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921.
922.
[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,并建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量PCR方法检测汉坦病毒核酸.[方法]对76-118株的S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-TVector连接,转化到大肠杆菌DH5α,筛选得到标准品的质粒,提取质粒并进行定量.在S片段的保守区设计引物和TaqMan探针,对real-time PCR条件进行优化,并提取急性期发病病人总RNA,逆转录为cDNA,与标准品同时检测.[结果]该方法制备的质粒标准品应用于汉坦病毒早期检测,能对检测样品进行质量控制;应用荧光定量PCR检测急性期病人病毒含量,具有高特异性和灵敏度,从病毒核酸提取至检测完成仅需3 h左右,重复性好,并能对病毒准确定量.[结论]汉坦病毒荧光定量标准品和TaqMan荧光定量PCR方法特异、敏感、快速,适用于汉坦病毒的早期检测;汉坦病毒S片段编码的核衣壳蛋白(NP)是流行性出血热早期诊断的理想抗原. 相似文献
923.
生长激素联合谷氨酰胺对促进残存小肠适应性代偿的研究 总被引:4,自引:2,他引:4
目的:研究生长激素(GH)和谷氨酰胺(Gln)单独或联合应用对残存小肠适应性代偿的促进作用及其机制. 方法:将已行全肠外营养(TPN)置管术、胃造口置管术和85%小肠切除术的大鼠随机分为四组,每组8只.短肠对照(SB)组;生长激素(SB/GH)组;谷氨酰胺(SB/Gln)组;生长激素/谷胺酰胺联合(SB/GH/Gln)组.术后即行TPN,术后4天开始肠内营养(EN),并逐渐过渡至全肠内营养(TEN),每只大鼠营养支持均为等热量和等氮量.术后每天称体重,于术后第12天检测小肠粘膜绒毛高度、粘膜厚度和隐窝深度,行14C葡萄糖和3H棕榈酸吸收实验,测定血浆胰岛素样生长因子-1(IGF-1)浓度,应用逆转录多聚合链反应(RT-PCR)技术检测小肠粘膜IGF-1、钠-葡萄糖协同转运蛋白(SGLT1)和小肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)的mRNA表达. 结果:SB/GH组和SB/Gln组大鼠术后体重、残存小肠的绒毛高度与粘膜厚度、体内吸收实验、血浆IGF-1浓度均显著高于SB组.SB/GH/Gln组指标又显著优于SB/GH组和SB/Gln组.而SB/GH组和SB/GH/Gln组残存小肠粘膜IGF-1、SGLT1和I-FABP的mRNA表达均显著高于SB组和SB/Gln组. 结论:GH和Gln单独或联合应用可促进残存小肠代偿性增生,且GH和Gln具有效能协同作用.Gln主要促进残存小肠吸收面积的扩大,而GH不仅促进残存小肠吸收面积的扩大,而且还可通过小肠粘膜局部IGF-1的介导,增强单个粘膜上皮细胞吸收功能的基因表达. 相似文献
924.
目的探讨p27^(kip1)、细胞周期素(cydin)E在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与卵巢癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测卵巢上皮性肿瘤组织中的p27^(kip1)、cyclin E。结果p27^(kip1)蛋白在卵巢上皮性癌和交界性肿瘤中的阳性表达率分别为37.5%、42.11%,显著低于良性肿瘤的78.05%(P均〈0.05);cyclin E在卵巢上皮性癌及交界性肿瘤、良性肿瘤的阳性表达率分别为72.22%、47.37%,29.27%,三者相比,P均〈0.01。p27^(kip1)、cyclin E在卵巢上皮性癌中的表达与组织分化程度、临床分期有关(P均〈0.05)。结论卵巢上皮性癌组织中p27^(kip1)表达下降,cyclin E表达上调,二者在卵巢癌的发生发展过程中发挥重要作用。 相似文献
925.
目的:观察人慢性髓细胞白血病细胞株K562中Smad7基因和蛋白的表达;探讨转化生长因子(TGF—β1)mad7的诱导作用。方法:采用逆转录-聚合酶链反应、蛋白印迹法方法检测K562细胞与TGF-1共育前后Smad7 mRNA蛋白表达水平。结果:K562细胞中具有Smad7的表达,且可由外源性TGF-β1短暂诱导,Smad7的表达及变化在转录及翻译水平上基本保持一致。结论:Smad7参与K562细胞TGF-β信号的传导,Smad7与TGF-β1之间存在自身调节负反馈通路。 相似文献
926.
黑骨藤化学成分的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 研究黑骨藤Periploca forrestii的化学成分.方法 利用各种色谱技术反复分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定.结果 从黑骨藤中分离并鉴定了9个化合物,分别鉴定为:3β-乙酰基-乌苏-12-烯-11-酮(Ⅰ)、3β-羟基-齐墩果-11,13(18)-二烯-28-羧酸(Ⅱ)、齐墩果酸(Ⅲ),滇杠柳苷元A(Ⅳ)、正十六烷酸(Ⅴ)、正十七烷(Ⅵ)、东莨菪素(Ⅶ)、山柰酚(Ⅷ)、槲皮素(Ⅸ).结论 除化合物Ⅳ外均为首次从该植物中分离得到,其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ为首次从杠柳属中分离得到. 相似文献
927.
