miR-134对蛛网膜下腔出血后软脑膜纤维化的作用

目的探究miR-134对蛛网膜下腔出血（SAH）后软脑膜纤维化的作用及其机制。方法大鼠（40只）按照随机数字表法随机分2组,即假手术组（SHAM组,n=20）和模型组（SAH组,n=20）;2组脑组织采用芯片分析技术筛选差异表达的miRNAs,并采用RT-qPCR对其进行验证;使用miRDB软件预测miR-134的靶蛋白,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-134对TGF-β1的靶向作用。采用western blot和RT-qPCR检测miR-134过表达和低表达的血管内皮细胞RAOEC中TGF-β1和CollagenⅠ表达。12只SAH大鼠随机分4组,各组颅骨后分别注射空白慢病毒（空白慢病毒组,n=3）、Lv-miR-134（Lv-miR-134组,n=3）、Lv-TGF-β1（Lv-TGF-β1组,n=3）和Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1（Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组,n=3）,Masson染色观察各组软脑膜组织的纤维化。结果与SHAM组比较,SAH组miR-134表达降低,TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达增高（均P<0.05）。miR-134能够与TGF-β1的3′-UTR区域直接结合,并抑制其活性。血管内皮细胞中miR-134抑制TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达（P<0.05）。与空白慢病毒组相比,Lv-miR-134组、Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组的纤维化程度降低（P<0.05）,而Lv-TGF-β1组纤维化程度升高（P<0.05）。结论 miR-134通过调控TGF-β1抑制SAH后软脑膜纤维化。     

肺隐球菌病75例回顾分析

目的：分析肺隐球菌病（pulmonary cryptococcosis,PC）的临床特征、实验室检查、影像学特点、诊断及治疗。方法：回顾性分析2009年6月—2019年6月在南京医科大学第一附属医院经病理确诊的75例PC患者的临床资料。根据免疫状态分为免疫正常组（43例）和免疫受损组（32例）。结果：75例患者中,男50例,女25例,年龄（48.2±12.4）岁（17~80岁）。主要临床症状为咳嗽、咳痰、发热。27例患者无症状。两组淋巴细胞计数、纤维蛋白原、癌胚抗原、细胞角蛋白19片段、红细胞沉降率水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。PC影像学表现无特异性,结节肿块型33例、浸润实变型25例、混合型17例,两组在三者表现上比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。截至2019年9月30日,除4例失访外,59例患者行单独抗真菌药物治疗,12例患者行手术联合抗真菌药物治疗,治愈48例,好转18例,死亡5例。单独接受氟康唑治疗的有效率为96.4%（53/55）。结论：PC在免疫正常患者中并不罕见,其临床及影像学表现无特异性。诊断主要依赖病理学检查。常用的抗真菌药物对PC治疗效果较好,多数患者预后良好。     

