慢性药物性肝损伤后肝功能恢复的风险预测模型构建

目的 探讨影响慢性药物性肝损伤(DILI)3年后肝功能恢复的相关因素,并构建风险列线图模型。方法 回顾性分析2017年1月至2019年12月在蒙城县第一人民医院127例确诊为慢性DILI患者的临床资料。比较3年后患者肝功能未恢复组和恢复组患者的临床资料。多因素分析影响慢性DILI患者3年后肝功能恢复的相关因素。构建慢性DILI患者3年后肝功能未恢复的风险预测模型并进行验证及效能评估。结果 肝功能未恢复组与恢复组性别、年龄、BMI、吸烟史、饮酒史、合并基础疾病、用药史、临床分型、DILI严重程度分级、炎症分级、Hb、前白蛋白、WBC、TBil、IgA、IgG及IgM水平对比,差异均无统计学意义(P>0.05)。未恢复组纤维化程度分级为S3/S4级占比、ALT、AST、ALP及GGT水平高于恢复组(P<0.05),PLT水平低于恢复组(P<0.05)。多因素分析结果显示,纤维化程度分级为S3/S4级(OR=2.757,95%CI:1.054～6.963)、PLT(OR=0.347,95%CI:0.143～0.844)、ALT(OR=3.228,95%CI:1.328～7....     

人重组LIGHT-Fc分子的真核表达及其抗肿瘤活性研究

目的：构建人LIGHT-Fc基因的真核表达质粒，并表达获得有较高生物学活性的纯化人LIGHT-Fc融合蛋白。方法：从cDNA文库中PCR扩增LIGHT全长编码基因，并导入克隆载体。测序证实后，继续用PCR扩增其膜外区cDNA，用重叠延伸技术(SOE)引入cD137信号肽基因。将SOE产物与hlgG1Fc基因一起装入真核表达载体pcDNA3中，瞬时转染293T细胞，用夹心ELISA检测其表达情况，经蛋白A亲和纯化，用SDS-PAGE检测其纯度与Mr，并以肿瘤细胞为靶细胞，检测其生物学活性。结果：测序证实构建的LIGHT与LIGHT-Fc cDNA阅读框完整，连接部位序列正确；ELISA和SDS-PACE证实LICHT-Fc融合蛋白的表达与纯度；MTT证明人LIGHT-Fc蛋白对一些肿瘤细胞系具有生长抑制作用。结论：获得了有抗肿瘤活性的纯化hLIGHT-Fc融合蛋白，为探讨LIGHT在免疫自稳调节中的地位、结合相应受体后的动力学与信号转导机制，以及探索LIGHT的其他生物学功能奠定了坚实的实验基础。     

亚溶破补体攻膜复合物诱导机体免疫细胞内游离钙动员

目的初步探讨亚溶破MAC对机体T免疫细胞刺激效应的发生机制。方法用Fura-2／AM标记细胞，荧光分光光度计测定方法，分别检测对在胞外Ca^2 络合剂EGTA及Ca^2 通道阻滞剂verapmail作用情况下，sMAC刺激T细胞后的T细胞内游离钙([Ca^2 ]i)。结果sMAC能诱导T细胞[Ca^2 ]i迅速升高448．9nM。应用EGTA或verapmail后，sMAC诱导Jurkat细胞[Ca^2 ]I水平由349．6nM下降至155nM或222nM。结论本实验首次证实。MAC诱导免疫细胞Ca^2 动员，包括Ca^2 内流和Ca^2 库释放。     

电针治疗冠心病随机对照试验的有效性和安全性评价

目的通过循证医学的方法系统评价电针治疗冠心病的有效性及安全性。方法以冠状动脉粥样硬化性心脏病、冠心病、心绞痛等,并含电针、针刺、针灸、针等为检索词,检索包括中国生物医学文献数据库,清华同方系列数据库(CNKI)之中国期刊全文数据库、中国优秀博硕士学位论文全文数据库、中国重要会议论文全文数据库,中国医用信息资源系统(维普),PubMed医学文献检索服务系统,MEDLINE生物医学文献数据库,Cochrane图书馆等数据库。结果纳入符合标准的文献共15篇,涉及研究12项,纳入患者1 006例。Meta分析结果显示电针可以改善患者的临床症状,改善心电图,减少硝酸甘油用量,降低血液黏稠度,改变血液流变学,增加血清超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)含量,降低丙二醛(MDA)、脂氢过氧化物(LOOH)、内皮素(ET)及C反应蛋白的含量,并且优于对照组;在减少严重心血管事件的基础上,无明显不良反应。结论电针可以有效治疗冠心病,在改善症状、降低并发症方面优于常规药物治疗,但目前报道的电针治疗冠心病的文章质量良莠不齐,有待更多大样本、随机对照试验验证本文结论。     

