HLA-G5-IgGFc融合蛋白真核表达载体的克隆及鉴定

目的构建人HLA-G5-IgGFc融合蛋白真核表达载体。方法经重组PCR将HLA-G5和IgGFc基因拼接并插入T载体。鉴定后,双酶切得到融合基因并插入真核表达载体pcDNA3.1。结果PCR、限制性内切酶酶切和序列分析表明已构建pcDNA3.1-HLA-G5表达载体。结论成功构建了HLA-G5-IgGFc段融合蛋白真核表达载体。     

尖锐湿疣患者外周血白细胞分泌肿瘤坏死因子的体外研究

目的 研究尖锐湿疣复发与个体肿瘤坏死因子(TNF-α)分泌能力之间的关系,探讨尖锐湿疣的复发遗传基础。方法 利用体外多次传代培养的B淋巴母细胞样细胞株(LCL)作为TNF产生细胞,采用生物活性检测法检测LCL在LPS刺激下分泌TNF的能力。结果 实验结果显示尖锐湿疣患者组(包括复发患者和未复发患者)LCL的TNF分泌能力与正常人对照组差异无显著性(30.14%±12.27%与34.06%±12.06%,P=0.1136);而尖锐湿疣复发组的TNF分泌能力明显低于尖锐湿疣未复发组(24.75%±7.51%与36.62%±10.96%,P=0.00016);与正常人对照组比较,尖锐湿疣复发组的TNF分泌能力明显低下(P=0.00054),尖锐湿疣未复发组则与正常人对照组差异无显著性(P=0.3517)。结论 在清除治疗后残留HPV病毒的过程中,TNF参与的细胞免疫机制可能发挥重要作用。     

可溶性组织相容性抗原-G1抑制人自然杀伤细胞释放穿孔素颗粒酶介导异种排斥反应

目的：研究可溶性组织相容性抗原-G1（sHLA-G1）抑制人自然杀伤细胞（NK细胞）释放穿孔素、颗粒酶，从而降低人NK细胞对猪血管内皮细胞的杀伤作用。方法：利用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入LCL721.221细胞株，并提取sHLA-G1。以RT-PCR、斑点酶联免疫吸附（Dot-ELISA）技术分别在基因水平和蛋白水平检测sHLA-G1的表达；以人类NK细胞系（NK92）为效应细胞，猪内皮细胞系PED为靶细胞，用β-己糖氨酶释放实验检测sHLA-G1抑制NK92释放穿孔素、颗粒酶；单四唑（MTT）法检测sHLA-G1抑制NK细胞的杀伤活性。结果：与未加入sHLA-G1的对照组相比，NK92释放的β-己糖氨酶显著减少（P〈0．05），且对sHLA-G1组PED的杀伤效率均有明显降低（P〈0．01）。结论：sHLA-G1可通过抑制NK92释放穿孔素、颗粒酶以减轻NK92对PED的杀伤作用。     

湖北省免疫学会成立

经湖北省科协批准,经过半年的筹备工作,湖北省免疫学会于1986年11月1日至3日在武汉市举行成立大会及第一次学术会议。有来自全省50多个单位的免疫学工作者150多人出席了会议,收到科研论文110余篇。湖北省科协领导同志及挂靠单位同济医科大学校领导     

湖北汉族人群甘露糖结合凝集素基因外显子1多态性与SLE关联性的研究

目的：分析湖北汉族人群甘露糖结合凝集素(Mannose-Binding LectionL或Mannose-Binding Protein,MBL或MBP)基因外显子1多态性，探讨其与系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)的易感性关系。方法：采用异源双链杂交技术对111例健康正常人和41例SLE患者的MBL基因外显子1多态性进行分析。结果：①共检测出两种等位基因：野生型A和变异型B(在54位密码子由GGC→GAC)，未检出变异型C、D等位基因。②正常对照中A等位基因及B等位基因的基因频率分别为0．910和0．090，符合Hardy-Wernberg定律；与此前在日本人中报道的A及B等位基因频率0．767和0．233相比，变异型B的等位基因频率明显低于后者(P＜0．05)。③SLE病人组中B等位基因频率为0．146，高于正常对照组，但差异无显著性意义。结论：在湖北汉族人群中MBL基因外显子1具有遗传多态性，而且与已知其他人群的分布频率有一定差异。MBL基因外显子1的遗传多态性并不与系统性红斑狼疮相关联。     

