HPV和CT双重PCR检测方法的建立及临床应用

目的：建立一种同时检测HPV和CT的方法,并在临床常见阴道宫颈炎症、孕产妇及新生儿中运用。方法：在单一PCR技术基础上摸索,建立并完善双重PCR技术。同时运用孕产妇、慢性宫颈炎患者的检测。结果：本室建立的双重PCR检测方法成熟,对两瑞朱体能同时进行检测。结论：双重PCR技术检测方法简单可行,特异性高。用PCR检测两种病原体节省时间及材料,并能观察两种病原体的协同作用。     

用SiRNA沉默SSAT基因表达降低人A549肺癌细胞对抗癌多胺类似物CPENSpm的敏感性

目的探讨精脒/精胺乙酰转移酶（Spermidine/Spermine N^1-Acetyltransferase,SSAT）基因表达沉默对多胺类似物CPENSpm抗瘤活性的影响。方法用SiRNA技术获得SSAT基因表达沉默的人A549肺癌细胞株,QT-RT-PCR法用于分析SSAT基因的表达水平,MTT法检测细胞的存活率,DNA片段化分析和流式细胞/亚凋亡峰分析检测细胞凋亡状况。结果成功获得SSAT基因表达沉默的人A549肺癌细胞株。用10μmol·L^-1CPENSpm处理对照细胞24h可使SSAT mRNA水平升高23倍,但在SSAT表达沉默的细胞中CPENSpm无此影响。细胞增殖实验发现,SSAT表达沉默的细胞对CPENSpm（0～20μmol·L^-1）的药物敏感性显著性低于对照细胞。细胞凋亡分析发现,10μmol·L^-1CPENSpm处理细胞48h导致对照细胞出现凋亡细胞典型的DNA片段化现象和亚凋亡峰,但在SSAT表达沉默的细胞株中,CPENSpm诱导细胞凋亡的能力明显减弱。结论CPENSpm诱导肿瘤细胞内SSAT高表达可能是其抗癌药理活性的分子基础之一。