特异性CTL胞毒作用与HLA型别关系探讨

目的：探讨特异性CTL胞毒作用与靶细胞的HLA型别关系。方法：本实验以特定HLA型别，EB病毒转化的B淋巴母细胞（EBV－LCL）与同种异体单个核细胞（PBMC）混合培养，激活同种抗原特异性细胞性T细胞（CTL），观察其对携带不同HLA型别的EBV－LCL靶细胞的杀伤活性。结果：用EBV－LCL1致敏的效应细胞1对EBV－LCL2的杀伤效应比对EBV－LCL3强，用EBV－LCL2致敏的效应细胞2对EBV－LCL1的杀伤效应比对EBV－LCL3强，用EBV－LCL3致敏的效应细胞3对EBV－LCL1，2几乎无杀伤效应。结论：特异性CTL对不同HLA型别的靶细胞的胞毒作用存在差异，这不仅仅与HLA型别关联，而可能取决于抗原肽与MHC所组成的抗原综合信息。     

依托实验教学示范中心平台,深化医学机能学实验教学改革

深入研究教学质量评估指标,实施本科生客观实践技能综合考核措施;加大实验室开放力度,逐步完善医科本科生创新思维能力培养目标;以素质教育为中心,强化示范实验教学中心建设,探索和造就实用型、创新型和高素质医学综合能力人才培育途径。     

不同病程尖锐湿疣患者特异性CTL细胞频率和功能分析

.48)%,缓解期CA患者的特异性CTL杀伤活性为(59.33±1.71)%,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缓解期CA患者与复发期CA患者外周血中特异性CTL数量相近,但缓解期CA患者特异性CTL杀伤活性明显强于复发期CA患者,这可能是不同病程CA患者转归差异的根本原因.     

湖北汉人全身性红斑狼疮患者补体第4成分基因限制性片段长度多态性的研究

用Ｃ４５末端探针和限制性内切酶ＴａｑⅠ对７５例湖北汉人ＳＬＥ患者和５８例正常人进行了ＲＦＬＰ检测，同时用琼脂糖凝胶电泳免疫固定方法测定了其中５１例患者和５７例正常对照的Ｃ４蛋白质表达情况，结果发现，患者中２４例（３２．０％）的ＲＦＬＰ带型为７．０－５．４ｋｂ（Ａ型），１０例（１３．３％）为７．０－６．０ｋｂ（Ｂ型），４０例（５３．３％）患者ＲＦＬＰ带型为７．０－６．０－５．４ｋｂ（Ｃ型），仅一例（１．３％）带型为７．０－６．４－５．４ｋｂ（Ｄ型），即带有表示Ｃ４Ａ基因缺失的６．４ｋｂ片段。正常对照组中ＲＦＬＰ带型仅检出Ａ、Ｂ、Ｃ三型，与患者组在分布上无统计学差异。Ｃ４表型分析结果发现，患者中Ｃ４ＡＱ０者为２２例（４３％），正常对照中Ｃ４ＡＱ０者为１０例（１７．５％），计算ＲＲ值＝３．５６，χ２＝８．４６，Ｐ＜０．０１。上述结果表明，Ｃ４Ａ蛋白质缺失与ＳＬＥ易感性密切相关，但在湖北人群中Ｃ４Ａ蛋白质缺失的主要原因可能不是由于Ｃ４Ａ基因的缺失所致。     

纳米技术在检验医学中的应用与研究进展

纳米又称为毫微米,是一种长度计量单位,1纳米等于十亿分之一米（1 nm=10^-9m）.纳米技术（Nanotechnology）是在0.1～100.0 nm空间尺度内操纵原子和分子,对材料进行加工制造后,产出具有特定功能的产品,或对某物质进行研究,掌握其原子和分子的运动规律和特性的一门崭新的综合性科学技术.科学家们发现,物质在加工到100 nm以下时,往往会产生许多既不同于微观的原子、分子,也不同于宏观世界的神奇变化,即产生表面效应、量子尺寸效应、宏观量子隧道效应,以及由这些效应引起的与传统材料所不同的奇异或反常的物理、化学特性.纳米技术涉及面十分广泛,已辐射多个学科.纳米技术在生物医学领域也得到了广泛的发展,虽然它还处于发展初期,但纳米医学作为一门新学科的时代已经到来.纳米技术已经对生物医学检测系统产生影响,其中不同形状、不同大小和不同成分的纳米微粒对生物医学检测水平也将产生根本的变化.而纳米微粒和生物分子轭合物的制备方法在不断更新,生物连接制备的纳米粒子也在逐渐商品化,亦将对检验医学同样产生深远影响.     

