结直肠癌中DPC4/SMAD4基因杂合性缺失及生物学意义

目的分析我国散发性结直肠癌肿瘤组织中,DPC4/SMAD4基因杂合性缺失的发生情况.方法利用D18S46、D18S363、D18S474、D18S535和D18S877共5个跨DPC4基因区域的微卫星位点,采用微卫星分析方法,对25例散发性结直肠癌相关位点的杂合性缺失(LOH)进行了分析.结果至少1个位点呈多态性的病例为l00%,DPC4/SMAD4基因LOH发生率为60%.结论等位基因杂合性缺失是中国人散发性结直肠癌中DPC4基因失活的重要机制.     

大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组甲基化水平动态研究

背景与目的:研究大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平动态变化趋势.材料与方法:支气管灌注3-甲基胆蒽(MCA)及二乙基亚硝胺(DEN)碘油溶液诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型.采用免疫组化法检测大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平,利用图像分析系统测量其平均光密度值和积分光密度值.结果:经支气管灌注MCA及DEN碘油溶液,诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型,共获取癌变各阶段标本154例,其中增生25例,鳞状化生组织27例,不典型增生组织37例,原位癌组织30例,浸润癌组织25例.大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平按上述顺序呈递减的趋势,癌变各阶段甲基化水平与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.01),正常和癌变支气管上皮基底层甲基化水平高于腔细胞层,差异亦具有统计学意义(P＜0.01).结论:大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组DNA甲基化水平的降低,可能是介导其癌变的重要表遗传学机制.     

小鼠15%Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响

目的 研究烧伤情况下骨髓造血基质细胞支持粒单系造血的功能变化。方法 采用体外小鼠骨髓基质细胞融合培养和粒单系祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）培养的方法,动态观察１５％Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响。结果 当在烧伤组基质细胞层上培养正常骨髓细胞的ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１,３,５,７,１０天均明显低于正常对照组,而同时培养的烧伤小鼠骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１     

放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞的变化及其对粒系祖细胞增殖的影响

放烧复合伤是战时核爆炸与平时核事故所致的主要伤类之一。放烧复合伤时造血组织损伤明显。它不仅累及造血实质细胞,支持造血的微环境也发生了明显的改变。本文研究放射损伤复合烧伤后骨髓基质祖细胞的改变及骨髓基质细胞对粒系祖细胞增殖的影响。一、材料和方法1实验动物、致伤方法和分组昆明品系健康小鼠,体重20～24ｇ。单放组:60Ｃｏγ射线一次全身照射6Ｇｙ,距离15ｍ,剂量率04Ｇｙ/ｍｉｎ;单烧组:3%凝固汽油烧7ｓ,致成15%Ⅲ度烧伤;放烧组:按以上条件先照射后烧伤;对照组:正常动物。所有动物致伤后腹腔注射生理盐水2ｍｌ。每组动物不少于…     

硝酸羟胺亚慢性染毒对大鼠血液系统的影响

目的在硝酸羟胺(HAN)亚慢性染毒大鼠的基础上,初步探讨大鼠染毒后对血液系统的影响。方法Wistar大鼠160只随机分为4组:分别为HAN6.97、13.93和27.86mg/kg组和生理盐水阴性对照组,HAN组与对照组大鼠均以隔日腹腔注射的方式染毒,连续染毒13周后处死3/4(每组30只)动物,剩余1/4(每组10只)动物停止染毒再饲养4周后处死,分别检测染毒期与恢复期相关血液指标,网织红细胞计数及骨髓细胞各系增生情况。结果染毒期,HAN染毒组大鼠白细胞数显著升高,红细胞数和血红蛋白显著降低(P<0.05);染毒组大鼠网织红细胞计数明显高于对照组(P<0.01),与染毒剂量显著正相关;骨髓细胞中红细胞系增生明显,以中幼红和晚幼红细胞增多为主,粒/红比例明显下降,各染毒组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。恢复期,血常规、网织红细胞计数及骨髓细胞各系增生情况与对照组比较均无统计学意义。结论HAN长期染毒对大鼠骨髓造血系统有一定的损伤,主要表现为对红细胞系的毒作用。     

环磷酰胺对小鼠遗传和生殖毒性影响的研究(2)--对雄性小鼠生殖细胞的影响

目的探讨环磷酰胺对雄性小鼠生殖细胞毒性的影响。方法雄性小鼠随机分为对照组与实验组,每组10只,实验组腹腔注射环磷酰胺溶液30 mg/(kg.d),对照组腹腔注射生理盐水,连续5 d染毒,染毒后28 d取双侧睾丸和附睾,计数小鼠精子畸形率和生殖细胞微核发生情况,评价环磷酰胺对小鼠的生殖毒性作用。结果腹腔注射环磷酰胺实验组精子畸形率与对照组相比显著升高(P<0.05);实验组生殖细胞微核率与对照组相比亦显著升高(P<0.05)。结论小鼠腹腔注射环磷酰胺对雄性小鼠生殖细胞有损害作用。     