目的探讨急性心肌梗死(AMI)后梗死心肌组织间质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)表达水平的变化。方法雄性Wistar大鼠31只,随机分为AMI组16只和假手术组15只。AMI组采用开胸并结扎左冠状动脉前降支的方法建立AMI模型。假手术组仅开胸并穿结扎线,不结扎前降支。在AMI模型建立后6 h、24 h以及6 d分别处死一批大鼠(每组每个时间点3~4只)。实时定量PCR法测定梗死区组织SDF-1αmRNA表达水平,免疫印迹法测定SDF-1α蛋白的组织表达水平。结果与假手术组相比,AMI组大鼠在梗死6 h时SDF-1αmRNA表达水平明显升高,24 h升高达到高峰(分别是假手术组的3.2倍和5倍,P<0.05),6 d表达水平下降。蛋白表达水平在6 h处于峰值水平,随后即开始下降。结论 AMI时局部心肌组织SDF-1α的表达呈动态变化,但SDF-1α蛋白表达水平与mRNA表达变化并不一致,可能与急性炎症期其他外源性物质释放(如血小板源性)有关。 相似文献
928.
目的观察中药土槿皮主要活性成分土槿乙酸(pseudolaric acid B,PB)免疫调节作用的药效学,初步探究其可能的分子机制。方法以二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导小鼠接触性超敏反应(contact hypersensitivity,CHS)模型,口服不同剂量PB进行干预,检测小鼠耳肿胀度,计算脾脏指数,并以苏木精-伊红染色观察小鼠耳部皮肤炎性细胞浸润情况,综合评价PB免疫抑制作用的药效学。随后,进一步以Western blot方法检测PB对CHS小鼠Akt磷酸化活性及对PPARγ蛋白表达的影响,通过荧光素酶报告基因分析PPARγ的转录激活。结果结果显示,不同剂量PB能够明显抑制CHS小鼠耳肿胀,降低脾脏指数,减轻耳部皮肤炎症程度,其免疫抑制作用机制可能与促进PPARγ表达及其转录激活、下调Akt信号通路有关。结论 PB可能通过调节PPARγ相关的Akt信号通路发挥免疫调节作用,为研制用于炎症免疫性疾病的新型免疫调节剂奠定了基础。 相似文献
929.
目的 评估红细胞体积分布宽度(RDW)与2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内中膜厚度(IMT)的关系.方法 将225例T2DM患者按照IMT是否正常进行分为2组,IMT正常组45例,ITM升高组180例,比较2组患者实验室检测指标,进行Logistic回归分析,并将RDW与IMT进行相关分析.结果 IMT升高组较IMT正常组患者年龄更大[(62.2±9.5)岁比(53.9±9.6)岁],患高血压者比例更高[61.7%(111/180)比31.1%(14/45)],血肌酐更高[(65.3±30.8)μmol/L比(52.4±15.7)μmol/L],且RDW值更高[(13.3±0.9)%vs(12.7±0.6)%],上述4个因素的差异均具有统计学意义(均P<0.01).Logistic回归显示,RDW是IMT升高的危险因素之一(OR=2.272,95% CI 1.241~4.195,P=0.008).RDW与IMT存在显著相关性(r=0.280,P=0.000).结论 RDW与T2DM患者IMT存在密切的相关性,可能对于T2DM患者的预后判断有一定用价值.Abstract: Objective To evaluate the relationship between red cell volume distribution width(RDW) and intima media thickness(IMT) in type 2 diabetes mellitus(T2DM) patients. Methods Two hundred and twentyfive T2DM patients consecutively admitted into our hospital were divided into two groups according to whether IMT were increased or not. The baseline clinical data of the patients were collected and the relationship between RDW and IMT was evaluated. Results The age of the IMT increased group was higher than that of normal IMT group [(62.2 ± 9. 5) years vs (53. 9 ± 9. 6) years]. The proportion of patients with hypertension was higher[61.7% (111/180) vs 31.1%(14/45)] and serum creatinine was higher[(65.3 ±30.8) μmol/L vs (52.4 ± 15.7)μmol/L]. There were significant differences of age, plasma creatinine, RDW and hypertension history between the two groups (P=0.000, 0.001, 0.000, 0.000 respectively). There was significant correlation between RDW and IMT(r= 0.28, P = 0. 000). Logistic regression analysis indicated that RDW was one of the risk factors of IMT (OR = 2.272, 95% CI 1.241 -4.195, P=0.008). Conclusion RDW may be significantly related to IMT in T2DM patients and may be valuable to the prognosis. 相似文献
930.