携带k-ras和c-Myc基因逆转录病毒载体的构建及其转导正常卵巢细胞效能的研究

目的：构建携带k—ras和c—Myc基因的逆转录病毒载体,研究其转导正常小鼠卵巢上皮细胞（mouse ovarian surface epithelial cell,MOSE）的效能。方法：用基因克隆的方法将k—ras和c—Myc基因插入到载体pI,PCX和pI,HCX中,构建真核表达质粒pLPC—mMyc和pI。HC—kras。将pLPC—mMyc或pLHC—kRas通过脂质体法转导包装细胞Ecotropic Pheonix细胞,提取含有携带目的基因的重组病毒上清,转染MOSE,获取携带c—Myc和k—ras基因的MOSE细胞株,分别命名为MOSE—Myc细胞和MOSE—Ras细胞,同时拮抗Puromycin和Hygromycin的MOSE细胞株,命名MOSE—RM细胞。用RT-PCR和Western blot检测目的癌基因和蛋白质在MOSE细胞的表达。将MOSE、MOSE-Myc、MOSE-Ras、MOSE—RM被分别注射到CDl裸鼠腹腔,60d后处死所有裸鼠,解剖检查,观察成瘤情况和生存时间,并进行免疫组织化学染色。结果：RT—PCR能检测到目的基因c—Myc（943bp）和k—ras（620bp）mRNA特异的条带,Western blot在转基因细胞株中能检测到cMyc（67ku）和k-ras（21ku）基因蛋白质的表达。MOSERM和MOSE—Ras组在裸鼠体内均能形成肿瘤,而MOSE和MOSE—Myc在实验结束时均未能形成肿瘤。免疫组织化学染色显示MOSERas和MOSE—RM组k—ras蛋白均呈强阳性,定位于细胞膜;MOSE—RM组c—Mye蛋白呈强阳性,位于细胞核。结论：真核表达质粒plPC—mMyc和plHC—kras能够通过逆转录病毒将k—ras和c—Myc高效导人正常小鼠卵巢上皮细胞MOSE,表达目的蛋白。     

S100A6在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的研究S100A6基因在不同宫颈病变组织中的表达情况,分析其与宫颈癌淋巴结转移的关系。方法应用荧光定量PCR技术定量分析宫颈良性病变13例、宫颈癌未合并淋巴结转移和宫颈癌合并淋巴结转移各25例的宫颈组织中S100A6基因的表达量。结果 S100A6基因在不同病变宫颈组织中均有表达,宫颈癌合并淋巴结转移组中表达最高,宫颈癌未合并淋巴结转移组表达次之,宫颈良性病变组最低。结论 S100A6基因在不同病变宫颈组织中表达均有差异,随着宫颈病变程度及浸润转移表达增高,结合临床可以作为评价宫颈癌转移浸润危险性的参考指标之一。     

浅谈妇产科医生医患沟通能力的培养

沟通是人与人之间传递信息,交换信息．交流思想、说明观点,表达需求、阐明意愿,增进理解,融合情感．达成共识的过程。医患沟通,就是在医疗卫生和保健工作中,医患双方围绕伤病,诊疗、健康及相关因素等主题,以医方为主导,通过各具特征的全方位信息的多途径交流,科学指引诊疗患者伤病,使医患双方形成共识并建立信任合作关系,达到维护人类健康．促进医学发展和社会进步的目的。沟通能力是一个人生存与发展的必备能力,对于妇产科医生而言更是如此。据中华医学管理学会不完全统计数据显示,我国七成以上医院曾出现患者或家属辱骂．威胁．暴力殴打医务人员的情况,妇产科、骨科,眼科是医疗纠纷发生频率最高的3个临床专业。由此可见妇产科医生培养医患沟通能力十分紧迫和必要。     

宫颈鳞癌患者血清miR-34a的表达

目的探讨血清miR-34a在诊断宫颈鳞癌淋巴结转移的价值。方法 65例宫颈鳞癌患者,其中伴淋巴结转移者25例(A组),不伴淋巴结转移者40例(B组),并选择健康体检妇女15例作为对照组。采用实时荧光定量PCR测定血清miR-34a水平,并绘制ROC曲线分析血清miR-34a与淋巴结转移的关系。结果 A组、B组、对照组血清miR-34a相对表达量无差异(P>0.05)。血清miR-34a相对表达量与宫颈癌分期无关(P>0.05),与淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 miR-34a对判断宫颈癌有无淋巴结转移不敏感。     

微波固化治疗对中晚期宫颈癌患者免疫功能的影响

目的：观察微波固化治疗对宫颈癌患者免疫功能的影响.方法：对41例中晚期宫颈癌患者进行微波固化治疗加放疗及化疗,与同期放疗加化疗患者50例作对照,两组在治疗前后均检测免疫指标.结果：微波治疗后机体细胞免疫指标较治疗前有明显升高（P〈0.05）,对照组治疗前后无明显变化（P〉0.05）,治疗组细胞免疫指标治疗后显著高于对照组（P〈0.05）.结论：微波固化治疗可促进宫颈癌患者细胞免疫功能的提高.     

