转基因脑肿瘤小鼠模型中成体神经干细胞与脑肿瘤干细胞的克隆与鉴定

目的 从Tet-on转基因脑肿瘤小鼠模犁中分离鉴定成体神经干细胞和脑肿瘤干细胞.方法 分别从转基因小鼠肿瘤和室管膜下区取材,将细胞培养于含生长因子的无或含血清培养基.光镜下观察病理,相差显微镜和电镜下分别观察细胞形态及超微结构,流式细胞术榆测Hoechst33342阴性的SP细胞、染色体倍体和细胞周期,免疫荧光染色检测细胞球体及分化细胞表面标志物.结果 无血清培养条件下,肿瘤细胞和室管膜下区细胞均呈悬浮球状生长,含血清培养条件下贴壁分化.成体神经干细胞球细胞较小,形态相对较规则.电镜下两者均表现核质比高、细胞器不发达、具干细胞特征,但存细胞器发育上有所差异.肿瘤细胞球中异倍体细胞为26.77%.而神经球中细胞均为二倍体.免疫荧光染色两种细胞球中大部分细胞表达干细胞标志物Nestin,少数细胞表达分化标志物GFAP和NSE.贴壁后两者的大部分细胞表达分化标志物,且部分细胞共表达前体细胞标志.结论 Tet-on转基因脑肿瘤小鼠中存在具有自我更新和多向分化潜能的脑肿瘤干细胞和神经干细胞.     

PD大鼠模型的行为学评价和黑质-纹状体通路中单胺类神经递质的含量变化

目的建立帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型,观测和评价其行为学改变,检测和分析PD大鼠模型黑质-纹状体通路中单胺类神经递质含量变化。方法采用6-羟基多巴胺立体定向注射至成年SD大鼠单侧前脑内侧束,制作偏侧PD大鼠模型,观测和评价其行为学改变(悬尾测试、旋转行为的旋转速度、启动时间和维持时间),通过高效液相色谱法测定和分析单胺类神经递质的含量在PD大鼠模型黑质-纹状体通路中的变化。结果 (1)PD大鼠出现了尾僵直、少动、运动迟缓、震颤、竖毛、咬尾或足、姿势和步态不稳等异常行为;(2)悬尾测试对于评价PD模型没有统计学意义,旋转行为的旋转速度、启动时间和维持时间的结果具有统计学意义且呈时间依赖性;(3)PD大鼠模型毁损侧的黑质与纹状体部位的多巴胺(Dopamine,DA)和五羟色胺(Serotonin,5-HT)含量均降低,DA的含量具有逐渐下降的趋势,术后第2、3、4及5周黑质部位的DA含量相对于正常对照组分别下降62.96%、82.88%、92.71%、91.50%,纹状体部位的DA含量分别下降77.47%、91.39%、96.25%、96.18%;术后第3、4及5周黑质部位的DA含量平均下降(89.03±5.36)%(第3、4及5周的DA含量无统计学差异),纹状体部位的DA含量平均下降(93.61±2.79)%(第3、4及5周的DA含量无统计学差异)。结论 (1)PD大鼠模型具有类似人类PD的运动症状,除旋转速度作为旋转行为经典的行为学指标外,启动时间和维持时间可作为PD模型旋转行为的辅助指标;(2)PD大鼠脑内毁损侧的黑质和纹状体部位的DA和5-HT含量均降低。     

交感干臂丛间灰、白交通支的解剖学特点及其临床意义

目的:探讨交感干臂丛间交通支的分布特点及其临床意义.方法:选用33具成年防腐尸体,解剖并观测交感干与臂从交通支的走行分布特点.结果:1.颈中神经节或节间支与臂丛交通支多对称分布,至第5、6颈神经的42条交通支在第5、6颈椎横突水平内行自头长肌、颈长肌间沟后行入神经.2.星状神经节(或颈下神经节及胸l神经节)发出向内上方加入第7、8颈神经的交通支除1例外均对称分布.至C8神经的交通支与C8神经结合前51侧发出分支与C7,神经相交通,其中45侧穿过第7颈椎横突孔.至C7神经的交通支与C7神经结合前41侧发出分支与C6神经相交通,分支伴椎动脉经第6颈椎横突孔上行,29侧分支沿途发出许多细小纤维支至椎动脉及周围椎间、横突间关节.结论:1、交感干与臂丛间的交通支具有典型的分布特点,可为研究交感神经对臂从神经功能支配及颈椎前路扩大减压术时减少损伤提供解剖学资料.2、至C7神经的交通支分布特点可为临床上通过椎神经阻滞治疗顽固性颈痛提供解剖学依据.     