苯甲酰芍药苷上调miR-520c-3p缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤研究

目的 探究芍药单体成分苯甲酰芍药苷对脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤（ALI）的作用及分子机制。方法 将75只SPF级小鼠按照随机数表法分成5组：空白对照组（生理盐水）、ALI组（2.00 mg/kg LPS 100μl）、阳性对照组（2.00 mg/kg LPS 100μl+血必净注射液100μl）、苯甲酰芍药苷低剂量组（2.5 mg/kg苯甲酰芍药苷100μl）、苯甲酰芍药苷高剂量组（5 mg/kg苯甲酰芍药苷100μl）,通过腹腔注射LPS构建ALI模型并给予药物干预。称重检测各组肺组织湿/干重比;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态变化;ELISA法检测ALI小鼠肺组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）水平;蛋白免疫印迹（WB ）检测肺组织IκB激酶（IKKβ）/核因子κB（NF-κB）表达及其磷酸化激活水平;荧光定量PRC（RT-PCR）检测ALI小鼠肺组织中miR-520c-3p表达;Targetscan 7.0预测miR-520c-3p靶基因;A549转染miR-520c-3p inhibitor验证苯甲酰芍药苷对炎症的调控作用。结果 苯甲酰芍药苷低、高剂量均明显降低ALI小鼠肺组织湿/干重比（P＜0.05）,ALI损伤的肺组织结构得到缓解;ELISA结果显示苯甲酰芍药苷低、高剂量能明显降低ALI小鼠肺组织中TNF-α、IL-6的水平（P＜0.05）;WB结果显示,与空白对照组相比,苯甲酰芍药苷低、高剂量组IKKβ、NF-κB p65磷酸化水平以及总NF-κB p65水平下降;RT-PCR结果发现苯甲酰芍药苷有效促进miR-520c-3p在ALI中的表达（P＜0.05）;Targetscan预测结果显示miR-506-3p直接靶向NF-kB p65亚基RELA基因3’UTR序列;补救实验显示miR-520c-3p inhibitor有效逆转了苯甲酰芍药苷对ALI过程中TNF-α、IL-6的抑制作用（P＜0.05）。结论 苯甲酰芍药能有效缓解LPS引起的ALI病理进程中炎症的发生,其作用机制可能是通过上调miR-520c-3p的表达,从而抑制其靶基因NF-κB p65生成,抑制IKKβ/NF-κB 信号通路的活化,导致炎症因子TNF-α、IL-6的合成受到抑制。     

独活寄生汤加减联合中医骨伤手法治疗腰椎间盘突出症的临床效果

目的观察独活寄生汤加减联合中医骨伤手法治疗腰椎间盘突出症(LDH)的临床效果。方法选取叶县中医院2018年1月至2019年2月诊治的106例LDH患者,按照随机数表法分为参照组和联合组,各53例。参照组接受中医骨伤手法治疗,联合组在此基础上增加独活寄生汤加减治疗。比较两组疗效、治疗前后日本骨科协会评估治疗分数(JOA)、视觉模拟评分(VAS)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)水平。结果参照组和联合组治疗总有效率分别为77.36%(41/53)、92.45%(49/53),联合组总有效率较参照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后联合组JOA评分较参照组高,VAS评分较参照组低,血清IL-1、TNF-α水平均低于参照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论独活寄生汤加减联合中医骨伤手法治疗LDH效果显著,能有效减轻患者腰腿疼痛,提高腰椎功能,减轻炎症反应。     

基于熵权TOPSIS法的区域医院科技影响力评价研究

目的:开展区域医院科技影响力评价研究,助力我国区域医院科技创新体系建设。方法:以中国医院科技影响力评价体系为基础,通过专家咨询和访谈,形成更符合区域特色的区域科技影响力评价体系。采用熵权法并依赖数据本身的离散性得到指标权重,采集并处理深圳市50家医院科技影响力的评价指标数据,利用TOPSIS法计算得出其综合科技影响力。结果:确定了区域医院科技影响力评价指标体系,包括科技产出、学术影响和科技条件3个维度,共21个三级指标。不同医院的科技影响力明显不同,参评医院的国家级重点科研项目数量较少,国家级科研平台数量较少。结论:建议深圳市加强政府统一筹划,增加医院科技投入;促进高水平综合医院的全面发展,突出专科医院的特色;加强科研平台建设,为医院的科技发展奠定基础;建设富有创新意识和创新能力的科技队伍,优化利用区域医院科技资源,培育及提高区域科技竞争优势。     

皮肤成纤维细胞构建组织工程化猪角膜基质样组织

目的 探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞,在猪角膜微环境中构建组织工程化角膜基质组织的可行性.方法 分离获取胎猪皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增.通过转染绿色荧光蛋白(GFP)基因标记细胞,示踪细胞的转归.选取第3代的细胞接种于可吸收生物材料聚羟基乙酸(PGA),形成细胞-生物材料复合物,体外培养1周后,移植于猪的角膜基质层内,于第8周取材进行大体、组织学检查及超微结构观察.以角膜基质细胞为种子细胞构建的组织工程化角膜基质组织作为对照.结果 术后8周,实验组角膜逐渐恢复透明,与对照组角膜无明显差别.组织学检查显示形成新生的角膜基质样组织,呈板层状,排列较规则,与对照组角膜组织相似.超微结构观察及胶原纤维直径检测显示,实验组与对照组角膜组织差异无统计学意义.荧光显微镜观察到GFP阳性细胞存在.结论 皮肤成纤维细胞可能替代角膜基质细胞,在猪角膜内构建角膜基质样组织.     