SPR技术在生物、生化分析以及临床免疫学中的应用

介绍了表面等离子体共振(SPR)技术在生物、生化以及免疫检测应用中的传感器制备方法。检测系统以及样品测试方法，讨论了SPR技术的几种生化分析应用，给出了测试结果，提出了改进措施。     

人类白细胞抗原-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞的诱生及克隆

为建立一种有效诱导及克隆人类白细胞抗原(HLA)-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞(CTL)的方法.用EB病毒转化的B淋巴母样细胞系细胞作为刺激细胞,采用长期混合淋巴细胞培养法诱导自身外周血T细胞库中抗原肽-HLA复合物特异性CTL增殖、分化,并用有限稀释法对之进行克隆.通过细胞毒实验证实获得的CD3+、CD8+T细胞克隆具有高度抗原特异性并受某些HLA型别的限制.     

人补体C4短基因分布频率在我国南北人群中存在的差异

采用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法对北京（６０例）和湖北（５８例）地区随机人群的补体Ｃ４基因的长度进行检测。结果：湖北人群Ｃ４短基因的分布频率较北京人媾和高,其表型频率分别为７９．３１％、６１．４４％,基因频率分别为５１．７２％、３７．５０％,差异均有显著意义（均为Ｐ〈０．０５）,而且Ｃ４短基因在上述二个人群中的分布均符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｎｂｅｒｇ平衡。结果表明,湖北人群Ｃ４短基因的频率高于     

针刺结合运动平板改善免疫抑制大鼠的免疫功能

目的针刺结合运动平板改善免疫抑制大鼠的免疫功能。方法实验采用清洁级健康3月龄雄性Wstar大鼠100只,将其分为五组(空白组,模型组,治疗I组、治疗Ⅱ组、治疗Ⅲ组),空白组不作任何处理,其他各组均采用注射环磷酰胺溶液作为建模方法,制造免疫功能低下模型。模型组不作特殊处理,其中治疗组分别采用运动平板、针刺(分别为治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组)和综合二种手段(治疗Ⅲ组)进行治疗,针刺三里、关元、三阴交,运动平板采用运动平板进行。通过对一般状况的观察,模型体重的变化,脾脏指数的测定,体液免疫指标(血清IgA、IgG、IgM的含量)和细胞免疫指标(CD_3~+、CD_4~+T细胞的数量)的检测,研究针刺,康复锻炼以及综合针刺及康复锻炼对免疫抑制大鼠免疫功能的影响。结果治疗Ⅲ组对免疫抑制大鼠一般情况的改善优于模型组和其他治疗组;上述各治疗组的免疫抑制大鼠体重增加明显优于建模组;三种治疗方法都能改善免疫抑制大鼠的脾脏指数,但治疗Ⅲ组对免疫抑制大鼠脾脏效果的明显,作用效果优于治疗Ⅱ组和治疗Ⅰ组;治疗Ⅲ组的免疫抑制大鼠IgA,IgG,IgM均提高显著,且效果更尤于两种方法的单一应用;三种治疗方法均能提高免疫抑制大鼠CD_3~+、CD_4~+T细胞的数量,治疗Ⅲ组最为明显。结论针刺结合运动平板显著提高免疫抑制大鼠的免疫功能,效果明显优于应用单一治疗方法。实验积极探讨有利于利用针刺和运动平板来改善免疫功能低下机体的免疫功能,为其运用于临床治疗起到指导作用。     

实验教学精品课程建设

精品课程建设是全国高等学校教学质量与教学改革工程的重要组成部分,如何提高实验教学水平,不仅是课程体系建设和发展的需要,还是关乎素质教育成效的关键环节。在现有资源的基础上,开展实验精品课程建设,是提升实力、培养创新性人才和课程可持续发展的必然。