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“荧光定量PCR溶解曲线法”监测人TCRβ链CDR3谱系漂移技术的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 建立"荧光定量PCR溶解曲线分析技术"监测人外周血T细胞TCR β链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).方法 提取4例正常人、9例大肠癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell-PBMC)中的总RNA,逆转录成cDNA,以26个人TRBV基因家族设计上游引物,共同的TRBC基因设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增26个TRBV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生.结果 正常人外周血T细胞TCR β链26个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的"溶解曲线谱型图"(melting curve spectratyping)呈现溶点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布;9例大肠癌患者的外周血TCR β链CDR3谱系的26个家族CDR3表达频率不一致,有的患者部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的"溶解曲线谱型图"上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族.结论 "荧光定量PCR溶解曲线分析TCR CDR3谱系漂移技术",方法稳定简便,能较好的监测正常人和临床样本外周血T细胞TCR β链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生). 相似文献
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<正> 近年来日本十分重视和汉药物(中药及天然药物)的研究工作,已形成一支庞大的专业研究队伍。研究门类齐全、领域宽广,包括植物栽培、动物饲养、组织培养和生物工程、生药学、植物化学、生物化学、药理学及制剂学等各方面。每个研究单位都有明确而稳定的研究方向,形成许多学派,加以在研究中广泛采用先进技术及仪器,故取得了丰富的研究成果。以下分三个方面加以介绍。 相似文献
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目的 探讨儿童接种新甲型(H1N1)流感疫苗接种后远期疫苗特异性CD4+记忆T细胞亚群的特征.方法 根据自愿原则,选择31例接种甲型H1N1流感疫苗47个月后的儿童,取静脉血并分离淋巴细胞,细胞培养中滴入甲型H1N1流感疫苗,同时设不加疫苗刺激的作为对照组,流式细胞仪检测CD4+记忆T细胞亚群的表型特征.结果 外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+疫苗特异刺激组为29.85%,对照组为39.00%,实验组低于对照组;CD4+初始T细胞实验组为74.32%,对照组为70.08%(P>0.05);CD4+记忆T细胞实验组为28.54%,与对照组25.52%比较,无统计学意义(P>0.05);记忆T细胞分中央型与效应型记忆T细胞,检测结果:CCR7和CD62L单阳性记忆T细胞亚群实验组分别为72.52%、29.85%,对照组分别为84.0%、93.44%,实验组的明显低于对照组(P<0.05).结论 实验儿童初始T细胞比例都较高;甲型H1N1流感疫苗能诱导抗原特异性记忆CD4+T细胞的产生,可是为数较少,当中主要是中央型记忆CD4+T细胞,其中CCR7+和CD62L+记忆T细胞数量较低. 相似文献
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目的研究元宝草Hypericum sampsonii地上部分的化学成分。方法采用HP-20大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱、RP-HPLC分离手段进行分离纯化,利用波谱学的方法鉴定化合物结构。结果从元宝草地上部分60%乙醇提取物中分离得到4个化合物,分别鉴定为2,4,6-三甲氧基-3′,5′-二羟基二苯甲酮(1)、2,4,6-三甲氧基-3′-羟基二苯甲酮-5′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(2)、2-羟基-4,6-二甲氧基二苯甲酮(3)、2,4,6,3′,5′-五甲氧基二苯甲酮(4)。结论化合物1和2为2个新的二苯甲酮类化合物,分别命名为元宝草素A和元宝草素B;化合物3和4为首次从该植物中分离得到。 相似文献