硼中子俘获疗法治疗小鼠颅内G422胶质细胞瘤

目的探讨硼中子俘获疗法（BNCT）治疗G422胶质细胞瘤的效果。方法建立小鼠颅内G422胶质细胞瘤模型，以ICP—AES法测定荷瘤小鼠不同组织中的10^B浓度。将荷瘤小鼠随机分为未照射组（0Gy）、γ射线对照组（5、10Gy）、反应堆组（5、10Gy）、BNCT组（5、10Gy）。采用生存时间的中位数、平均生存时间、生存时间延长率作为评价指标，观察各组的治疗效果。结果荷瘤小鼠腹腔注射对二羟苯丙氨酸硼溶液后1．5h，瘤组织内的10^B浓度达到峰值[（43．78±3．02）μg/g]。BNCT5、10Gy照射后，移植G422胶质细胞瘤小鼠的生存时间延长率分别为235％（233％）、329％（342％）。BNCT5Gy组的生存率与未照射组、γ射线5Gy组和反应堆5Gy组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。BNCT10Gy组的生存率与未照射组、γ射线5Gy组、γ射线10Gy组、反应堆5Gy组、反应堆10Gy组、BNCT5Gy组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BNCT可以显著提高荷G422胶质细胞瘤小鼠的生存率，并具有剂量依赖性的特点；同时BNCT具有较高的相对生物学效应，优于同剂量γ射线的治疗效果。     

神经干细胞分化过程中bHLH基因表达

目的 通过检测神经干细胞分化过程中抑制型和激活型碱性螺旋（bHLH）转录调控因子mRNA的表达，探讨神经干细胞定向分化机制。方法 小鼠胎脑细胞原代培养并鉴定。用全反义维甲酸（RA）诱导神经干细胞分化，通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测神经干细胞分化前以及分化后1d、2d、3d、5d和10d时Hesl、Hess、Mashl、Mathl及NeumDmRNA的表达。结果 HeslmRNA在神经干细胞分化前后均表达，无显著差异；HessmRNA随分化时间延长表达下降；NeuroDmRNA和MashlmRNA仅在已分化神经元中表达；MathlmRNA在分化后期表达明显。结论 神经干细胞分化过程中bHLH转录因子mRNA的表达具有明显的时相性，这将为最终揭示神经干细胞分化调控机制提供实验基础。     

时间因素对神经干细胞向γ-氨基丁酸能神经元分化的影响

目的探讨时间因素对体外培养的神经干细胞向γ氨基丁酸(gammaaminobutyricacid,GABA)能神经元分化的影响。方法体外培养神经干细胞并加以鉴定。利用反义寡核苷酸诱导神经干细胞向GABA能神经元分化,通过免疫荧光染色计算不同时间点的GAD65阳性细胞率。结果体外培养获得神经干细胞,染色可见神经球及分化细胞中分别有nestin、NF200、GFAP阳性细胞。方差分析表明不同时间点的阳性细胞率存在的差别具有显著意义(F=702.93,P<0.05),LSDt检验表明除第7d与第9d无明显差别外,其余各时间点之间均有明显差别。其中第7天的分化率最高为87.60%±6.26%。结论本实验利用反义寡核苷酸序列特异性阻断了Hes1的表达,促进了神经干细胞向GABA神经元分化,并发现在诱导分化7d后分化率达到最高值。     

不同培养条件神经干细胞早期分化特征观察

目的 探讨不同培养条件对小鼠神经干细胞早期分化形态学的影响.方法 用无血清条件培养基、5%胎牛血清+条件培养基培养与单细胞克隆技术对小鼠胚胎脑组织进行分离、培养及诱导分化,在光学显微镜下观察培养细胞分化2 w内形态学变化,对培养细胞用免疫组织化学法鉴定.结果 无血清培养瓶内细胞分化早期呈极性排列,而5%胎牛血清+条件培养基培养组,克隆球间存在着广泛的网络结构,且单一神经干细胞核分裂旺盛,克隆球数目多且比较大.结论 小鼠神经干细胞间早期存在某种依赖关系,在适当的微环境中,神经球之间可能存在信息传递.     