大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经干细胞

为了观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为神经干细胞(NSCs)的能力,本研究通过贴壁法培养大鼠BMSCs,体外培养扩增纯化后,在细胞传代时用含有表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、N2、B27的DMEM/F12的培养液制成细胞悬液,并进行诱导,观察诱导后细胞的形态及生长情况,用免疫荧光检测形成的细胞球的巢蛋白(nestin)的表达情况;形成的细胞球在含10%血清的培养液中进一步分化。结果显示:BMSCs在含EGF、bFGF、N2、B27的培养液中,逐渐形成nestin表达阳性的细胞球,在含血清的培养液中能分化为神经元样细胞、星形胶质样细胞及少突胶质样细胞。本研究结果提示经纯化的BMSCs能分化为NSCs,并具有进一步分化的能力。     

肘肌肘关节成形术的应用解剖学研究

目的:探讨肘肌的解剖学特征及其在肘关节成形术中的应用价值。方法:选用20例(40侧)上肢标本,其中5例(10侧)从腋动脉予以灌注乳胶。以层次解剖结合显微解剖的方法,对肘肌形态、血供和神经支配进行显微解剖观察。另选用5例上肢标本设计肘肌肘关节成形术,即肘肌填充桡骨小头切除术后的腔隙及肘肌嵌入到尺桡骨近端之间。结果:肘肌的形态似一把三角形挫刀;中副动脉是肘肌的重要营养动脉,外径(0.62±0.22)mm,与骨间返动脉存在恒定吻合支;桡神经肘肌支是肘肌的唯一支配神经。可应用中副动脉为营养血管的肘肌瓣设计肘肌肘关节成形术。结论:应用中副动脉为营养血管的肘肌瓣设计的肘肌肘关节成形术操作方便,便于临床应用。     

NGF和GDNF对大鼠嗅鞘细胞体外增殖和分化的影响

本研究旨在比较神经生长因子(NGF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对大鼠嗅鞘细胞(OECs)体外增殖和分化的影响。在体外分离培养大鼠OECs的培养液中不加神经营养因子(对照组)或加入不同的神经营养因子(NGF组和GDNF组),倒置显微镜下进行观察,并通过S-100免疫荧光组织化学染色检测各组大鼠OECs体外增殖和分化情况。结果显示:NGF组和GDNF组OECs增殖和分化明显好于对照组(P<0.01),NGF组又明显好于GDNF组(P<0.01)。这些结果提示NGF能促进大鼠OECs体外增殖和分化。     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂减少大鼠脑缺血模型caspase-3的表达

目的 :研究半胱氨酸蛋白酶caspase 3及calpain抑制剂干预治疗对大鼠局灶性脑缺血 /再灌注模型caspase 3表达的影响。方法 :大鼠随机分为经左侧侧脑室注射caspase 3抑制剂Ⅲ组 (DEVD组 )、calpain抑制剂Ⅰ组 (ALLN组 )、联合治疗组 (DEVD +ALLN组 )、溶剂二甲基亚砜对照组 (DMSO组 )以及左侧大脑中动脉缺血 /再灌注对照组 (MCAO组 ) ,诱导左侧大脑中动脉缺血 2h ,再灌注2 4或 48h ;再灌注 2 4h进行TTC染色观察梗死灶的形成情况 ;用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术 (TUNEL)检测鼠脑中的神经元凋亡情况 ;并分别通过原位杂交和免疫组化技术检测鼠脑中caspase 3mRNA及活性蛋白的表达。结果 :DMSO组的各项指标与MCAO组无明显差异 ;DEVD组或ALLN组缺血侧脑中细胞凋亡数、caspase 3mRNA及活性蛋白的表达均明显减少 ,联合治疗组作用更强。结论 :caspase 3与calpain抑制剂干预治疗可减少大鼠缺血再灌注脑区神经元凋亡和caspase 3的表达 ,从而产生神经保护作用 ,并具有潜在的临床应用价值。     

人脑星形细胞瘤P53基因突变及表达

人脑星形细胞瘤ｐ５３基因突变及表达夏春林杜子威黄强刘振延我们在对星形细胞瘤（ＡＳＡ）细胞谱系分型研究的基础上，应用聚合酶链反应产物－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和免疫组织化学方法，研究了人脑不同谱系ＡＳＡｐ５３基因突变及表达，以探讨ＡＳＡ发...     

Alzheimer病与星形胶质细胞分化及其相关基因研究进展

阿尔茨海默病 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)是中枢神经系统一种常见的退行性疾病 ,是老年前期和老年期痴呆的最主要原因 ,占痴呆综合征的 50 %～ 60 %。以全脑性萎缩、老年斑(ｓｅｎｉｌｅｐｌａｑｕｅ,ＳＰ)、神经元纤维缠结 (ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙｔａｎｇｌｅ,ＮＦＴ)、神经元空泡样变和缺失为病理特征。临床表现主要为进行性记忆和认知障碍、言语障碍、精神运动异常等症状 ,查体一般不能发现明确定位体征。自从本世纪初ＡｌｏｉｓＡｉｚｈｅｉ ｍｅｒ首例报道进行性痴呆患者 ,并以Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病命名…