天麻素对体外模拟脑缺血损伤大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用

目的：观察中药天麻素对培养的正常及缺血大鼠脑微血管内皮细胞（BMEC）的影响，以探讨天麻素对BMEC的作用。方法：采用体外培养的BMEC，模拟脑缺血损伤，观察天麻素对其活性、生存率和一氧化氮（NO）的影响。结果：缺血损伤模型BMEC活性及生存率较正常对照组明显降低；不同剂量天麻素对正常对照组BMEC活性、生存率及NO含量有升高趋势；正常对照组不同剂量天麻素BMEC活性较缺血损伤模型组活性有明显升高（P〈0．05）；天麻素高剂量可明显提高缺血损伤BMECNO含量（P〈0．05）。结论：天麻素各实验剂量可增强缺血损伤BMEC活力，提高受损内皮细胞（EC）的生存率；促使ECNO分泌增加。提示天麻素对体外培养的大鼠BMEC缺血损伤具有一定的保护作用。     

鹌鹑高尿酸血症模型建立初探

高尿酸血症侵犯各个种族 ,广泛见于世界各地。随着人类饮食结构的变化 ,食物中蛋白质增高 ,促使了高尿酸血症导致痛风病的增加。因而为给临床研制和评估治疗痛风药物及探讨高尿酸血症的发病机理 ,提供一个接近于人类尿酸代谢的高尿酸血症动物模型尤显重要。为此 ,我们以鹌鹑作为研究对象 ,试图寻找尿酸代谢途径与人类较一致的动物塑造高尿酸血症的模型。材　料　和　方　法1　材料1 1　实验对象　迪法克品系鹌鹑 ,雄性 ,体重 170 -190ｇ ,北京市种禽公司鹌鹑场提供 ,购来后在本室饲养 3- 5ｄ后用于实验。1 2　药品和试剂　尿酸 (ｕｒｉｃａ…     

阿糖胞苷对原代培养的大鼠大脑皮层神经元的影响

阿糖胞苷(1-β-D-arabinofuranosylcytosine,Ara-C)是治疗急性白血病最常用的药物之一。Ara-C可诱导细胞凋亡。体外神经元的原代培养中,常在适当时间加入一定剂量的Ara-C作为细胞分裂抑制剂以抑制非神经元的增殖,从而提高神经元的产率。但Ara-C对正常培养的细胞的活性有一定的毒性,且随时间和剂量呈正相关。     

糖皮质激素诱发的大鼠骨质疏松与骨中微量元素的关系

骨质疏松症是老年人常见的骨病之一，严重危害老年人的身体健康。钙、磷代谢与骨质疏松的关系已为大家所熟知，但骨中其他无机元素与骨质疏松的关系国内报导尚少。为了探讨骨中微量元素与骨质疏松的关系，我们建立了糖皮质激素性骨质疏松动物模型，观察了大鼠骨及血清中钙、磷及微量元素的变化。骨质疏松症大鼠骨中钙、磷含量较对照组明显降低（Ｐ＜０．０５），铜、钼、铬、硫等元素含量也有明显减少。骨中锰含量显著减少，骨盐的动员可能与锰的丢失密切相关，有学者认为锰在内分泌、神经、酶系统中发挥的作用与中医“肾”的功能类似，是中医“肾”的物质基础。骨质疏松症属中医“肾萎”的范畴，其病因为肾虚，本研究观察到的骨中钙、磷与锰的变化进一步证实了这一学说。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核胶状质突触小球的超微结构

用透射电镜观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核胶状质突触小球的各种突起成分及突触联系。突触小球的中央轴突终未与周围两类 (一、二型)树突棘,树突干形成非对称的轴树突触。含突触小泡的二型树突棘、树突干与不含小泡的一型树突棘、树突干形成对称的树树突触,并与中央轴突终末形成树轴突触。周围轴突终末(P)与中央轴突终末形成对称的轴轴突触,并与小球内的树突形成对称的轴树突触。     

中药抗呆Ⅰ号对体外模拟脑缺血再灌注损伤大脑皮质神经元的保护作用

目的观察体外培养的大鼠大脑皮层神经元在模拟脑缺血再灌注后的变化以及中药抗呆Ⅰ号的影响. 方法先对分离纯化培养的大脑皮层神经元进行体外模拟脑缺血再灌注损伤模型的建立,然后采用 MTT法测定神经元的活性和存活率,用台盼蓝染色法测定其死亡率,用比色法测定乳酸脱氢酶( LDH)的漏出率,用组化染色法测定一氧化氮合成酶( NOS)的活性. 结果体外培养的大鼠大脑皮层神经元随缺血和再灌注时间的延长细胞的活性和存活率逐渐下降、死亡率逐渐升高、培养液中 LDH的漏出率逐渐升高、细胞 NOS表达强阳性细胞数在缺血 4 h(34.6± 3.847)和再灌 3 h( 20.6± 3.362)时显著增高.模型组与正常组相比,差异有非常显著性意义( t=13.236, 8.038, P< 0.01).抗呆Ⅰ号可影响其上述指标的变化. 结论抗呆Ⅰ号可能通过防止氧化磷酸化脱耦联而保护线粒体、防止脂质过氧化及通透性增加而保护细胞膜、抑制 NOS活性的反应性增强而防止一氧化氮( NO)及其衍生的毒性自由基的损伤等途径而发挥对神经元的保护作用.     

