板其准确率分别为60%、85%、50%、80%.敏感性分别为42.9%、57.1%、14.3%、71.4%.特异性为62.9%、100%、69.2%、84.6%.对外侧半月板其准确率分别为65%、75%、65%、90%.敏感性为81.8%、63.6%、63.6%、81.8%.特异性为44.4%、88.9%、66.7%、100%.作者认为对于半月板损伤单凭物理检查或B超难以作出正确的诊断,关节造影对内侧半月板损伤的诊断有较高的参考价值.MRI的准确率、敏感性与特异性高于其他检查,几乎可以代替关节造影、B超及诊断性关节镜检查.     

《骨关节炎——诊断与治疗》中译本书评

美国最大的出版公司之一的W．B．Saunders Company出版的《骨关节炎——诊断与治疗》（第3版）已由天津科技翻译出版公司出版。该书由国际公认的著名的骨关节炎权威学者Roland W．Moskowitz，David S．Howell，Roy D．Altman．Joseph A．Buckwalter在内的59名专家共同编著。这是世界上第一部关于骨关节炎的综合性专著。     

颈1—2侧方穿刺脊髓碘水造影术

脊髓造影始于1931年,它对椎管内病变有着重要的诊断价值,特别是七十年代以来,非离子型水溶性造影剂的出现,因其有着充盈性好,排泄迅速,毒副作用小,适于CT检查等特点,使得近一、二十年以来脊髓造影得到了更大的重视。一些因外伤、手术等不便腰穿,或是因梗阻、畸形、经腰穿不能显示,必须经高位蛛网膜下腔注药才能明确的上段椎管内病变,以往多采用小脑延髓池穿刺,但副作用较多。1977年以来,先后有Sackeet、Leo、Rice等人相继提出并应用了颈1-2侧方穿刺的方法[1],近年来国内少数医院也有应用[2],但终因其有伤及脊髓及血管的危险性[3～6]而报道…     

侧卧垂直颈＿1～2穿刺颈脊髓造影术──关于减少并发症的探讨

颈段脊髓造影，包括颈１～２侧方穿刺，技术要求较严格，有些并发症和一定的危险性。本文在总结前人大量经验的基础上提出了用侧卧垂直穿刺的方法注入造影剂，经１０４例；临床应用，效果满意。并从理论上提示了减少并发症的可能性。     

聚乙烯醇水凝胶弹性体复合物修复关节软骨缺损的实验研究

目的：研究应用聚乙烯醇水凝胶弹性体复合物作为关节软骨替代物修复成年犬的关节软骨缺损。方法：取8只成年犬随机均分为A、B两组，每组4只。在犬双后肢膝关节股骨内髁负重面制造软骨缺损区，在缺损区植入同等大小的聚乙烯醇水凝胶弹性体复合物。手术后8周和24周分别将A、B两组实验动物处死取材。在肉眼和光镜下观察植入物周围的软骨和软骨下骨，对应的半月板和胫骨面的软骨组织。结果：大体观察，实验动物术后关节功能良好，植入物在8周和24周均未见松动和脱落，与软骨下骨牢固结合。植入物周围软骨和对应部位的半月板和胫骨面软骨未见退变表现。光镜下观察8周和24周植入物周围未见软骨组织退变表现；软骨下骨组织长入钛纤维网孔隙中，形成生物力学固定；植入物周围无淋巴细胞浸润。结论：聚乙烯醇水凝胶弹性体具有与关节软骨类似的物理特性和良好的生物相容性，能作为关节软骨替代物修复关节软骨的缺损，恢复关节面的完整，维持关节功能。     

脂肪间充质干细胞的基本生物学特性及其向成骨细胞分化的特征

背景最早研究的是骨髓来源的间充质干细胞.由于脂肪组织与骨髓同为中胚层起源的组织,那么能否从脂肪组织中获得间充质干细胞,而且也具有多分化潜能呢?目的研究脂肪间充质干细胞的基本生物学特性以及在特定培养条件下向成骨细胞分化,探讨其作为骨组织工程的种子细胞的可行性.设计以细胞为研究对象的随机对照实验.单位北京大学第三医院骨科.对象实验于2002-10/2004-01在北京大学第三医院骨科完成,实验对象为从Lewis大鼠脂肪组织中提取的间充质干细胞.方法取3周龄Lewis大鼠的腹股沟脂肪垫,消化法获得脂肪间充质干细胞,分别用脂肪诱导培养基和成骨诱导培养基诱导其向脂肪细胞与成骨细胞分化,组织化学染色、免疫细胞化学染色和Western blotting检测细胞分化的情况.主要观察指标脂肪间充质干细胞的形态学和生物学特性,以及成骨诱导后成骨细胞特异性标志.结果从成体大鼠脂肪组织中培养出脂肪间充质干细胞,体外培养呈成纤维细胞样,能大量稳定增殖传代.原代脂肪间充质干细胞能自发分化为脂肪细胞,传代细胞在胰岛素和地塞米松的作用下生成脂滴,过氧化物酶体增殖物激活受体?表达增强,向脂肪细胞分化;在地塞米松、抗坏血酸、?-甘油磷酸钠的诱导下,碱性磷酸酶活性检测显示诱导组与对照组差异有显著性意义(P＜0.01),yon Kossa染色出现钙结节,骨桥蛋白免疫细胞化学染色阳性,Western blotting检测到诱导后细胞骨桥蛋白的表达.结论从脂肪组织中可获得具有多分化潜能的间充质干细胞,经诱导后可分化为脂肪细胞和成骨细胞,有可能成为骨组织工程较理想的种子细胞之一.     

保留髌骨膝关节置换的症状及影像学评价☆

背景：膝关节置换中是否置换髌骨是一个持续争论的话题。 目的：侧重评价保留髌骨膝关节置换后髌骨的影像学稳定性和症状改善。 方法：对39例(48膝)骨关节炎及类风湿性关节炎患者行保留髌骨的全膝关节置换。 结果与结论：术中记录髌骨软骨退变分级Ⅲ级和IV级达36膝,占75%,置换后HSS评分及FELLER髌骨评分较置换前明显改善,明显膝前痛病例为5例,占10%,其髌骨病理分级均达到IV级。保留髌骨膝关节置换前后影像学评价髌股关节的对线差异无显著性意义,下肢力线校正满意。提示对于置换前髌股轨迹不良、术中软骨病理分级较低者应该进行选择性的髌骨置换,恰当选择病例采用保留髌骨的膝关节置换可减少髌股关节并发症,置换前仔细评估,综合考虑多种因素操作可进一步改善髌股轨迹。