低温等离子消融联合下鼻甲骨折外移治疗慢性肥厚性鼻炎

目的:观察低温等离子消融联合下鼻甲骨折外移治疗慢性肥厚性鼻炎的疗效.方法:回顾性分析189例慢性肥厚性鼻炎患者,均在鼻内镜直视下行下鼻甲等离子消融联合下鼻甲骨折外移,术后随访6个月.结果:患者术前鼻塞VAS评分为8.20±0.48,术后6个月为3.05±0.79,术后与术前比较差异有统计学意义(P=0.000).总有效率为97.88%,仅2例老年患者未定期复查而发生鼻腔黏连,2例因严重过敏性鼻炎影响了疗效.结论:低温等离子消融联合下鼻甲骨折外移是治疗慢性肥厚性鼻炎的有效方法,其并发症小,符合功能化、微创化的原则,值得临床推广.     

耳鸣患者的畸变产物耳声发射测试

目的探讨耳鸣患者畸变产物耳声发射（DPOAE）的临床特征，了解畸变耳声发射检测在耳鸣患者中的临床应用价值。方法对42例耳鸣患者进行DPOAE测试及纯音听阈检测，并进行对比。结果耳鸣伴听力下降患者的畸变产物耳声发射在相关频率幅值下降或未引出，二者有相关性；耳鸣伴听力正常患者畸变产物耳声发射均出现高频段幅值下降或缺失。结论对纯音听阈正常的耳鸣患者DPOAE可用于发现早期耳蜗病变，对听力损失者可有助于客观预估听力损失程度。     

可溶性HLA-G-肽复合物的体外制备与纯化

目的 探讨可溶性HLA-G-肽复合物的体外制备与纯化.方法 原核高效表达的HLA-G重链及轻链(β2m)在抗原肽(人工合成九肽NH2-KGPPAALTL-COOH)的存在下,通过稀释复性折叠成HLA-G-肽复合物,采用凝胶过滤层析对折叠复合物进行纯化.利用特异性抗体(mAb W6/32和兔抗人β2m抗体)进行ELISA和Western blot对纯化产物进行鉴定.结果 折叠复合物中,主要含有HLA-G重链聚合体、HLA-G-肽复合物及β2m 3种成分,纯化后主要为HLA-G-肽复合物.结论 成功地获得纯度较高的可溶性HLA-G-肽复合物单体,为进一步研究HLA-G的生物学功能奠定了基础.     

人可溶性单链β2m-HLA-A2-BSP融合蛋白表达载体的构建及其表达

目的 构建并表达了人可溶性单链β2m-HLA-A2-BSP（scHLAA-A2）融合蛋白表达载体．为进一步制备HLA-A2四聚体及其功能研究奠定了基础。方法 应用重叠延伸PCR（overlap-PCR）对编码HI，A-A2的cDNA序列进行一个碱基的同义突变．并将β2m和HLA-A2胞外段亚单位两段编码序列的cDNA通过一疏水性多肽接头（Gly．Ser）。的DNA序列进行前后拼接．并利用引物所带的BSP编码序列．构建单链β2m-HLA-A2-BSP融合基因．将测序正确的β2m-HLA-A2-BSP融合基因插入原核表达载体pET-22b中．转化BL21（DE3）细菌．SDS-PAGE检测其表达．融合蛋白于体外抗原肽存在条件下稀释复性后由Western blot鉴定其空间构象。结果 经DNA序列分析表明：同义突变与预期结果一致．β2m和HLA-A2-BSP、linker的连接顺序、方向及序列完全正确．表达载体转化BL21（DE3）细菌后可表达β2m-HLA-A2-BSP融合蛋白．SDS-PAGE显示该融合蛋白分子量为45kD．与理论值一致．将融合蛋白与特异性抗原肽在体外进行稀释复性后经Western blot鉴定表明该复合物能与HLA-1类分子特异性结合的单克隆抗体W6／32结合。结论 人可溶性单链β2m-HLA-A2-BSP融合蛋白的构建及其表达获得成功．经体外复性可获得HLA-1类分子天然构象。     

