MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响

 [目的]探讨MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响。[方法]设计合成两种针对MDR1 mRNA的siRNA双链分子（#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA）,并转染入COLO 320DM和HT-29结肠癌细胞,观察其对结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp表达的影响。并分别与5-FU、阿霉素和长春新碱等抗肿瘤药联用,观察结肠癌细胞活力的变化。用阿霉素处理后,观察转染MDR1 siRNA结肠癌细胞的细胞内阿霉素累积浓度的变化。RT-PCR检测细胞MDR1 mRNA的表达,免疫印迹法检测细胞P-gp的表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞内阿霉素累积浓度。[结果]#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA均可抑制COLO 320DM结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达,其最低有效浓度分别为5nmol/L和25nmol/L。同时MDR1 mRNA和P-gp表达的抑制伴随着抗肿瘤药（5-FU、阿霉素和长春新碱）对COLO 320DM结肠癌细胞毒性的增强和细胞内阿霉素累积浓度的增加。而在对照HT-29结肠癌细胞却观察不到此效应。[结论]MDR1 siRNAs能特异逆转结肠癌细胞的多药耐药性,为MDR1/P-gp依赖的多药耐药性结肠癌的治疗提供了一条新的途径。     

胰岛素受体亚型改变及相关通路活化在糖尿病小鼠肠上皮细胞过度增殖中的作用

 目的:探讨胰岛素受体亚型改变及其相关下游通路活化情况在糖尿病小鼠肠上皮细胞异常增殖中的作用。方法:用腹腔注射链脲霉素的方法制作糖尿病小鼠模型,采用增殖细胞核抗原标记法比较糖尿病小鼠及对照组小鼠肠上皮细胞的增殖情况。利用RT-PCR法测定胰岛素受体亚型表达比例在2组中的差异。采用real-time PCR及Western blot法分别从mRNA和蛋白质水平检测2组之间胰岛素受体相关通路各分子MEK1/2、ERK1/2、PI3K以及Akt的表达情况。结果:糖尿病组小鼠的小肠上皮细胞增殖指数显著升高(P<0.05),且细胞中胰岛素受体亚型IR-A/IR-B的比值也明显升高(P<0.05)。糖尿病小鼠肠上皮细胞中MEK1、MEK2和ERK1/2的mRNA水平及磷酸化蛋白水平均高于对照组(P<0.05)。结论:糖尿病小鼠肠上皮细胞过度增殖可能与其中胰岛素受体亚型IR-A/IR-B的比值增高及其相关MEK/ERK通路的激活有关。     

慢性浅表性胃炎的组织病理学分析--附120例报告

目的:从病理学角度分析120例幽门螺杆菌阳性慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)的组织学特征。方法:用电子胃镜对确诊的120例幽门螺杆菌阳性CSG患者的炎症活动性、慢性炎症、血管病变、上皮损伤、腺体萎缩、不典型增生及肠化生等组织形态学指标进行回顾性分析。结果:CSG病人的黏膜具有急性炎症、慢性炎症、血管病变、上皮损伤,分别高达97．5％(117／ 120)、98．3％(118／120)、95．8％(115／120)、70％(84／120),腺体萎缩、不典型增生及肠化生的发生率约为35％-39．2％,组织学改变均以1级占多数。结论:急、慢性炎症细胞浸润,血管病变及上皮损伤是幽门螺杆菌阳性CSG的组织学基础,其慢性黏膜病变的组织学改变均以1级为主。     

瘦素对胃癌细胞系SGC7901增殖和凋亡的影响

目的观察人胃癌细胞系SGC7901瘦素及瘦素受体的表达及瘦素对SGC7901增殖及凋亡的影响。方法免疫组化和RT-PCR检测SGC7901瘦素和瘦素受体的表达,噻唑蓝比色实验观察瘦素对SGC7901的增殖作用,流式细胞仪检测瘦素对细胞周期及凋亡的影响,RT-PCR方法半定量检测瘦素对促凋亡基因bax mRNA表达的影响。结果SGC7901既表达瘦素又表达瘦素受体,重组瘦素呈剂量依赖性地促进细胞的增殖,并明显抑制细胞的凋亡,瘦素可抑制促凋亡基因bax mRNA的表达。结论瘦素可能以自分泌方式调节人胃癌细胞系SGC7901的增殖及凋亡。     

