抗呆合剂对小鼠脑血管性学习记忆障碍的保护作用

用反复脑缺血再灌合并低血压造成小鼠学习记忆障碍模型，以跳台法、水迷宫法观察抗呆合剂对小鼠脑缺血再灌后学习记忆功能的改善作用，结果显示抗呆合剂可改善脑缺血再灌损伤造成的学习记忆障碍。     

以天麻和钩藤为主的中药制剂干预体外模拟脑缺血再灌注损伤大鼠碱性成纤维细胞生长因子及其受体的表达

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子及其受体在体外模拟脑缺血再灌注损伤中的表达变化及以天麻和钩藤为主的中药制剂——抗呆Ⅰ号对其的影响。 方法：实验于2002-03／2004-04在科学实验中心完成。先分别进行大鼠大脑皮质星形胶质细胞和神经元的分离纯化培养及体外模拟脑缺血再灌注损伤模型的建立，然后分别进行下列实验：①按随机数字表法将传代后培养5d的星形胶质细胞分为正常对照组、缺血再灌注模型组和缺血用药组（应用抗呆Ⅰ号），在体外模拟脑缺血4h和再灌注3h，18h，24h，36h，48h和72h后行碱性成纤维细胞生长因子的免疫细胞化学染色。②用再灌注18h后收集的星形胶质细胞条件培养液、经抗呆Ⅰ号作用的星形胶质细胞条件培养液及星形胶质细胞条件培养液与抗呆Ⅰ号联合应用以1：5的浓度来培养损伤后的神经元。再对其培养的神经元行碱性成纤维细胞生长因子受体的免疫组化染色。 结果：①体外培养大鼠的大脑皮质星形胶质细胞在模拟脑缺血再灌注损伤后各时相点分泌碱性成纤维细胞生长因子的能力均显高于正常对照组（P〈0．05—0．01）；除再灌注72h外，其余各时相点缺血用药组碱性成纤维细胞生长因子的表达水平均显高于缺血再灌注模型组（P〈0．05—0．01）。②星形胶质细胞条件培养液组、经抗呆Ⅰ号作用的星形胶质细胞条件培养液组和联合应用组脑缺血再灌注损伤后各时相点的碱性成纤维细胞生长因子受体表达水平大多显高于缺血再灌注模型组（P〈0．05-0．01），均在再灌注18h时达到高峰，其作用强度为经抗呆Ⅰ号作用的星形胶质细胞条件培养液〉联合应用〉星形胶质细胞条件培养液。 结论：体外模拟脑缺血再灌注损伤使星形胶质细胞表达碱性成纤维细胞生长因子的能力增强，星形胶质细胞条件培养液能促进受损神经元碱性成纤维细胞生长因子受体的表达。抗呆Ⅰ号可增强受损神经组织的分泌功能，促进其损伤后的修复。     

抗呆Ⅰ号对体外模拟脑缺血再灌注损伤海马神经元凋亡调控基因表达的影响

采用免疫细胞化学法,观察体外模拟脑缺血再灌注损伤对原代培养海马神经元凋亡调控基因bcl-2和bax的表达及抗呆Ⅰ号(由天麻素等中药提取物组成)的影响.结果发现,脑缺血再灌注损伤可引起海马神经元bcl-2表达减少和bax表达增加,抗呆Ⅰ号可上调神经元bcl-2的表达和下调bax的表达,表明抗呆Ⅰ号能通过调节缺血再灌注损伤神经元凋亡调控基因的表达,对缺血再灌注损伤神经细胞起到一定的保护作用.     

大鼠脑皮质神经元的发育——超微结构研究

本文对大鼠出生前、后的大脑皮质神经元发育进行了光镜和电镜的研究。妊娠11天胚胎(E_(11))端脑泡由充满游离的单个或多聚核蛋白体的神经上皮细胞组成。其呈放射状紧密排列,近神经管腔处有分裂细胞存在。E_(15)时,脑泡壁细胞排列出现四层结构。在E_1,尤其明显,从内向外为室管膜层、套层、皮质板和边缘层。除室管膜层外,均存有分化不一的迁移细胞。核染色质由分布不均的细颗粒组成,核质密度低,含1—2个核仁,胞质含大量多聚核蛋白体。可见粗面内质网、线粒体、少数光面小泡。出现轴突而树突正在形成。出生后5天(P_5),皮质内未成熟神经元胞质内粗面内质网池增多,偶见3—4行排列。细胞开始散开,突触正在形成。从P_(12)到P_(19),神经元逐渐成熟。核染色质很细,核质电子密度低,大多含一个核仁。细胞质内见成行排列的粗面内质网,多个发达的高尔基复合体,丰富的多聚核蛋白体及微管、神经微丝、膜下囊等。并见多个轴体突触。细胞之间被神经毡充满。P_(34)到P_(51),神经元发育更完善。本文提示在神经元发育的不同阶段,细胞的不同组合排列和细胞核、核蛋白体、粗面内质网、高尔基复合体和神经突起等的超微结构变化,在作为细胞分化、成熟的标志中,均有特殊意义。此外,对形态结构的变化与功能关系进行了讨论。     