高血压脑出血合并二次脑损伤预后因素分析

目的探讨高血压脑出血合并二次脑损伤对患者预后的影响。方法对308例高血压脑出血患者行外科治疗,术后对影响二次脑损伤的多项指标进行监测,并进行统计学分析。结果手术时机、血肿部位、血肿体积及二次脑损伤因素对患者的预后在统计学上有显著性差异,而不同术式对患者的预后无明显影响。结论二次脑损伤因素的异常改变,可造成第二次脑损害,影响患者的预后。     

神经干细胞移植治疗小鼠机械性脑损伤的实验研究

目的探讨神经干细胞移植后的体内存活、增殖与分化,及其对小鼠机械性脑损伤的治疗作用。方法运用牙科钻制作小鼠运动区皮质机械性损伤模型。48只清洁级昆明小鼠,雌雄不拘,体质量为18～20g,按体质量编号随机分为4组:神经干细胞移植组(损伤后原位移植经鉴定确认的原代培养的小鼠神经干细胞)、3T3移植组(损伤后原位移植3T3细胞)、单纯损伤组(损伤后不行神经干细胞移植)和空白对照组(仅施行麻醉),每组12只小鼠。于伤后第3天进行行为学检测;第10、30天行损伤区脑组织nestin及NF200免疫荧光染色,观察神经干细胞生长、分化情况。结果损伤后,获得原代培养的神经干细胞在移植早期贴附于损伤区域且向周边组织呈浸润生长;移植后期Hoechst33342及NF200染色显示损伤区附近可见分化形成的神经元。单纯损伤组小鼠出现偏瘫症状;而神经干细胞移植组小鼠植入神经干细胞后则症状减轻,运动功能明显改善,与其他各组相比差异有显著性意义(P<0.001)。结论神经干细胞移植能够改善小鼠机械性脑损伤后的神经功能状态。     

小儿后颅窝硬膜外血肿45例诊治报告

目的:探究小儿后颅窝硬膜外血肿的病因、诊断及治疗方法。方法:采用回顾性研究,对10年间收治的45例其受伤机理、诊断方法及治疗手段进行分析讨论。结果:手术治疗39例(86.7％),保守治疗6例(13.3％);治愈43例(95.6％),死亡2例(4.4％)。结论:本病常见的病因是高处坠落伤及交通事故。头颅CT扫描是快速诊断且可靠的方法。较大的血肿(>10ml)应积极手术治疗,血肿较小(<10ml)者可在严密观察下保守治疗,只要及时、准确的诊断和治疗,预后良好。     

Cyclin D2在人脑胶质瘤的亚细胞表达及意义

目的研究细胞周期素D2(cyclin D2)在人脑胶质瘤中的亚细胞表达.方法采用免疫组化方法检测52例人脑胶质瘤及8例正常人脑组织中cyclin D2蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果正常人脑组织中无cyclin D2表达,而在胶质瘤细胞胞核和胞浆中均发现cyclin D2的阳性表达,并随肿瘤恶性程度增高而表达增强.其中11例(21.2%)出现胞核染色,高恶性度胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)与低度恶性胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)标记指数与阳性率无显著性差异(P＞0.05);胞浆染色阳性率为42.3%(22/52),低、高恶性度组标记指数间差异显著(P＜0.05),各相邻级别之间无显著差异(P＞0.05).二元相关性检验显示cyclin D2胞浆染色标记指数与PCNA标记指数呈正性相关(r=0.478,P＜0.01).结论人脑胶质瘤细胞胞核和胞浆中均存在cyclin D2的表达,其中胞浆表达与肿瘤细胞的增殖活性密切相关,提示其可能在肿瘤细胞细胞质中发挥重要正性调控作用.     

星形胶质瘤细胞摄取BPA的时间及细胞周期相关性研究

目的　研究两种星形胶质瘤细胞系C6和SHG 4 4摄取BPA(p boronophenylalanine)的孵育时间与细胞周期的相关性 ,探讨BPA的选择性作用机制。方法　细胞计数法测定C6和SHG 4 4胶质瘤细胞和星形胶质细胞的生长曲线 ;将三种细胞分别培养在含BPA的培养液中 (BPA浓度为 5mmol/L ,10 B浓度相当于 5 0 μg/ml) ,4、8、12、16、2 0和 2 4h后采用感应耦合等离子体原子发射光谱 (ICP AES)法测定细胞内硼的含量 ,绘制硼含量 时间曲线 ;含硼培养液孵育 2 4h后 ,流式细胞术分离G0 /G1和G2 /M期细胞 ,ICP AES法测定不同周期细胞硼的含量。结果　C6和SHG 4 4的倍增时间均为 18 5h,星形胶质细胞的倍增时间为 2 8h。相同时间下两种胶质瘤细胞硼含量均高于对照组的胶质细胞 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1)。两种胶质瘤细胞G2 /M期比G0 /G1期硼含量明显增高 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1) ,而星形胶质细胞两期硼浓度差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。两种胶质瘤细胞G2 /M期硼浓度均高于星形胶质细胞 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1)。在G0 /G1期 ,C6和SHG 4 4与星形胶质细胞硼浓度比值分别为 1 4 6和 1 5 1,而在G2 /M期该比值则分别为 3 6 5和3 96。结论　实验中合成的BPA具备了应有的生物学活性 ,即对胶质瘤细胞的高选择性 ;有