生物素化壳聚糖微球用于体外肿瘤靶向治疗

生物素 -亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早期诊断、治疗研究的热点。将包封有 TNFα的壳聚糖微球生物素化 ,以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统 ,采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明 :生物素化壳聚糖微球对体外培养的肝癌细胞 SMMC- 772 1有显著的抑制作用 (抑制率为 6 0 .8% ,P<0 .0 1)。     

化学发光法测定大鼠脑组织中一氧化氮合成酶的活性

利用化学发光分析技术建立一种新的一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性测定方法。Ｌ－精氨酸在多种辅助因子的参与下，经ＮＯＳ的催化生成一氧化氮（ＮＯ）。ＮＯ与过氧化氢反应生成过氧亚硝酸，后者能与鲁米诺产生强的发光反应，当ＮＯ浓度为０．１ｐｍｏｌ／Ｌ～１ｎｍｏｌ／Ｌ时，发光强度与ＮＯ浓度成正比；通过测量发光强度来确定ＮＯＳ的活性。用该方法重复测量１０只大鼠脑组织中的ＮＯＳ活性，其测定值为：（２８．３±６．９）ｐｍｏｌＮＯ／Ｌ／ｍｇ蛋白／ｍｉｎ；稳定性较好。此方法避免了同位素方法的繁琐及放射性污染，是一种简便易行的ＮＯＳ活性测定方法     

HSPs与肿瘤

ＨＳＰｓ(热休克蛋白 )是一组在进化上非常保守的蛋白质。广泛地存在于原核和真核细胞生物中。对ＨＳＰｓ的研究可以追溯到 1935年 ,人们发现加热果蝇蛹可诱导发育缺陷。进一步研究发现 ,除环境热因素外 ,缺氧、重金属、乙醇及感染等 10 0多种理化因素可诱导机体产生ＨＳＰｓ。     

结核分枝杆菌的优化PCR检测方法的研究

〔目的〕的建立了检测结核分枝杆菌的高灵敏度和高特异性PCR扩增体系。[方法]以国内结核病人常见病原菌-结核分枝杆菌、牛分枝杆菌特异性抗原Pab编码基因上的419bp段作为扩增靶序列,扩增引物序列为5’-ACC、ACC、GAG、CGG、TTC、CCC、TGA-3’、5’-GAT、CTG、CCG、GTC、GTC、CCA、GGT-3’。〔结果〕变性温度选择69℃-70℃。PCR扩增体系的成份经优化,选择引物浓度为0.30μmol/L,dNTP浓度为150μmol/L,MgC12浓度为3.5mmol/L。〔结果〕该体系对11株标准菌株和12株临床分离菌株提纯的染色体进行扩增,其中卡介苗、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌的扩增为阳性,其他分枝杆菌为阴性。〔结论〕以提纯的染色体DNA作模板,该体系可检出5fg结核杆菌染色体DNA,相当于一个结核分枝杆菌。     

化学发光酶免疫测定法在妇科肿瘤中检测雌激素受体的研究

应用化学发光酶免疫分析法对妇科肿瘤组织雌激素受体进行定量测定，摸索了该法作为一种新的超微量检测技术的最佳反应条件，这些条件包括温度、时间及鲁米诺（ｌｕｍｉｎｏｌ）浓度。３４例标本经检测，结果在１０．９～３０６．５ｆｍｏｌ／ｍｇ之间。用本方法定量检测妇科肿瘤组织雌激素受体具有重要意义。     

发光分析测定体液中腺苷脱氨酶

利用化学发光分析技术建立了一种测定体液中腺苷脱氨酶活性的新方法，该方法简便易行，快速灵敏。对酶反应最佳条件进行了探讨，底物Km为0．31mmol／L，最佳pH为7．40，反应时间为10min。该方法的重复性CV为2．74％。该方法对结核性胸膜炎和癌性胸水的鉴别诊断有实用价值。     

一种快速定量检测p16基因甲基化方法的建立

目的建立一种基于错配杂交-化学发光检测的p16基因启动子区过甲基化的定量分析方法。方法用亚硫酸氢钠修饰基因组DNA,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化。设计合成一对不含CpG位点的引物同时扩增甲基化或非甲基化目的DNA片段,用两根分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物进行杂交,化学发光检测,通过两根探针的杂交信号强度之比确定样品DNA中甲基化的p16基因的比例。结果检测结果与肿瘤细胞DNA样品中甲基化的p16基因的量成正比,而且与其表达水平呈逆相关。结论与现有方法相比,本法是一种检测快速、操作简便的p16基因甲基化的定量检测方法。     

环境污染健康损害评价指标体系探索

为解决环境污染健康损害诉讼中评价指标这一关键问题,构建了环境污染健康损害评价指标体系.依健康的定义将健康损害评价分为生理评价和心理评价两部分.其中生理评价指标分为暴露指标、效应指标和易感性指标3大类,暴露指标则分为摄入量指标和暴露标志物指标两个方面,效应指标又分为一般人群健康指标和效应标志物指标两个方面.为了提高指标体系的可操作性,补充了5类主要器官健康损害生物标志物.     

某土壤铅污染地区人群生物材料铅含量分析

目的对某土壤铅污染地区人群生物材料样品(血液、头发、指甲)中的铅含量进行比较分析。方法2007年11月以某地蓄电池厂旧址及周围远近距离不同的4个村(1个污染村,2个轻度污染村,1个对照村)、居住5 a以上的居民共752人为研究对象,用石墨炉原子吸收光谱法测定研究对象血液、头发、指甲中的铅含量。结果污染村成人、儿童血铅浓度中位数分别为80.50、96.50μg/L,轻度污染村分别为61.50、79.05和57.85、60.00μg/L,对照村为50.20、55.40μg/L,污染村高于其他各村(P<0.05);污染村成人、儿童发铅含量中位数分别为20.81、26.74μg/g,轻度污染村分别为10.32、13.32μg/g和7.91、9.41μg/g,对照村为6.31、7.09μg/g,污染村成人高于其他各村(P<0.05),各村儿童发铅之间差异具有统计学意义(P<0.05);污染村成人、儿童指甲铅含量中位数分别为20.66、38.76μg/g,轻度污染村分别为7.69、20.61μg/g和8.88、19.07μg/g,对照村为6.61、22.36μg/g,污染村成人、儿童指甲铅含量均高于其他村(P<0.05)...     

肝肿瘤发生中过氧亚硝酸阴离子标志物作用

目的比较过氧亚硝酸阴离子（ONOO^-）对正常人胚肝细胞株L-02和肝母细胞瘤细胞株HepG2 DNA损伤和细胞毒性差异，探索ONOO^-在肝肿瘤发生中的作用及可能标志物。方法0．01，0．05，0．1mmol／L ONOO^-作用细胞后，检测ONOO^-对2株肝细胞的细胞生存率，超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）含量变化，DNA损伤，生长抑制DNA损伤基因（GADD）表达的影响差异。结果ONOO^-使2种肝细胞的生存率下降、SOD含量降低（P〈0．05）和CAT、GSH的显著变化，显著升高MDA的含量；DNA损伤程度和GADD45、GADD153基因表达水平在2株肝细胞均随着剂量的增加显著升高。2种肝细胞相比，各浓度组L-02细胞损伤程度大于HepG2细胞，但只有GADD基因表达水平差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ONOO^-对正常肝细胞和肝癌细胞均显示细胞毒性作用，引起DNA损伤，诱导GADD表达。GADD基因表达水平在不同肝细胞中差异有统计学意义，可能是ONOO^-细胞损伤效应的标志物。