巨噬细胞炎症蛋白-1α在多发性骨髓瘤中的表达

【目的】探讨巨噬细胞炎症蛋白-1α（MIP-1α）在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义。【方法】夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测实验组43例患者、15例对照组,以及随访37例治疗3疗程后骨髓血浆MIP-1α的水平。【结果】①65.1%患者MIP-1α水平增高,其中实验组明显高于对照组（t=3.569,P=0〈0.01）,实验组中的活动进展期患者明显高于稳定期、正常人及其他血液病患者（P均〈0.05）;骨质破坏〉2处患者明显高于骨质破坏≤2处的患者（t=5.56,P=0〈0.01）。②有效组经治疗3个疗程后MIP-1α水平明显下降（t=3.237,P=0〈0.05）。③MIP-1α与红细胞计数、白蛋白、β2-微球蛋白、骨损分、Durie-Salmon分期相关（P均〈0.05）。【结论】大部分多发性骨髓瘤患者骨髓MIP-1α水平增高,MIP-1α可作为反映骨质破坏及瘤负荷的一项指标,动态监测MIP-1α可预测近期疗效。     

脂肪来源细胞和透明质酸钠复合物构建裸鼠皮下软组织

目的 探讨脂肪来源细胞(ADCs)作为新型真皮充填物的可能性.方法 ADCs取自3例行整复手术的男性患者的残余脂肪组织,支架材料为透明质酸钠.实验分为三组,实验组:ADCs(25×106/mL)与透明质酸钠混合,每一样本0.2 mL注射于雌性BLAB/c裸鼠皮下;对照组1:单纯运用透明质酸钠,每一样本0.2 mL注射于裸鼠皮下;对照组2:单纯运用ADCs(25×106/mL),每一样本0.2 mL注射于裸鼠皮下.8周后取材,通过大体和组织学观察,以及性染色体RT-PCR检测,对再生组织进行评价.结果 实验组形成软组织呈球形,平均体积(0.0352±0.0115)mL;组织学观察显示,生物材料完全降解,组织排列紊乱,间有大量排列紊乱的胶原纤维,无脂肪组织;两对照组均无任何组织形成.结论 应用组织工程技术,以人脂肪来源细胞为种子细胞,透明质酸钠为支架材料,能构建出良好的组织工程化软组织;为探索一种安全、有效的除皱方法,提供了新的研究方向.     

重组hTGF-β1基因转染骨髓间充质干细胞及其表达

目的 探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其表达的可行性.方法 重组adeno-hTGF-β1经293细胞包装、扩增后,转染猪BMSCs.转染后72 h,RT-PCR检测BMSCs的hTGF-β1mRNA表达;免疫细胞化学染色定性和酶联免疫吸附定量测定(ELISA法)hTGF-β1蛋白表达;MTT法测定水貂肺上皮细胞(MV-1-Lu)的生长抑制率,以验证转染后所表达的hTGF-β1蛋白的生物学活性.结果 转染后72 h,BMSCs能有效表达hTGF-β1mRNA,胞浆内有大量棕黄色的hTGF-β1蛋白表达,其蛋白表达量是转染adeno-lacZ的2.65倍(P＜0.05);MTT法检测结果显示,转染adeno-hTGF-β1的BMSCs所分泌的hTGF-β1蛋白对MV-1-Lu细胞的生长有显著抑制作用.结论 重组adeno-hTGF-β1能够被导入BMSCs,并表达有生物学活性的hTGF-β1蛋白.为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程中的应用奠定了基础.