SCC-Ag在宫颈鳞癌病例中诊断淋巴结转移效能的Meta分析

目的系统评价鳞状细胞癌相关抗原(Squamous Cell Carcinoma antigen,SCC-Ag)在宫颈鳞癌患者中诊断淋巴结转移的诊断效能。方法研究者检索PubMed、Embase、Cochrane Library及中国期刊网、万方数据库、中国生物医学网,收集当前有关宫颈癌SCC-Ag的所有中英文文献,并根据QUADAS(Quality Assessment of Diagnostic Accuracy Studies)质量评价标准评价纳入文献的质量。用Meta-Disc1.4、Stata11.0软件对纳入研究进行异质性检验,合并敏感度、特异性等指标,绘制SROC曲线、漏斗图。结果共纳入10篇符合纳入标准的文献。经随机效应模型分析,SCC-Ag对宫颈癌淋巴结转移的诊断指标合并值分别为：合并敏感度60%［95%CI（0.54~0.65）］,合并特异性76%［95%CI（0.73~0.78）］,合并诊断比值比5.38［95%CI（3.27~8.87）］,SROC曲线下面积（AUC）0.7126（欠满意）。诊断界值的选择可能是纳入文献异质性的主要原因。结论纳入文献质量较好,SCC-Ag对宫颈鳞癌淋巴结转移虽然有一定的诊断价值,但仍不是一个理想的诊断指标。     

沉默MMP-2对人宫颈鳞癌SiHa细胞生物学行为的影响

目的:研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)对人宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、迁移、侵袭及裸鼠成瘤能力的影响。方法:分别用MMP-2沉默慢病毒感染人宫颈鳞癌SiHa细胞(MMP-2-LV组)、空载慢病毒感染人宫颈鳞癌SiHa细胞为阴性对照组(NC-LV组)。转染后采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)观测MMP-2 mRNA的表达,蛋白质印迹(Western blotting)检测MMP-2蛋白的表达,流式细胞技术、Transwell侵袭、迁移和CCK-8细胞增殖实验观测MMP-2对细胞凋亡、侵袭、迁移和细胞增殖的影响,在裸鼠上构建移植瘤模型观测MMP-2对小鼠皮下成瘤能力。结果:转染后,与NC-LV组比较,MMP-2-LV组细胞MMP-2 mRNA和蛋白的表达量较低(P<0.05),增殖能力降低(P<0.01),侵袭、迁移能力降低(P<0.05),而细胞凋亡率升高(P<0.05)。裸鼠成瘤实验显示,接种MMP-2-LV组细胞的裸鼠皮下成瘤体积小于接种NC-LV组细胞的裸鼠皮下成瘤体积(P<0.01)。结论:沉默MMP-2可抑制SiHa细胞增殖、侵袭及迁移能力并促进其凋亡,MMP-2可能是宫颈鳞癌的潜在诊疗靶点。     

保留膀胱神经的根治性子宫切除术研究进展

根治性子宫切除术（radical hysterectomy,RH）与常规淋巴结清扫是治疗宫颈癌的标准术式。由于手术范围大,损伤面积广,术后常引起膀胱功能障碍,结、直肠蠕动紊乱以及性功能障碍等一系列并发症。这些并发症的出现是因为术中损伤盆腔脏器的自主神经（pelvic autonomic nerve,PAN）所致。为了减少宫颈癌根治术术后并发症,尤其是降低神经源性排尿障碍的发生,     

腹腔镜在卵巢恶性肿瘤再分期手术中的应用

目的:探讨腹腔镜下卵巢恶性肿瘤再分期手术的临床应用价值.方法:2006年11月至2叭0年6月我院对12例卵巢恶性肿瘤患者行腹腔镜下再分期手术.统计手术时间、估计失血量、淋巴结切除数目、大网膜切除程度、术后排气时间、术后住院时间、术中术后并发症、术前术后手术病理分期情况.结果:所有手术均在腹腔镜下完成,手术时间为(250.2±46.7)分钟,估计失血量为(220.2±106.4)ml,淋巴结切除数为(12.2±1.7)个,术后排气时间为(37.3±2.6)小时,住院天数为(7.2±1.1)天,无术中术后严重并发症,术后随访1个月～44个月无1例复发、无穿刺孔转移.结论:腹腔镜下卵巢恶性肿瘤再分期手术安全、可行,创伤小、术后排气快、住院时间短、手术范围足够.     

腹腔镜下保留盆腔自主神经平面根治性子宫切除术的初步临床研究

目的 探讨保留盆腔自主神经平面的腹腔镜下根治性子宫切除术的技术要点、可行性及其对降低术后膀胱功能障碍的作用。方法 将2010年1月至2011年5月30例宫颈癌患者分为两组,一组（15例）根据盆腔自主神经的标志性结构行保留“神经平面”法,于腹腔镜下保留盆腔自主神经的根治性子宫切除术（LNSRH）,另一组（15例）行腹腔镜下根治性子宫切除术（LRH）作为对照。结果 LNSRH 组15例患者中2例因出血较多保留单侧神经,1例为ⅡA期选择性保留病灶对侧盆腔神经,其余成功保留了双侧神经。全组30例患者均顺利完成手术,LNSRH组的手术时间为（301.8±47.6）min,长于LRH组的（178.3±17.0）min（P＜0.05）。术中出血量、术后肠道恢复时间、切除盆腔淋巴结的数目、宫旁和阴道切除范围两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。术后LNSRH组的住院时间为（10.9±2.0）d,明显少于LRH组的（15.1±0.8）d（P＜0.05）。LNSRH组术后拔除尿管的平均时间为（10.8±3.2）d,明显短于LRH组的（17.4±3.2）d（P＜005）。随访3～19个月,全组无复发和转移病例。结论 LNSRH在技术上安全、可行,可明显减少术后膀胱功能障碍,既不降低根治性标准,又有利于患者术后恢复及生活质量提高。