大鼠拟血管性痴呆模型的建立及中药9602防治作用初探

用反复夹闭双侧颈总动脉(CCA)结合腹腔注射硝普钠将血压降低到50mmHg左右的方法复制了大鼠拟血管性痴呆的模型。结果表明脑缺血再灌注后7 d,行为学实验显示模型组大鼠出现明显的学习记忆障碍;形态学观察发现海马CA1区出现明显的细胞缺失,而CA3区无明显变化。中药9602可明显减轻脑缺血对海马的损伤,改善脑缺血引起的学习记忆障碍的作用。     

短暂性前脑缺血-再灌注后小鼠海马星形胶质细胞bcl-2和bax蛋白表达的动态变化及抗呆Ⅰ号的影响

应用免疫组织化学方法观察抗呆Ⅰ号对小鼠前脑缺血再灌注损伤海马星形胶质细胞表达bcl-2和bax动态变化的影响,探讨其与缺血性神经元的联系.结果发现:前脑缺血再灌注3～7 d bcl-2表达呈强阳性.再灌注7～10 d bax表达呈强阳性.用药组bcl-2和bax的表达较模型组均减弱.而正常对照组和假手术组无bcl-2和bax的表达.且星形胶质细胞表达bcl-2和bax的强弱与神经细胞的存亡有关.本实验提示:前脑缺血再灌注后海马反应性星形胶质细胞表达bcl-2和bax呈动态变化,抗呆Ⅰ号对缺血再灌注损伤星形胶质细胞和神经细胞有良好的保护作用.     

抗呆合剂对小鼠缺血再灌注脑内氨基酸、乙酰胆碱酯酶活力的影响

反复脑缺血再灌注后５０ｍｉｎ,小鼠脑内谷氨酸（Ｇｌｕ）、天冬氨酸（Ａｓｐ）均升高,γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）,也随之升高。抗呆合剂大、小剂量均可抑制Ｇｌｕ、Ａｓｐ的升高,大剂量还使升高的ＧＡＢＡ恢复至接近正常。造模后５０ｍｉｎ以及７ｄ,模型组小鼠乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）活力降低,抗呆合剂可升高ＡｃｈＥ活力。     

成熟颈上神经节移植于成年大鼠脊髓内存活的实验研究

本文将成熟的颈上神经节(SCG)同种异体移植到成年大鼠脊髓腰膨大(Th_(13)或L_1)。对移植的节后交感神经元形态变化和存活生长进行了组织学和荧光组织化学的观察。实验结果表明:虽然移植神经细胞的大小和荧光强度仅部分达到正常,但仍证实移植的节后交感神经元在脊髓实质中能生存达3个月之久,并继续保持产生去甲肾上腺素的能力,从而呈现儿茶酚胺特殊荧光。根据实验资料,讨论了哺乳类脊髓移植和颈上神经节作为移植物的一些特点。     

局灶性脑缺血再灌注后大鼠血浆和海马皮质醇含量变化

目的:探讨脑缺血再灌注后糖皮质激素与海马神经元损伤的关系,以及糖皮质激素对卒中后痴呆发病的影响。方法:采取大脑中动脉阻塞模型,通过放射免疫方法测定脑缺血再灌注后模型大鼠再灌注2h、6h、12h和24h不同时点的血浆和海马皮质醇含量变化。结果:模型组在再灌注4个时点糖皮质激素含量都有增高,同假手术组、正常组相比有显著差异(P<0.05)。血浆、海马中皮质醇含量都以再灌注6h最高。HE染色海马神经元损伤随再灌注时点的延长,呈进行性加重。结论:脑缺血再灌注后24h内存在血浆、海马皮质醇含量的增高,这可能是加重海马神经元损伤,引发卒中后痴呆发生的原因之一。     

中药抗呆Ⅰ号对体外模拟脑缺血再灌注损伤大脑皮质神经元的保护作用

目的：观察体外培养的大鼠大脑皮层神经元在模拟脑缺血再灌注后的变化以及中药抗呆Ⅰ号的影响。方法：先对分离纯化培养的大脑皮层神经元进行体外模拟脑缺血再灌注损伤模型的建立，然后采用MTT法测定神经元的活性和存活率，用台盼蓝染色法测定其死亡率，用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率，用组化染色法测定一氧化氮合成酶(NOS)的活性。结果：体外培养的大鼠大脑皮层神经元髓缺血和再灌注时间的延长细胞的活性和存活率逐渐下降、死亡率逐渐升高、培养液中LDH的漏出率逐渐升高、细胞NOS表达强阳性细胞数在缺血4h(34．6&;#177;3．847)和再灌3h(20．6&;#177;3．362)时显著增高。模型组与正常组相比，差异有非常显著性意义(t=13．236，8．038，P&;lt;0．01)。抗呆Ⅰ号可影响其上述指标的变化。结论：抗呆Ⅰ号可能通过防止氧化磷酸化脱耦联而保护线粒体、防止脂质过氧化及通透性增加而保护细胞膜、抑制NOS活性的反应性增强而防止一氧化氮(NO)及其衍生的毒性自由基的损伤等途径而发挥对神经元的保护作用。