胆汁双向电泳差异分析样本纯化制备方法的建立

目的:建立一种可靠、高效的胆汁样本纯化制备方法用于胆汁蛋白质组双向电泳差异分析。方法:采用梯度SDS-PAGE凝胶电泳的方法比较丙酮、丙酮:甲醇混合液及丙酮:甲醇:磷酸三丁酯混合液及非离子型脱脂剂(CleanasciteTM HC100)的脱脂效果,微量透析管及微量超滤管的脱盐效果及胶体考马斯亮蓝凝胶染色的灵敏度。采用双向荧光差异凝胶电泳比较本组方法与2D-Clean-up Kit对胆汁样本的纯化处理效果。结果:三种沉淀脱脂方法中以丙酮沉淀法效果最佳;非离子型脱脂剂的脱脂效果理想且蛋白回收率高于前者(52.6%比43.7%)。透析法与超滤法脱盐效果均理想,后者耗时短且可以实现蛋白浓缩。胶体考马斯亮蓝染色的灵敏度为10ng。本组方法及2D-Clean-up Kit纯化处理后的胆汁样本均可获得理想的双向电泳图谱,二者分别分离到854和615个蛋白质点。结论:本研究建立了可靠、高效的胆汁样本纯化制备方案,经其处理后的胆汁样本能够满足凝胶双向电泳分析对样本的要求。     

老年肺癌的外科治疗(附209例分析)

目的：探讨老年肺癌的临床特点、手术与预后的关系。方法：对我科１９８５年４月至１９９８年１１月手术治疗的２０９例老年肺癌进行回顾性分析。结果：术后１，３，５年生存率分别为５３％，３８．５％和３５％。结论：老年肺癌病人并存症多，病情较晚，但不是手术绝对禁忌证，经积极围手术期处理，手术仍是治疗老年肺癌的较好方法。     

胆道镜联合钬激光碎石治疗肝内胆管结石的临床体会

目的:探讨腹腔镜下胆道镜联合钬激光治疗肝内胆管结石的效果及临床价值。方法:回顾分析2008年6月至2012年6月124例胆道结石患者的临床资料,其中60例行腹腔镜下胆道镜联合钬激光碎石术(观察组),64例行传统开腹手术,术中配合胆道镜取石,未使用钬激光(对照组)。结果:观察组中58例(96.7%)结石完全取净,手术时间平均(98.93±10.66)min,平均住院(8.3±1.7)d,术后残余结石2例,经T管窦道胆道镜再次取石成功。对照组中38例(59.4%)取净结石,手术时间平均(122.8±13.43)min,平均住院(13.98±1.49)d;残余结石26例,术后经T管窦道胆道镜再次取石,其中6例经2次取石,3次、4次取石及再次开腹手术各2例。两组患者手术时间及住院时间差异有统计学意义(P<0.01),术后胆道出血、肝功能异常、腹水等并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:腹腔镜下胆道镜联合钬激光治疗肝内胆管结石具有患者创伤小、康复快、碎石确切、安全有效等优点,为治疗肝内胆管结石开辟了新的治疗途径。     

P27kip1在胆管癌组织中的表达及意义

目的 探讨细胞周期抑制蛋白P27kip1在胆管癌组织中的表达及与胆管癌各项临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化物酶复合物法(SP法)检测43例胆管癌组织标本及20例伴慢性胆管炎的胆管壁组织中P27kip1的表达,结合临床病理资料进行分析.结果 P27kip1在胆管癌组织中的阳性表达率为30%(13/43),而伴慢性炎性反应的胆管组织中阳性表达率为80%(16/20),差异有统计学意义(P＜0.05);P27kip1蛋白表达与胆管癌的分化程度、有无淋巴结或远处转移以及临床分期显著相关(P＜0.05).结论 胆管癌中P27kip1蛋白低表达可能与胆管癌的发生发展有关.     

基于超完美图着色的存储分配算法

为了提高性能,一些应用需要在编译时对主存进行针对性的管理.提出了基于超完美图的主存分配方法,其基本思想是通过生命周期分割将一般的相干图转换为超完美图,从而可以使用已有的线性时间的区间着色算法完成主存的分配.分别基于自底向上的积极生命周期分割策略和自顶向下的被动生命周期分割策略,实现了两个分配算法.初步评测表明,我们的分配算法是有效的编译时管理主存手段.     

纳米化疗药物对裸鼠胆管癌移植瘤中survivin和p53表达的调节

目的 通过测量纳米化疗药物干预裸鼠人胆管癌肿瘤组织中survivin和p53表达变化的情况,探讨其抑制肿瘤的机制.方法 体外培养人胆管癌细胞QBC939,以2X107个细胞分别接种裸鼠.20d后将24只裸鼠随机分3组,每组8只即空白对照组,纳米磁靶向性药囊+内置支架,5-FU.记录干预后35d各组肿瘤体积大小,并处死裸鼠用肿瘤组织进行RT-PCR和western blot检测各组中survivin和p53 mRNA和蛋白的表达情况.结果 对照组,5-Fu组,纳米磁药囊组在治疗后35天肿瘤体积分别为2256.1±267.1,2096.5±237.9,1392.2±189.survivin的mRNA和蛋白表达情况依次降低,且有统计学差异(P<0.001),p53则相反.结论 纳米化疗药物对裸鼠胆管癌移植瘤有明显抑制作用,下调survivin和对p53的上调可能是其抑瘤机理之一.     

