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41.
寻找简化中耳移植材料的保存方法。方法 采用常温下70%-75%酒精贮存彭膜,听骨等移植材料,对135耳鼓膜穿孔患者进行治疗,并进行组织学和电镜观察。结果 常温下酒精保存的脑膜,软骨,听骨可保存其基质数年不变,其中硬脑膜胶质纤维的结构保存良好。 相似文献
42.
对17例中国人C4A/C4B表型中含有Q0的个体的基因组DNA进行了HindⅢRFLP的检测。从五型C4A/C4B(3,0/1,1;3;0/2.1;3.3/1.0:3.2/1.0;3.0/1.0)中共检出5种RFLP片段组合A:32-25-15kb;B:32-15kb;C:25-15kb;D:32-15-8.5kb;E:25-15-8.5kb)。根据代表C4A基因缺失的8.5kb片段的有无,测出大约50%的C4AQ0是由基因缺失造成的。此外,本文还对C4AQ0时C4B长、短基因的分配,C4BQ0时C4基因的变动情况等进行了分析与讨论。 相似文献
43.
原核表达、体外折叠的HLA-G5促进人外周血单核细胞产生TNF 总被引:1,自引:0,他引:1
通过原核表达获得HLA-G5重链和轻链(β2m),经初步纯化后,利用稀释法与人工合成的九肽(KGPPAALTL)一起进行体外复性折叠,形成HLA-G5-抗原肽复合物,经非变性PAGE/Western blot和夹心ELISA法鉴定,证实复性后成功获得天然构象的HLA-G5。利用PBMC受LPS刺激后产生TNF的特点,观察原核表达、体外折叠的HLA-G5对人PBMC分泌TNF的影响。TNF分泌量采用TNF敏感的L929细胞进行生物法测定,结果显示原核表达、体外折叠的HLA-G5促进人PBMC分泌TNF-α。 相似文献
44.
体外诱导扩增大鼠树突状细胞及其特性鉴定 总被引:4,自引:6,他引:4
目的: 体外诱导和扩增大鼠骨髓树突状细胞 (DC)的方法, 并进行生物学特性鉴定。方法: 将大鼠骨髓细胞培养 48h后, 去除悬浮细胞, 加入IL- 4和GM- CSF培养 2wk。在光镜和透射电镜下观察培养的DC的形态学特征。应用流式细胞仪检测DC表面分子MHC-Ⅱ类分子、B7 -1、B7- 2的表达水平。将DC与同种异体T细胞混合培养, 采用MTT比色法测定不同细胞密度的DC刺激同种T细胞增殖的能力。结果: 培养的DC胞浆突起大而长, 呈树突状, 具有DC的典型形态。培养 2wk的DC表面MHC -Ⅱ类分子表达的阳性率为 74. 2%, B7- 1、B7 -2分别为 81%、76%。培养的DC具有明显刺激同种异体T细胞增殖的能力。结论: 将大鼠骨髓细胞经贴壁去除悬浮的细胞, 加入IL -4和GM -CSF培养, 可获得足量、较高纯度的DC, 为研究DC的功能奠定了基础。 相似文献
45.
目的: 提高可溶性HLA -A2 肽复合物体外折叠效率。方法: 在变性非还原条件下提取原核表达的HLA重链(HC)。通过离子交换及硫酸铵沉淀初步纯化后, 在β2微球蛋白(β2m)及特异性抗原肽 (Try369-377 )存在的情况下, 于pH6. 6的折叠缓冲体系中稀释复性。利用Westernblot及ELISA检测折叠产物。结果: 折叠复合物中主要含有HLA-A2 抗原肽复合物和β2m, 较少含有HC聚合体; 折叠效率较传统方法提高 2. 5倍。结论: 通过与传统方法作比较, 证实此法折叠效率比传统方法高, 为进一步HLA 肽四聚体及人工抗原提呈细胞的制备可提供足够可溶性的HLA -A2 肽单体。 相似文献
46.
47.
目的 探讨细胞膜染料PKH26在淋巴细胞及其亚群增殖中的应用。方法 利用PKH26染色、荧光抗体标记和流式细胞术,检测淋巴细胞及其亚群在多克隆刺激剂刺激作用下荧光强度的变化,应用相关软件分析其增殖情况,并与传统MTT方法进行比较。结果 经不同浓度的多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)刺激72h后,两种方法均能检测淋巴细胞增殖情况,其增殖强度与刺激剂浓度呈正相关(r=0.999)。经同种细胞刺激6d后,结合CD8、CD3抗体染色,经ModFit软件拟合后,PKH26能显示的T细胞亚群与T淋巴细胞明显不同的细胞增殖动力。结论 PKH26染色结合荧光抗体标记和流式细胞术,是分析淋巴细胞及其亚群增殖动力的有力工具。 相似文献
48.
目的 研究可溶性HLA-G1(HLA-G5)对人自然杀伤细胞(NK细胞)黏附到猪血管内皮细胞(PED)的抑制作用,从而降低人NK细胞对猪血管内皮细胞杀伤杀伤活性.方法 利用核转染技术将pcDNA3-HLA-G5转入LCL721.221细胞株.以RT-PCR、Dot-ELISA技术分别在基因水平和蛋白水平检测HLA-G5的表达;以人类NK细胞系(NK92)效应细胞,猪内皮细胞系(PED)为靶细胞,检测NK92在静止和流动状态下对PED的黏附作用;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HLA-G5抑制NK细胞的杀伤活性.结果 与未加入HLA-G5的对照组相比,NK92在静止和流动状态下对PED的黏附功能明显降低(P<0.01),且对HLA-G5组PED的杀伤效率均有明显下降(P<0.01).结论 HLA-G5可以通过抑制NK92对PED的黏附功能,来减轻NK92对PED的杀伤作用. 相似文献
49.
湖北地区汉族人群甘露糖结合凝集素基因多态性与冠心病易感性关系研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨湖北地区汉族人群甘露糖结合凝集素(MBL)基因外显子1区多态性的特点及其与冠心病易感性的关系。方法应用多聚酶链反应异源双链杂交技术(PCRUHG)检测145例湖北地区汉族人(健康对照组79例,冠心病组66例)的MBL外显子1区基因型,分析两组间突变基因型频率的差异。结果①B等位基因是湖北地区汉族人群MBL基因外显子1区的主要变异体,其突变位点位于54位密码子(GGC→GAC),未检出C、D变异体。②健康对照组与冠心病组MBL突变等位基因(B等位基因)频率分别为12.0%和12.9%,两者差异无统计学意义。③急性冠状动脉综合征亚组与健康对照组突变型等位基因分别为15.9%和12.0%,差异无统计学意义。结论MBL基因突变可能不是湖北地区汉族人群冠心病发病的遗传学危险因素。 相似文献
50.
吴雄文 《医学分子生物学杂志》1986,(2)
乙二醛酶 I(glyoxalase Ⅰ,简称 GLO)又称为乳酰谷胱甘肽裂解酶(lactoyl-glu-tathione lygase),是乙二醛酶系中的第一个酶。这个酶系广泛分布在动植物及微生物中,催化α-酮基醛类转化为α-羟基酸。自从1975年 K(?)mpf 等在发现人红细胞的 GLO 存在多态现象以来,已对其进行了许多研究,发现控制 GLO 多态现象的基因与 MHC 连锁在 相似文献