检测VKORC1、CYP2C9*3基因多态性指导急性肺血栓栓塞症患者华法林抗凝治疗的价值

【摘要】目的 探讨维生素Ｋ环氧化物还原酶复合物1（VKORC1）、细胞色素P450酶2C9*3（CYP2C9*3）基因多态性检测在指导急性肺血栓栓塞症（PTE）患者接受华法林抗凝治疗中的临床价值。方法 回顾性收集2016年1月～2018年12月四川大学华西医院呼吸与危重症医学科住院接受华法林抗凝治疗的411例成人PTE患者为研究对象。根据是否行VKORC1、CYP2C9*3基因多态性检测并据此制定华法林初始剂量及调整方案分为指导组（基因检测指导组,n=119）和对照组（常规处理组,n=292）。以开始使用华法林到国际标准化比值（INR）第一次达标（2-3）的时间（d）为主要观察指标;以稳定时（INR 2 - 3）的华法林维持剂量为次要观察指标,比较两组差异。随访两组自接受华法林抗凝开始到第6个月末时的不良反应。结果 基因多态性,VKORC1以AA野生型多见（n=89,74.8%）;其次为GA杂合突变型（n=29,24.4%）;纯合突变GG型仅1例（0.8%）。CYP2C9*3野生型（AA型）为 106例（89.1%）;杂合突变（AC型）13例（10.9%）。从两个基因多态性组合看,VKORC1 AA型合并CYP2C9*3 AA型81例,占 68.1%,即大部分患者两个基因均为野生型;其次为VKORC1 GA型合并CYP2C9*3 AA型24例（20.2%）;VKORC1、CYP2C9*3均突变的5例（4.20%）。指导组INR达到目标范围的时间为（7.96 ± 4.02）d,对照组INR达标的时间为（7.68±3.58）d,二者无统计学差异（P＞0.05）;指导组达到目标INR的华法林维持剂量为（5.30±0.99）mg,对照组的华法林维持剂量为（5.22±0.64）mg,二者无显著性差异（P＞0.05）。两组患者出现死亡、大出血、新发血栓的不良事件发生率均无统计学意义（均P＞0.05）。结论 VKORC1、CYP2C9*3基因多态性检测在指导急性PTE患者接受华法林抗凝治疗中的意义有限。     

螺旋藻多糖对放烧复合伤所致小鼠造血功能抑制的保护作用

目的　观察螺旋藻多糖 (SPP)对放烧复合伤所致造血功能抑制的保护作用。方法　小鼠 5Gy全身照射复合 15 %Ⅲ度烧伤后 5、10、15d分别取材 ,作骨髓粒单系、红系造血祖细胞培养 ,造血干细胞集落测定 ,以及外周血常规计数等。SPP用量为 12 5mg·kg-1·d-1,ip ,伤后连续注射 6d。结果　放烧复合伤后骨髓有核细胞数、粒单系CFU GM、红系CFU E、BFU E及造血干细胞CFU S集落数均显著低于正常对照组 (P <0 0 1) ,但应用SPP后 ,上述各项指标数值 ,均比同伤情的不用药组显著提高 ,尤以伤后 10d恢复最快 (P <0 0 1)。结论　SPP对放烧复合伤有明显保护和促进造血恢复的作用     

FLT3基因表达在急性髓系白血病中的临床意义

目的 研究急性髓系白血病（AML）患者骨髓中FMS样酪氨酸激酶3基因（FLT3）表达水平与FLT3基因内部串联重突变（FLT3-ITD突变）、临床表现和疾病预后的相关性及意义。方法 采用荧光定量PCR法检测128例AML患者初诊时骨髓标本中FLT3基因表达水平,以FLT3基因表达量＜35%作为低表达组,≥35%作为高表达组,并探讨不同FLT3基因表达水平的FLT3-ITD突变、临床症状、实验室检查结果及疾病预后,采用多因素logistic回归分析FLT3基因高表达的影响因素,采用单因素Cox回归和生存曲线进行生存分析。 结果 剔除1例不合格的M2患者RNA样本,最终纳入127例进行分析。AML患者初诊时FLT3表达量为0.01～180.68（均值14.65）。FLT3基因表达水平在WHO的AML分型中M1最高,M6最低,但各亚型间差异不具有统计学意义。FLT3基因高表达组AML患者外周血白细胞计数（WBC）较低表达组高（P<0.01）,且高表达组患者更容易发生贫血及发热临床症状（P<0.05）,多因素logistic回归发现,FLT3基因高表达的可能相关因素为WBC〔回归系数（B）=1.508,比值比（OR）=4.518,95%可信区间（95%CI）：1.465~13.390,P=0.009〕及贫血（B=2.142,OR=8.513,95%CI：3.201~22.644,P<0.001）。 FLT3基因低表达组AML患者完全缓解率（CR）为81.82%（36/44）,高于FLT3基因高表达组38.55%（32/83）,（P<0.05）。生存曲线显示,FLT3基因高表达组患者生存时间较低表达组短（P<0.05）。Cox回归显示, FLT3基因表达高水平患者死亡风险是FLT3基因表达低水平者的3.810倍（B=1.338,相对危险度3.810,95%CI：1.820~7.947,P<0.001）。高表达组总生存率为56.63%,低表达组为70.45%,两组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论 FLT3基因高表达可能与AML患者WBC及贫血症状有关。FLT3基因高表达是AML患者预后不良的指标。     

胃癌患者腹水中exosomes的分离与鉴定

目的从胃癌患者腹水中分离exosomes并鉴定其来源及分子表型。方法采用多步超速离心加超滤方法从胃癌患者腹水中分离exosomes,采用透射电镜观察其形态,采用Wenstern blot检测其CD63、FasL、TraiL、HLA-G等分子的表达。结果从胃癌患者腹水中分离的exosomes形态为圆形或椭圆形小囊泡,直径约30～100nm;经Western blot证实,exosomes表达CD63、CEA、FasL、TraiL等分子,不表达HLA-G。正常血清来源的exosomes只表达CD63。结论从胃癌患者腹水中分离的exosomes来源于胃癌细胞,表达FasL及TraiL,可能对腹膜腔的免疫细胞起到抑制作用。