HLA-E的结构和功能研究进展

HLA-E分子是一类非经典HLA-Ⅰ分子。其提呈的抗原肽主要是经典的HLA-l类分子及某些HLA-G亚类分子的信号肽;通过与细胞表面的CD94／NKG2类受体结合,可抑制或激活NK细胞的生物学活性;在肿瘤、病毒感染的逃避机制中可能起重要作用。本文对HLA-E分子的结构特点、生物学功能研究进展作一综述。     

以问题为基础学习教案编写的实践探索

华中科技大学同济医学院自1999年以来在医学教育中实施了以问题为基础学习（Problem-Based Learning，PBL）教学方法的改革，将教案编写作为实施PBL教学的关键环节之一，形成了PBL教案编写的基本原则、编写流程和评价办法，以培养目标为依据，自行编写了适用于我国医学教育的PBL教学病案，形成了PBL教案体系。     

生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物的制备

目的 制备生物素化的HLA-A＊2402-抗原肽复合物。方法 将原核高效表达的sHLA-A＊2402-BSP融合蛋白及β2m和HLA-A＊2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行稀释、复性、折叠,形成HLA—A＊2402-抗原肽复合物单体,并在BirA酶作用下进行生物素化,使生物素结合到HLA-A＊2402-抗原肽复合物中H链C端的BSP序列上形成生物素化的sHLA—A＊2402-抗原肽复合物单体。利用特异性单克隆克体（W6／32和兔抗人β2微球蛋白抗体）及链霉亲合素进行ELISA和Westem blot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果 折叠复合物中,主要含有HLA—A＊2402-肽复合物单体及β2两种成分,其中HLA-A＊2402-肽复合物单体可生物素化。结论 成功制备出生物素化的HLA—A＊2402-抗原肽复合物单体,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础。     

EBV—LCLs内Bcl—2水平与其对NK胞毒作用敏感性的相关性研究

目的：探讨EB病毒感染细胞内Bcl-2水平与其对NK胸毒活性及对调亡诱导因素敏感性之间的关系。方法：应用反义寡聚脱氧核苷酸，抑制EB病毒转化B淋巴母细胞样细胞系（EBV－LCLs）胞内Bcl-2基因表达，然后观察NK细胞对其杀伤活性的改变以及其对致凋亡因素（地塞米松、撤除生长因子）敏感性的变化。结果：EVV－LCLs胞内Bcl-2表达水平与其对NK细胞杀伤的敏感性呈负相关（P＜0.01）；与无血清培养条件下EBV－LCLs细胞存活率呈正相关（P＜0.01）；与EBV－LCLs对地塞米松致凋亡作用的敏感性呈负相关（P＜0.01）。结论：胞内Bcl-2水平可能是决定靶细胞对NK细胞杀伤活性敏感性的关键因素之一，NK细胞对EBV－LCLs的杀伤机制之一可能是诱导细胞调亡。     

可溶性HLA-G1-抗原肽复合物的体外折叠及其功能研究

目的:体外折叠形成可溶性HLA G1抗原肽复合物,并研究其生物学功能。方法:以原核表达的可溶性HLA-G1的重链及轻链β2m,与人工合成的抗原九肽体外进行共折叠复性。将折叠产物通过SephadexG75层析柱纯化,经Westernblot进行构象鉴定。探讨可溶性HLA-G1分子对NK细胞杀伤活性的影响,对混合淋巴细胞培养中T细胞增殖的影响,以及对活化T细胞凋亡的影响。结果:折叠产物可与mAbW6/32特异性结合,在Westernblot的鉴定中呈阳性反应。可溶性HLA-G1可有效地抑制NK细胞的细胞毒作用,抑制混合淋巴细胞培养中T细胞的增殖,促进活化T细胞发生凋亡。结论:体外折叠成功地形成可溶性HLA-G1抗原肽复合物,该复合物具有抑制NK细胞和T细胞的活性。     

EB病毒受体的放射配基结合分析

用３Ｈ－ＴｄＲ标记爱波斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）进行结合饱和实验和竞争性抑制实验检测３种类型细胞的ＥＢＶ受体。结果表明，Ｂ淋巴细胞性白血病细胞系Ｒａｊｉ细胞存在高低两种亲和性ＥＢＶ结合位点，其Ｋｄ１＝１．２５×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）１＝９．８９病毒粒子／细胞；Ｋｄ２＝２．８０×１０（－１２）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）２＝１７０．３５病毒粒子／细胞，而ＥＢＶ不与红白血病细胞系Ｋ５６２细胞结合。上皮细胞性低分化鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ细胞也表达ＥＢＶ受体，其Ｋｄ＝６．１７×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）＝１０．２４病毒粒子／细胞。ＥＢＶ及α干扰素均能阻止３Ｈ－ＥＢＶ与Ｒａｊｉ细胞或ＣＮＥ－２Ｚ细胞的特异性结合。     

常温下酒精保存中耳移植材料的电镜观察及其临床应用

【目的】寻找简化中耳移植材料的保存方法。【方法】采用常温下７０％～７５％酒精贮存鼓膜、听骨等移植材料，对１３５耳鼓膜穿孔患者进行治疗，并进行组织学和电镜观察。【结果】常温下酒精保存的硬脑膜、软骨、听骨可保存其基质数年不变，其中硬脑膜胶质纤维结构保存良好。穿孔封闭率达９０．４％（１２２／１３５），高于对照组的８８．１％（３７／４２），与对照组（冷藏方法保存移植材料）进行比较差异无显著性（Ｐ＞００５）。【结论】常温下保存中耳移植材料是可行的。     

建立预测同种异体间组织相容性细胞模型

目的：建立了预测受、供者间组织相容性信息的体外实验模型，探讨了借助此模型预测的组织相容性与BMT术后GVHR发生时间的相关性及其与小鼠移植皮肤存活时间的相关性。方法：借助所建立的实验模型和细胞模型预测供、受者间组织相容性差异。结果：①显示其与BMT术后GVHR发生时间呈一定相关性，即实验模型检测的受、供者间杀伤活性比值愈大，GVHR发生时间愈晚；②显示其与同种异体小鼠皮肤移植物存活时间呈正相关，即实验模型检测的供、受者间杀伤活性比值愈大，小鼠皮肤移植物存活时间愈长。结论：该模型对选择组织兼容性的移植物供者和判断移植术的预后，提供了实验依据和研究探索。     

武汉市美沙酮门诊治疗者丙型肝炎病毒混合基因型感染的研究

了解武汉市美沙酮门诊的毒品滥用者HCV混合基因型感染的状况. 1.对象与方法:研究对象均为武汉市2006年底某美沙酮门诊的入组患者,户口均为武汉市,年龄20～58岁.