促红细胞生成素对实验性自身免疫性神经炎大鼠的治疗作用及机制

目的研究促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对实验性自身免疫性神经炎(Experimental autoimmune neuritis,EAN)的治疗作用及机制。方法将Lewis大鼠共12只随机分的为EPO治疗组6只和PBS对照组6只,使用大鼠外周神经P257-81肽段诱发急性EAN模型,每天测量体重和神经功能评分至实验结束,免疫后第7天开始进行EPO治疗。第14天(高峰期)取大鼠坐骨神经,用免疫组化染色观察T细胞炎症浸润。第21天(恢复期)取大鼠淋巴结,用荧光定量PCR方法检测IFN-γ、IL-17、IL-4和Foxp3的相对表达。使用放射性3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖实验中EPO的抑制作用。结果 EPO治疗后大鼠EAN严重度显著降低;免疫组化显示治疗组外周神经T细胞浸润减少;荧光定量PCR结果显示治疗组淋巴结中IFN-γ和IL-17表达降低,而IL-4和Foxp3表达增加;淋巴细胞增殖实验表明EPO剂量依赖地抑制淋巴细胞增殖。结论 EPO对EAN有明显治疗作用,这种治疗作用可能与EPO抑制T细胞的炎症浸润和增殖反应,抑制Th1/Th17类细胞因子炎症损伤,促进Th2/Treg类细胞因子免疫抑制作用有关。     

疏肝解郁针刺法治疗纤维肌痛综合征

纤维肌痛（Fs）,是一种非关节性风湿病,多见于女性,发病年龄为25—45岁。以全身广泛性疼痛和广泛存在压痛点、睡眠障碍、疲劳及晨僵为特征性症状,常伴有头痛、肠易激综合征、疲劳综合征等,严重影响患者的生存质量。对本病的治疗,现在多以口服三环类抗抑郁药为主,但临床疗效不佳,复发率高,     

SARS-CoV S2蛋白基因的克隆及其在Vero E6细胞中的表达

目的克隆人SARS病毒S2蛋白分子的编码序列,并在VeroE6细胞上获得表达.方法从人SARS病毒cDNA文库中用PCR技术克隆编码SARS病毒S2蛋白的片段.将它插入质粒载体PVAXl中构建重组S2-pVAXl真核表达载体,并对插入片段序列进行测序.采用脂质体法转染VeroE6细胞,用Western blotting检测SARS-CoV S2蛋白的表达情况.结果用PCR方法扩增出一个1 845bp的基因片段,并插入pVAXl载体中,成功构建出重组S2表达载体,经测序证实克隆的S2片段阅读框正确完整.将其转染的Vero E6细胞经Western Blotting检测获得一条特异性目的蛋白条带.结论成功克隆基因并获得表达S2分子的Vero E6细胞系.     

RNA干扰能有效抑制SARS相关冠状病毒复制

基于RNA干扰可抑制HIV等病毒的事实[1],本课题组构建了针对SARS病毒的、能表达小发夹结构RNA的siRNA质粒,利用RNA干扰有效抑制了该病毒的复制.     

应用人工神经网络建立肺癌血清肿瘤标记物诊断模型的研究

目的 检测肺癌患者血清中的肺癌肿瘤标记物,应用人工神经网络建立肺癌血清肿瘤标记物诊断模型。方法 应用酶联免疫吸附法（ELISA）分别测定86例肺癌和80例健康人血清细胞角蛋白21 1片段(CYFRA21 1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、组织多肽特异性抗原(TPS)、可溶性白细胞介素2受体(sIL 2R)、癌胚抗原(CEA)、糖抗原242（CA242）、抑癌基因p53抗体共7种肿瘤标记物含量。用曲线下面积结合人工神经网络建立诊断模型,并将此诊断模型用于肺癌的诊断。结果 根据血清肿瘤标记物的测定结果,计算出每个肿瘤标记物的曲线下面积,应用人工神经网络建立肺癌血清肿瘤标记物诊断模型,该模型预测肺癌样本的诊断准确率84.1%,敏感性为86.3%,特异性94.8%。结论 本研究建立的肺癌诊断模型对肺癌的诊断具有较高的敏感性和特异性。