乙状结肠肿瘤的诊断与治疗

目的　探讨乙状结肠肿瘤的诊治方法。方法　回顾分析了 198例乙状结肠肿瘤诊疗经过。结果　 198例中恶性肿瘤 193例 (97.5 %) ,良性肿瘤 5例 (2 .5 %)。其临床表现依次为便血(6 3.7%) ,排便习惯改变 (32 .7%) ,腹痛 (2 9.3%) ,腹胀 (11.5 %) ,急性肠梗阻 (8.6 %) ,包块 (6 .8%)。181例经纤维结肠镜明确诊断 ,17例经剖腹探查明确诊断。全组均行手术治疗。其中根治性切除140例 (70 .6 %) ,姑息性切除 34例 (17.2 %) ,造瘘 18例 (9%) ,单纯探查 6例 (3.2 %)。发生肠瘘 4例(2 %) ,无手术死亡病例。结论　乙状结肠肿瘤临床表现无特异性 ,对不明原因便血及排便习惯改变应及时行结肠镜检查以明确诊断。根治性切除是乙状结肠肿瘤的最佳治疗方法。伴孤立肝转移灶、可一并切除。乙状结肠肿瘤并急性肠梗阻可行I期结肠切除吻合术。     

幼年特发性关节炎血清维生素D水平与疾病活动度及骨密度相关性分析

目的　检测幼年特发性关节炎（JIA）患儿血清25羟维生素D3［25（OH）D3］水平, 研究维生素D与JIA疾病活动度及骨密度的关系。方法　按照2001年国际风湿病学联盟（ILAR）诊断标准,于2015年1月至2017年1月纳入重庆医科大学附属儿童医院风湿免疫科110例JIA患儿,其中女58例、男52例,年龄（9.04±3.37）岁。检测JIA患儿血清25（OH）D3、血浆PTH水平,双能X线检查评估骨密度。评价患儿疾病活动状态,并通过JADAS27评分衡量疾病活动度。比较JIA患儿血清25（OH）D3水平与其他指标之间的关系。结果　110例JIA患儿血清中25（OH）D3水平为（49.8±15.3） μmol/L, 其中59例（53.6%）为维生素D缺乏状态, 43例（39.1%）表现为维生素D不足。活动期JIA 25（OH）D3水平低于缓解期（t＝5.162,P＜0.001）,与JADAS27评分无相关性（r＝-0.72,P＞0.05）。维生素D缺乏状态下JIA患儿骨密度（Z值）低于维生素D充足状态（t＝3.791,P＜0.05）。未使用皮质激素（GC）治疗的JIA患儿25（OH）D3水平显著高于使用GC治疗者（t＝2.823,P＜0.01）。结论　JIA患儿普遍存在血清维生素D水平低下。处于疾病活动期、使用激素治疗的患儿血清25（OH）D3水平低下尤为显著,维生素D缺乏状态下JIA患儿骨密度降低。     

5-氟尿嘧啶纳米磁性颗粒在荷瘤鼠体内靶向性分布

目的研究5-氟尿嘧啶（5-FU）纳米磁性颗粒在荷瘤裸鼠体内的靶向性分布。方法制备荷瘤小鼠异位肝癌模型（荷瘤鼠），随机分3组，每组8只。A组：5-FU原液治疗组；B组：单纯5-FU纳米磁性颗粒治疗组，无磁场应用；C组：实验组，在肿瘤内部建立300高斯（GS）的磁场，药物应用同B组。采用高效液相色谱（HPLC）分析法检测离体组织中5-FU药物浓度，原子吸收光谱法（AAS）测定荷瘤鼠组织中的铁浓度，磁共振成像（MRI）检测5-FU纳米磁性颗粒在荷瘤鼠体内组织分布。结果在肿瘤组织内建立内磁场后，尾静脉注射5-FU纳米磁性颗粒（250mg／kg），与无磁场的相同药物治疗组及单纯5-FU对照组比较，HPLC检测荷瘤鼠的肿瘤组织中5-FU浓度显著增加（P〈0．01），AAS检测肿瘤组织中铁浓度也显著增加，肿瘤组织MRI的T2加权像发生变化，呈现低信号。结论在磁场引导下，5-FU纳米磁性颗粒中磁性载体和所载药物在荷瘤鼠体内具有肿瘤靶向性分布。     

靶向PEG10的siRNA真核表达载体对裸鼠肝癌移植瘤生长的影响

目的探讨靶向PEG10的siRNA真核表达载体(psiRNA-PEG10)对裸鼠人肝癌移植瘤生长的影响。方法建立人肝癌细胞HepG2的荷瘤裸鼠模型,在接种后第14天分别将psiRNA空载体和psiR-NA-PEG10瘤内多点注射进行治疗,观察肿瘤大小变化、组织形态学及超微病理改变。结果psiRNA-PEG10治疗组肿瘤生长受到明显抑制,与生理盐水组和psiRNA组比较差异有显著性(P<0.001),抑瘤率明显高于其他两组,电镜下可见明显的细胞凋亡。结论靶向PEG10的siRNA真核表达载体对裸鼠肝癌移植瘤生长有抑制作用。