可溶性HLA-A*2402-pBRLF1复合物的体外折叠与四聚体化

目的 研究可溶性HLA—A＊2402-pBRLF1复合物的体外折叠与四聚体化。方法 将原核高效表达的可溶性HLA—A＊2402-BSP融合蛋白及β2微球蛋白（β2m）与HLA—A＊2402限制性抗原肽Epstein—Barr病毒（EBV）即刻早期BRLF1蛋白中的九肽NH2-DYNFVKQLF-COOH进行稀释复性折叠，形成HLA—A＊2402-pBRLF1复合物单体，并在BirA酶的作用下进行生物素化，使生物素结合到HLA—A＊2402-pBRLF1复合物中H链c端的BSP序列上形成生物素化的可溶性HLA—A＊2402-pBRLF1复合物单体。利用特异单抗（W6／32和兔抗人β2m抗体）及链霉亲合素进行ELISA和Western blot，检测稀释复性和生物素化的折叠产物。然后用此生物素化的单体分子进一步构建成HLA—A＊2402-pBRLF1四聚体来检测人工抗原提呈细胞（aAPCs）诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）。结果折叠复合物中，主要含有HLA-A＊2402-pBRLF1复合物单体及β2m两种成分，其中HLA—A＊2402-pBRLF1复合物单体可生物素化和四聚体化。应用HLA—A＊2402-pBRLF1四聚体对特异性CTL检测结果说明体外成功地构建了HLA—A＊2402-pBRLF1四聚体。结论HLA—A＊2402-pBRLF1四聚体构建成功。为特异性CTL的检测提供了有力的工具。     

同种CTL识别表位的抗原肽非依赖性现象

目的 初步探讨细胞毒T细胞(CTL)对同种抗原的识别机制.方法 用负载特定肽的T2细胞与HLA-A2阴性个体的外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBL)共培养,激活同种反应性CTL,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放法观察同种反应性CTL对不同载肽T2细胞的杀伤活性.结果 用负载特定抗原肽的T2细胞诱导所获得的同种反应性CTL对负载不同抗原肽的T2细胞及空载T2细胞具有同等杀伤效应.结论 同种反应性CTL对同种MHC分子的识别不依赖抗原肽.     

人白细胞抗原TAP等位基因多态性与先兆子痫的关联性研究

先兆子痫是产科常见的严重并发症，严重危及母婴安全。随着先兆子痫免疫学改变发现的逐渐增多，对其免疫功能相关基因的研究将有助于病因的最终阐明。迄今，人白细胞抗原（HLA）的抗原处理相关转运蛋白（transporter associated with antigen processing，TAP）与先兆子痫相关性的研究国内外均未见报道。     

多功能咽喉镜及鼻内镜辅助下应用喉吸引旋切刀治疗声带息肉

目的探讨多功能咽喉镜及鼻内镜辅助下应用喉吸引旋切刀治疗声带息肉的疗效。方法在多功能咽喉镜及鼻内镜辅助下，应用特制的喉吸引旋切刀头旋吸切除声带息肉。结果67例声带息肉一次性手术治愈64例，好转1例，无效2例。结论多功能咽喉镜及鼻内镜下应用喉吸引旋切刀治疗声带息肉可使病变部位暴露充分，手术快捷安全，是一种新的喉微创技术，可在临床推广应用。     

真核表达hCD1d二聚体的纯化及其对iNKT细胞的刺激效应

目的 建立真核表达的人CD1d(hCD1d)二聚体的纯化方法,并制备人工抗原提呈细胞,研究其对iNKT细胞的刺激效应.方法 提取pFastBacTM Dual+β2 m+ CD1d/IgG1-Fc]昆虫杆状病毒质粒并转染至sf9细胞中,收集病毒感染上清,通过ELISA法鉴定融合蛋白中人IgG-Fc、人CD1d和人β2m...     

可溶性HLA-G1-肽复合物的体外折叠和鉴定

目的 合成可溶性HLA-G1-肽复合物。方法 利用原核高效表达的可溶性HLA-G1重链和轻链（β2m）,在人工合成的HLA-G1限制性九肽（KGPPAALTL）存在的条件下,通过稀释复性折叠成可溶性HLA-G1-肽复合物。利用特异性抗体（W6／32及兔抗人β2m抗体）进行免疫印迹及酶联免疫吸附试验,检测稀释复性的折叠产物。结果 折叠复合物含有35％可溶性HLA-G1-肽复合物、5％可溶性HLA-G1重链聚合体及60％复性的β2m3种成分。结论 通过原核表达、体外折叠能够获得大量可溶性HLA-G1-肽复合物。