胶囊内镜688例临床分析

目的：评估胶囊内镜在消化系统疾病中的诊断价值。方法：回顾性分析2008年3月至2019年1月中山大学孙逸仙纪念医院胶囊内镜检查的688例患者的临床资料。结果：688例患者中,检查成功率为99.71%;对上消化道、小肠及结肠疾病检出率分别为37.90%、58.89%及6.12%;对小肠疾病的检出率,男性、青年克罗恩病、消瘦、消化道出血明显高于其他患者（P<0.05）,且明显优于CT、MR和（或）全消化道钡餐检查（P<0.05）。胶囊内镜的诊断与临床诊断符合率为47.23%,对消化道出血、不明原因消化道出血有明显优势（P<0.05）。结论：胶囊内镜是一种有效的消化系统疾病检查手段,尤其对小肠疾病及消瘦、消化道出血的患者有较高的诊断价值。     

贲门失弛缓症治疗进展

贲门失弛缓症的传统治疗以开放式外科手术为主。近年随着内镜技术的发展,内镜下球囊扩张治疗逐渐成为贲门失弛缓症的首选治疗方法。此外,内镜下肉毒素注射治疗及微创手术治疗也已应用于临床,并取得肯定的疗效。本文就近年来贲门失弛缓症的治疗进展作一综述。     

靶向MDR1基因的RNAi稳定逆转结肠癌细胞的多药耐药性

目的： 探讨靶向多药耐药蛋白-1 (MDR1)基因的RNA干扰（RNAi）对结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性的稳定逆转作用。方法：分别构建含编码#4029 MDR1 siRNA和#4123 MDR1 siRNA的质粒载体,并转染COLO 320DM结肠癌多药耐药细胞,采用G418筛选克隆细胞,经实时定量RT-PCR及Western blotting鉴定阳性克隆细胞。MTT法检测细胞活力并计算各抗肿瘤药的IC50。流式细胞术检测细胞周期并计算PI/AI值。流式细胞仪测定细胞内adriamycin药物累积浓度。结果：阳性克隆细胞（clone #4029和clone #4123）的MDR1 mRNA和P-gp的表达均被抑制。COLO 320DM结肠癌亲本细胞adriamycin及vincristine的IC50分别为9.616 μmol/L和0.358 μmol/L,而clone #4029的IC50分别降至1.094 μmol/L和0.023 μmol/L（P<0.01）,clone #4123的IC50分别降至0.780 μmol/L和0.035 μmol/L（P<0.01）。COLO 320DM结肠癌亲本细胞用adriamycin及vincristine处理后其PI/AI值分别为5.68及9.59,而clone #4029的PI/AI值分别降至2.74及3.59（P<0.01）,clone #4123的PI/AI值分别降至2.75及3.24（P<0.01）。COLO 320DM结肠癌亲本细胞用10 μmol/L adriamycin处理后细胞内adriamycin累积浓度为27.92,而clone #4029及clone #4123细胞内adriamycin累积浓度分别增加至187.24和215.57（P<0.01）。结论：稳定转染含编码MDR1 siRNA的质粒载体能稳定逆转结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性。     

端粒酶、细胞凋亡与胃癌

肿瘤发生的分子机制至今尚未完全阐明，尽管已发现许多肿瘤的发生与某些基因的改变有关，但其阳性检测率都较低，且不同肿瘤的发生与基因改变之间的关系均不是简单的一一对应关系，从而给肿瘤的诊断与治疗带来很大的困难。最近发现端粒及端粒酶与肿瘤之间关系密切，使其成为近期生命科学领域研究的热点。     

黏附分子CD44v3和血管内皮生长因子C在胃癌组织中的表达及其意义

Objective To investigate the expression of CD44v3 and VEGF-C in human gastric cancers and the clinical significance. Methods The expression of CD44v3 and VEGF-C was detected by immunohistochemistry SP method in 92 gastric cancer tissues. Results Positive immunohistochemical stain for CD44v3 was identified in 27.2% of gastric cancer tissues. There was no correlation found among the expression of CD44v3 with sex, location,depth of invasion, WHO type, Lauren type as well as distant metastasis (all P ＞ 0. 05 ). The expression of CD44v3 was positively correlated with lymph node metastasis and tumor differentiation( all P ＜ 0. 05 ). Positive immunohistochemical stain for VEGF-C was identified in 48.9% of gastric cancer tissues. There was no correlation found among the expression of VEGF-C with sex,location, tumor differentiation, depth of invasion, WHO type, as well as distant metastasis ( all P ＞ 0. 05 ). The expression of VEGF-C was positively correlated with lymph node metastasis and Lauren type ( all P ＜0. 05). Cox-Regression reflected that only the lymphatic metastasis situation correlated with the life ratio( P =0. 015). Conclusion The expression of CD44v3 and VEGF-C could suggest the progression and metastatic potential value of gastric cancer,but didnt correlate with the life ratio. There was no cooperation between CD44v3 and VEGF-C in promoting gastric cancer metastasis.