抗呆I号对体外模拟脑缺血再灌注损伤星形胶质细胞分泌功能的影响

目的:观察体外培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞(Ast)在模拟脑缺血再灌注后分泌脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、热休克蛋白70(HSP70)和白细胞介素6(IL-6)的变化以及中药抗呆Ⅰ号的影响。方法:实验于2002-03/2004-05在北京中医药大学完成。在大鼠大脑皮质Ast分离纯化培养的基础上体外模拟脑缺血再灌注,采用免疫细胞化学方法来观察受损Ast在缺血4h,再灌注3,18,24,36,48,72h后分泌BDNF,GDNF,HSP70和IL-6的动态变化及抗呆Ⅰ号的作用。结果:①体外培养的大鼠大脑皮质Ast在体外模拟脑缺血再灌注损伤后其分泌BDNF,GDNF,HSP70和IL-6的能力增强。②抗呆Ⅰ号可使受损Ast的分泌功能更加增强。结论:①体外模拟脑缺血再灌注使受损的Ast发生反应性胶质化,表现为分泌神经营养因子、炎性细胞因子及应激反应蛋白的能力增强。②抗呆Ⅰ号通过增强Ast的分泌功能来保护和修复受损的神经组织。     

抗呆合剂对小鼠脑缺血再灌注模型脑内LPO、SOD及海马CA1区细胞的影响

研究采用小鼠反复脑缺血合并低血压模型 ,发现 7d时其脑内过氧化脂质(LPO)含量增高 ,SOD活力降低 ;1 0d时 ,海马CA1区神经元数量明显减少。抗呆合剂可对抗这种变化 ,减轻脑缺血再灌损伤 ,表明抗呆合剂的脑保护作用部分源于其自由基清除作用。     

局灶性脑缺血再灌注后大鼠血浆和海马皮质醇含量变化

目的:探讨脑缺血再灌注后糖皮质激素与海马神经元损伤的关系,以及糖皮质激素对卒中后痴呆发病的影响。方法:采取大脑中动脉阻塞模型,通过放射免疫方法测定脑缺血再灌注后模型大鼠再灌注2h、6h、12h和24h不同时点的血浆和海马皮质醇含量变化。结果:模型组在再灌注4个时点糖皮质激素含量都有增高,同假手术组、正常组相比有显著差异(P<0.05)。血浆、海马中皮质醇含量都以再灌注6h最高。HE染色海马神经元损伤随再灌注时点的延长,呈进行性加重。结论:脑缺血再灌注后24h内存在血浆、海马皮质醇含量的增高,这可能是加重海马神经元损伤,引发卒中后痴呆发生的原因之一。     

健脑安对大鼠海马神经元糖皮质激素受体的影响

背景:先前实验中已经证实补肾活血化痰中药健脑安可抑制脑缺血再灌注后2～24h内糖皮质激素含量增高,降低高糖皮质激素的促神经细胞凋亡毒性作用。这一作用是否在受体环节也有影响尚不清楚。目的:观察中药健脑安对糖皮质激素受体的干预作用,进一步明确健脑安保护脑缺血再灌注后海马神经细胞的作用靶向;并与复方阿米三嗪进行阳性对照。设计:随机对照动物实验。单位:北京中医药大学中心实验室。材料:实验于2002-07/2003-03在北京中医药大学中心实验室进行。取SD雄性大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、治疗组、阳性对照组和拮抗剂组5组,每组16只,每组又分为再灌注2,6,12和24h4个时点,每个时点4只。方法:①给药:除模型组外,其他4组大鼠于造模前7d开始灌胃给药,1次/d。假手术组给予7μL/(g·d)蒸馏水;阳性对照组予复方阿米三嗪7.39mg/(kg·d);治疗组予健脑安(肉苁蓉、石菖蒲、大黄等组成)生药6.7g/(kg·d);拮抗剂组给予糖皮质激素受体拮抗剂米非司酮10g/(kg·d),7μL/g。②给药7d后用大脑中动脉阻塞线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,假手术组麻醉后,剥离颈总动脉后缝合,不予进栓线。主要观察指标:各组在再灌注相应时间点处死大鼠取脑,利用免疫组化方法观察大鼠糖皮质激素受体蛋白表达的变化,计算CA2区3个200倍视野内阳性细胞数。结果:80只大鼠全部进入结果分析。假手术组糖皮质激素受体表达损伤侧与健侧双侧对称,糖皮质激素受体表达无明显差别。模型组、治疗组、阳性对照组、拮抗剂组损伤侧较健侧糖皮质激素受体表达明显减少,亦明显少于假手术组(P<0.05)。治疗组、阳性对照组、拮抗剂组在再灌注各时间点的糖皮质激素受体表达量无明显变化,各组与模型组相比差异不显著(P>0.05)。结论:健脑安对糖皮质激素受体和糖皮质激素含量的调节有选择性,不能调节糖皮质激素受体的表达,与复方阿米三嗪相似;但健脑安可通过降低血浆和脑组织中糖皮质激素含量,发挥对脑缺血再灌注后的神经细胞的保护作用。