Xaf1诱导XIAP-／-成纤维细胞凋亡机制的研究

【目的】利用XIAP-/-成纤维细胞，检测在剔除XIAP的情况下Xaf1诱导细胞凋亡的作用，探索Xaf1诱导细胞凋亡的机制。【方法】Xaf1诱导的XIAP-/-成纤维细胞凋亡由流式细胞DNA含量来表示，免疫荧光显微镜检测XIAP-/-成纤维细胞中Xaf1的亚细胞分布，共转染并细胞周期DNA含量流式细胞术检测Bc12对Xaf1诱导的细胞凋亡的影响．细胞色素C流式细胞术检测Xaf1对细胞色素C释放的调节。【结果】Xaf1与TNFα显著协同诱导XIAP-/-成纤维细胞凋亡，凋亡峰值27％。Bcl2能抑制Xaf1诱导的XIAP-/-成纤维细胞凋亡．凋亡峰值由27％下降至6％。在剔除XIAP的情况下，Xaf1仍可诱导细胞色素C释放，峰值为21％。【结论】Xaf1通过胱冬肽酶非依赖机制释放细胞色素C而诱导肿瘤细胞凋亡。     

要不要补充蛋白粉?听听中肯建议

近年来,蛋白粉作为一种营养补充剂,受到广大消费者的追捧,甚至被认为是保健神药.那么,蛋白粉到底是什么?是不是所有人都可以吃呢?蛋白粉的主要成分就是蛋白质,根据来源的不同,分为动物性蛋白和植物性蛋白.蛋白质是保证机体健康最重要的营养素,是维持和修复机体及细胞生长所必需的,不仅能促进机体组织如肌肉的生长,还参与激素的产生...     

心肌ONOO- 改变对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤及细胞凋亡的影响

 目的： 测定不同周期链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠心肌超氧亚硝酸根离子(ONOO-)改变及其对缺血/再灌注（I/R）损伤及细胞凋亡的影响。方法： 阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌I/R模型，用TTC染色，测定大鼠心肌I/R后梗死面积；用免疫印迹法定量分析代表心肌凋亡水平的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达；形态测定（morphometric）法测定ONOO-生成的标志性产物硝基酪氨酸（NT）的水平。结果： 在STZ处理后2周糖尿病组(2WKD)心肌梗死面积35.00%±3.00%，明显小于相应周期对照组(2WKC)51.00%±3.30%，P<0.05；STZ 处理后16周糖尿病组(16WKD)，梗死面积61.00%±3.00%大于相应对照组(16WKC)50.00%±2.00%，P<0.05；在缺血再灌注后，caspase-3的表达,在 2WKD+I/R组（A值：481±77）小于2WKC+I/R组（A值：1 033±46），而16WKD+I/R 组（A值：1 206±78）caspase-3的表达高于16WKC+I/R 组（A值：940±72），P<0.05；硝基酪氨酸的水平在 2WKD 组（A值：211±13 ）明显低于2WKC组（A值：409±12），但在16WKD组（A值：506±37）则高于16WKC组（A值：378±46），P<0.05。结论： STZ诱导急、慢性期糖尿病对心肌I/R损伤和细胞凋亡的影响呈现相反的作用，这可能是由于急、慢性期糖尿病心肌相反的ONOO-水平而引起的。     

Xaf1调节TNFR信号转导而诱导细胞凋亡的机制研究

目的： 利用基因开关调节的Xaf1-Saos诱导细胞株， 检测Xaf1对TNFR信号转导通路的影响，探索Xaf1与TNF-α协同诱导细胞凋亡的机制。方法： 以免疫印迹法和RT-PCR检测Xaf1对TNFR1 表达的影响，细胞周期 DNA 含量流式细胞术检测NF-κB对Xaf1诱导细胞凋亡的影响，gel mobility shift assay 检测NF-κB的DNA结合活性， luciferase 活性检测法及RT-PCR检测NF-κB的转录活性，激酶分析法检测SAPK/JNK 激酶的活性。结果： Xaf1不影响TNFR1蛋白及mRNA水平的表达，细胞内诱导活性的NF-κB可抑制Xaf1诱导的细胞凋亡， Xaf1的表达抑制TNF-α所介导的NF-κB的DNA结合活性和转录活性，也抑制了SAPK/JNK 激酶的活性。结论： Xaf1 对TNFR信号转导的抑制是Xaf1协同TNF-α诱导细胞凋亡的机制之一。     

STZ诱导糖尿病大鼠心肌VEGF表达及血管密度变化对缺血再灌注损伤的影响

 [目的]测定不同周期STZ诱导的糖尿病对心肌缺血，再灌注（I／R）损伤的影响及其与心肌VEGF表达及冠脉血管密度变化的关系。[方法]阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌I／R模型。分别用，TTC染色、免疫印迹分析及Morphometric分析方法，测定大鼠心肌I／R后梗死面积、VEGF表达及冠脉血管密度。[结果]STZ处理后2周，糖尿病组（2WD）心肌梗死面积比相应周期对照组（2WC）明显缩小；STZ处理后16周（16WD），梗死面积比相应对照组（16WC）增加；Morphometric分析显示，心脏的冠脉血管密度在2WD组比2WC组显著增加（28％），而16WD组比16WC组明显减少（33％）；血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达在2WD组比2WC组显著增加（30％），但在16WD组大鼠VEGF表达比16WC组明显减少。[结论]STZ诱导糖尿病早期、晚期对心肌I／R损伤呈现相反的作用。这可能是由于早、晚期糖尿病相反的心肌VEGF表达及冠脉血管密度改变而引起的。