采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1的真核细胞系

目的 建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1（soluble human leucocyte antigen G1，sHLA—G1）的真核细胞系。方法 采用核转染技术将质粒pcDNA3一sHLA—G1转入不表达HLA—1类分子的LCL721．221细胞，经G418筛选获得稳定转染细胞，通过RT—PCR及Dot—ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果 采用核转染法LCL721．221细胞转染效率可以达到约14％。RT—PCR检测发现了sHLA—G1基因特异性条带；采用Dot—ELISA方法利用sHLA—G1特异性抗体MEM—G／9检测，存在sHLA—G1蛋白。结论 通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA—G1的真核细胞系。     

人类白细胞抗原G1转染猪内皮细胞降低异种细胞排斥反应的研究

目的研究转染人类白细胞抗原G1(humanleukocyteantigenG1,HLA-G1)基因后的猪内皮细胞系(porcineendothelialcells,PECs)细胞,对人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)和自然杀伤细胞92(naturekillercell92,NK-92)细胞介导的杀伤作用的改变。方法利用脂质体包裹的方法,将携带HLA-G1基因的真核表达载体pcDNA3.0转染PECs细胞,在蛋白质水平通过间接免疫荧光法、在RNA水平通过RT-PCR,检测HLA-G1的表达;取6名健康志愿者,每人5ml静脉血,分离出单个核细胞和NK-92作为效应细胞,利用51Cr释放试验来检测其杀伤作用的改变。结果转染HLA-G1基因后,在转染的内皮细胞中蛋白质水平和RNA水平均检测到HLA-G1基因的表达;PBMC和NK-92细胞介导的对PECs细胞的杀伤作用均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论转染HLA-G1后的PECs,可有效地降低由人NK细胞介导的杀伤作用,从而为抑制异种细胞排斥反应提供了新的思路。     

血管内皮细胞系表达的HLA-G1抑制同种T细胞增殖及活性

目的研究血管内皮细胞系人脐静脉内皮细胞(ECV304)表达的HLAG1分子对同种异体T细胞增殖的作用。方法采用脂质体介导的DNA转染技术,将构建的真核表达质粒pcDNA3HLAG1转染ECV304,用免疫荧光法检测其表达的HLAG1分子。将表达HLAG1的ECV304与同种异体T细胞进行混合细胞培养后,用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测ECV304表达HLAG1对外周血T细胞增殖和抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的影响。结果ECV304转染pcDNA3HLAG1后可稳定表达HLAG1分子;转染空质粒pcDNA3和转染pcDNA3HLAG1的T细胞的刺激指数分别为(1.59±0.41)和(1.33±0.46),二组比较,差异有统计学意义(P<0.05);细胞毒实验显示,抗原特异性CTL对转染空质粒pcDNA3和转染pcDNA3HLAG1的ECV304的杀伤率分别为(64.81±3.07)%和(52.33±4.48)%,二组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HLAG1分子可以抑制同种异体T细胞的增殖和CTL的细胞毒作用。     

人补体第4成分基因在各种HLA单倍型上的结构特点及其规…

对５５个已知ＨＬＡ单倍型的细胞株进行人补体第４成分（Ｃ４）基因限制性片段长度多态性（ＲＥＬＰ）检测，在所检测的２４种ＨＬＡ单倍型中观察到７种Ｃ４基因结构形式；探讨了Ｃ４蛋白质的遗传多态性与其基因结构多态性之间的关系；阐述了Ｃ４基因结构与ＨＬＡ祖传单倍型（ＡＨ）之间严格的规律性，相同的ＨＬＡ单倍型携带关同样的Ｃ４基因结构形成，即Ｃ４基因的结构多态性具有ＨＬＡ单倍型性质，而且的４Ｃ基因结构形式为某一种